不同檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定血清肌酐、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的比對(duì)分析和偏倚評(píng)估

孫國(guó)華，韓 青，孫芹敏

(大連醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116011)

全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)系統(tǒng)經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展越來(lái)越趨向于大型化、規(guī)?；捎谧陨砭哂泄δ軓?qiáng)、檢測(cè)項(xiàng)目多、速度快、靈活度高、成本低等優(yōu)點(diǎn)，適合大批量的標(biāo)本檢測(cè)；但是同一實(shí)驗(yàn)室不同的全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)出的同一項(xiàng)目的結(jié)果存在一定的差異。不同全自動(dòng)生化分析儀之間，由于檢測(cè)系統(tǒng)配置的不一致，常導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的不一致。這種在不同實(shí)驗(yàn)室之間，或在同一實(shí)驗(yàn)室不同儀器之間所存在的差別，常被人們所忽略，從而使檢驗(yàn)的結(jié)果具有不確定性，常會(huì)給臨床帶來(lái)混亂。因此，為了驗(yàn)證同一項(xiàng)目在不同全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定結(jié)果是否一致，本文按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)的EP9-A文件要求[1]，對(duì)實(shí)驗(yàn)室兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀上的血清肌酐(CREA)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析和偏倚評(píng)估。

1 材料和方法

1.1 材 料

1.1.1 儀器：日本日立7600-110型及7170s型全自動(dòng)生化分析儀。

1.1.2 試劑：CREA試劑由上海申索佑福醫(yī)學(xué)診斷用品有限公司提供，ALT由日本世諾臨床診斷制品株式會(huì)社提供。

1.1.3 校準(zhǔn)品：Roche公司生產(chǎn)的c.f.a.s校準(zhǔn)品。

1.1.4 質(zhì)控品：由RANDOX公司提供，批號(hào)為608UN和403UE。

1.1.5 樣本：采集樣本為當(dāng)日臨床患者血清，其濃度選擇嚴(yán)格按照EP9-A文件中的方法比對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分布建議要求(質(zhì)量濃度)，采集標(biāo)本時(shí)濃度盡可能在檢測(cè)范圍內(nèi)。

1.2 方 法

1.2.1 方法的選擇：因日立7600-110全自動(dòng)生化分析儀參加室間質(zhì)評(píng)成績(jī)合格，室內(nèi)質(zhì)控CV值均小于CLIA’88規(guī)定的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)允許誤差范圍的1/2，因此以日立7600-110全自動(dòng)生化分析儀為參比方法(X)，以日立7170s全自動(dòng)生化分析儀為實(shí)驗(yàn)方法(Y)；試劑的線性范圍是CREA 0～3500 μmol/L,ALT 可達(dá)1000 U/L。

1.2.2 儀器校準(zhǔn)：常規(guī)開(kāi)機(jī)，使用上述兩種儀器的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.2.3 質(zhì)控：使用RANOX正常水平和病理水平的質(zhì)控血清在兩臺(tái)日立全自動(dòng)生化分析儀上做日常質(zhì)控。

1.2.4 樣品的測(cè)定：對(duì)選好的標(biāo)本進(jìn)行排序，在7600-110全自動(dòng)生化分析儀(X)和日立7170s全自動(dòng)生化分析儀(Y)上，分別對(duì)標(biāo)本進(jìn)行CREA和ALT的測(cè)定，每天測(cè)定8份樣本(測(cè)定順序?yàn)?、2、3、4、5、6、7、8，8、7、6、5、4、3、2、1，做雙份平行測(cè)定)，連續(xù)測(cè)定5 d，共得到40組數(shù)據(jù)。對(duì)于每天特定樣本參比方法(X)和實(shí)驗(yàn)方法(Y)測(cè)定的時(shí)間差要在2 h內(nèi)完成，每個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

不同檢測(cè)系統(tǒng)新鮮血清測(cè)定結(jié)果的統(tǒng)計(jì)采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)資料的方差分析、相關(guān)分析和回歸分析。所有數(shù)據(jù)均在Excel 2000和SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件上進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 CERA的結(jié)果

CREA在7600-110(X)和7170s(Y)全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行雙份平行測(cè)定數(shù)據(jù)繪制散點(diǎn)圖和偏倚圖。平行測(cè)定CREA雙份值均值的散點(diǎn)圖見(jiàn)圖1，偏倚圖見(jiàn)圖2。雙份平行測(cè)定CREA全部數(shù)據(jù)的散點(diǎn)圖見(jiàn)圖3，偏倚圖見(jiàn)圖4。

圖1 CREA雙份值均值的散點(diǎn)圖

以參比方法(X)的測(cè)定值為x，以實(shí)驗(yàn)方法(Y)的測(cè)定值為y，CREA均值和雙份值的相關(guān)系數(shù)(r)，決定系數(shù)為(r2)和直線回歸方程(y=kx+b)如表1所示。CREA在3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)、預(yù)期偏倚的估計(jì)值、預(yù)期偏倚95%可信區(qū)間的上限及下限、1/ 2 CLIA’88允許誤差(%)、允許誤差范圍的上限及下限見(jiàn)表2。

圖2 CREA雙份值均值的偏倚圖

圖3 CREA雙份值全部數(shù)據(jù)散點(diǎn)圖

圖4 CREA雙份值全部數(shù)據(jù)偏倚圖

2.2 ALT的結(jié)果

ALT在7600-110(X)和7170s(Y)全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行雙份平行測(cè)定的數(shù)據(jù)繪制成散點(diǎn)圖和偏倚圖。平行測(cè)定ALT雙份值均值的散點(diǎn)圖見(jiàn)圖5，偏倚圖見(jiàn)圖6。雙份平行測(cè)定ALT全部數(shù)據(jù)的散點(diǎn)圖見(jiàn)圖7，偏倚圖見(jiàn)圖8。

以參比方法的測(cè)定值為x，以實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定值為y，ALT均值和雙份值的相關(guān)系數(shù)(r)，決定系數(shù)為(r2)和直線回歸方程(y=kx+b)如表3。ALT在3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)、預(yù)期偏倚的估計(jì)值、預(yù)期偏倚95%可信區(qū)間的上限及下限、1/ 2 CLIA’88允許誤差(%)、允許誤差范圍的上限及下限如表4。

表1 CREA均值和雙份值的相關(guān)系數(shù)及回歸方程

表2 CREA在3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處的各項(xiàng)指標(biāo)

圖5 ALT雙份值均值的散點(diǎn)圖

圖6 ALT雙份值均值的偏倚圖

圖7 ALT雙份值全部數(shù)據(jù)散點(diǎn)圖

圖8 ALT雙份值全部數(shù)據(jù)偏倚圖

表3 ALT均值和雙份值的相關(guān)系數(shù)及回歸方程

表4 ALT在3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處的各項(xiàng)指標(biāo)

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)中的散點(diǎn)圖，在標(biāo)度上的差別可以用來(lái)決定非線性關(guān)系，在全部測(cè)定范圍內(nèi)，檢查參比方法(X)和實(shí)驗(yàn)方法(Y)的數(shù)據(jù)圖是否有線性關(guān)系，測(cè)定CREA、ALT的結(jié)果在兩方法間呈良好的直線相關(guān)，可以進(jìn)行下一步檢驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)中的偏倚圖，在標(biāo)度上的差別可以用來(lái)決定非線性關(guān)系，在全部測(cè)定范圍內(nèi)，兩方法間CREA、ALT的均值和雙份值之差在實(shí)驗(yàn)方法間在線性范圍內(nèi)，并且分布在X=0的中線附近。

參比方法(X)的測(cè)定范圍可以用相關(guān)系數(shù)r做估計(jì)，如果r≥0.975(或r2≥0.95)則可以認(rèn)為參比方法(X)分布范圍合適，如表1和表3，兩方法間CREA、ALT的均值和雙份值的相關(guān)系數(shù)r都滿足條件，說(shuō)明數(shù)據(jù)的分布范圍合適，可以用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法分析各實(shí)驗(yàn)方法(Y)與參比方法(X)之間的系統(tǒng)誤差，兩檢測(cè)系統(tǒng)是從統(tǒng)計(jì)學(xué)和臨床標(biāo)準(zhǔn)判斷分析本實(shí)驗(yàn)的，避免了比對(duì)實(shí)驗(yàn)的差異有顯著性意義，得不出可比性的結(jié)論。CREA、ALT在3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平Xc處的估計(jì)值、可信限、允許誤差等見(jiàn)表2和表4，從表中給定的3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平Xc范圍可以看出，估計(jì)值在可信限和允許誤差范圍內(nèi)均符合要求。

EP9-A文件是美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS) 在1995年出臺(tái)的標(biāo)準(zhǔn)化系列文件之一。文件中提供了實(shí)驗(yàn)比對(duì)的方法，并且適用于同一標(biāo)本采取不同方法(儀器或試劑) 檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析和偏倚評(píng)估，其評(píng)價(jià)的結(jié)果確保真實(shí)可靠[2]。文件中還規(guī)定，根據(jù)計(jì)算出的最后結(jié)果，判斷可接受誤差與預(yù)期偏差95%可信區(qū)間的關(guān)系，具體內(nèi)容可以有以下3種情況：(1)可接受誤差落在預(yù)期偏差95%的可信區(qū)間范圍內(nèi)，表示兩種檢測(cè)系統(tǒng)的偏倚可以接受；(2)可接受誤差落在大于預(yù)期偏差95%的可信區(qū)間上限，則表示有97.5%的概率得出兩系統(tǒng)的結(jié)果具有一致性，兩種檢測(cè)系統(tǒng)的偏倚可以接受；(3)可接受誤差落在小于預(yù)期偏差95%可信區(qū)間下限，則表示有97.5%的概率得出結(jié)果不具有一致性，兩種檢測(cè)系統(tǒng)的偏倚不可以接受[3]。本實(shí)驗(yàn)采用的允許誤差判斷標(biāo)準(zhǔn)為1/2CLIA’88，是中國(guó)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦并使用的標(biāo)準(zhǔn)[4]。由于CLIA’88應(yīng)用范圍比較廣泛，是室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)之一，其體現(xiàn)的是可接受方法誤差的總誤差(隨機(jī)誤差+系統(tǒng)誤差) 的最低水平，而且EP9-A 文件提供的方法只是從引入系統(tǒng)誤差大小上考慮，并沒(méi)有將隨機(jī)誤差考慮在內(nèi)，所以本實(shí)驗(yàn)將CLIA’88允許誤差的1/ 2 作為方法比對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)果系統(tǒng)誤差的允許限值，以使其結(jié)果更具有說(shuō)服力[5]。CREA、ALT在兩檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)定結(jié)果在比較范圍內(nèi)與參比方法(X)均具有可比性。臨床可接受性能的評(píng)價(jià)未超過(guò)1/2 CLIA’88規(guī)定允許誤差，說(shuō)明可比性符合臨床要求。

檢測(cè)系統(tǒng)是指完成一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目所涉及的儀器、校準(zhǔn)品、試劑、保養(yǎng)計(jì)劃、檢驗(yàn)程序等的組合[6]。本文對(duì)兩臺(tái)分析儀及所用的不同試劑的兩個(gè)不同檢測(cè)系統(tǒng)作了比對(duì)分析，從結(jié)果中看出，兩臺(tái)分析儀重復(fù)性及相關(guān)性均符合儀器的要求。

本文研究表明，在兩種全自動(dòng)生化分析儀上CREA、ALT的測(cè)定結(jié)果具有可比性，差別無(wú)顯著性意義。在不同實(shí)驗(yàn)室之間，或在同一實(shí)驗(yàn)室不同儀器之間所存在的差別，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)研究，這樣才能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性，從而為臨床提供一組可靠的檢測(cè)結(jié)果，滿足臨床診斷的需要。

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