用BED－CEIA方法估算2010年云南省玉溪市MSM人群HIV-1感染

高良敏，陳 良，趙金仙，魯建波，馬 懿,李連學,郭春園，李孝安

（1.玉溪市疾病預防控制中心，云南 玉溪 653100；2.紅塔區疾病預防控制中心，云南 玉溪 653100）

自Janssen等于1998年報道了采用實驗室血清學方法檢測艾滋病病毒(HIV)新近感染，進而估算發病率以來，實驗室方法檢測新近感染估算HIV發病率就受到越來越多的關注[1]。HIV-1 BED捕獲酶免疫測定法（簡稱BED-CEIA）是目前應用最為廣泛最成功的識別HIV新發感染實驗室監測方法，并成為其它新近感染檢測方法評價的重要參照[2～4]。2010年在云南省疾病預防控制中心性艾中心實驗室的支持下，應用BED-CEIA方法在玉溪市MSM人群(Men who sex with men，MSM)艾滋病監測哨點中開展 HIV-1新近感染檢測，旨在初步了解 MSM人群HIV-1的感染及對BED-CEIA方法的擴展應用進行初步探討。現將結果報告如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象

根據云南省MSM哨點監測方案要求，對在監測期內進入同一哨點的目標人群MSM人群采用連續抽樣的方法開展行為學和血清學調查，HIV抗體初篩陽性者采用免疫印跡試驗或HIV抗體替代策略確證，所有HIV-1抗體陽性標本送云南省疾控中心保存。

1.1.2 研究樣本入選及排除標準[5]

入選標準如下：①根據《全國艾滋病檢測技術規范》，標本診斷為HIV-1抗體陽性的血樣（包括WB確認陽性和替代策略檢測陽性）；②樣品保存條件：保存在-20℃以下，凍融次數小于三次；③樣品質量：要求清亮、無嚴重溶血；④沒有交叉污染，個案信息準確。

排除標準如下：①已知長期感染的樣本（通過姓名等個人信息，查閱既往的檢測記錄及艾滋病專報系統，確定是否為原陽性）；②所有已知HIV-1抗體陽性超過6個月的原陽性樣本，所有艾滋病病人樣品及接受抗病毒治療感染者的樣本，視為長期感染樣本，不進行BED檢測；③對有多份陽性樣本的HIV新報告感染者，只將首份樣品納入新近感染檢測；④所有CD4＜200的艾滋病病人樣品（如有CD4細胞檢測結果）。艾滋病病人及抗病毒治療人員仍納入HIV-1感染率指標的計算。

1.2 方法

1.2.1 檢測試劑及結果判斷[2]

使用Calypte HIV-1 BED新近感染檢測試劑盒（Calypte Biomedical Corperation，美國，批號：BF2501），該檢測分初篩檢測及確認檢測。初篩試驗中樣品為單份檢測，其ODn值＞1.2時為長期感染，ODn值≤1.2時做確認檢測，即三孔重復檢測。確認試驗中，若ODn值≤0.8時，該份樣品認為是新近感染，可以指明平均血清陽轉時間為155天；確認試驗ODn值＞0.8時為長期感染。

1.2.2 質量控制

試驗操作在云南省疾控中心艾滋病確證中心實驗室進行。操作人員參加艾滋病新發感染的相關培訓，實驗室參加國家CDC及美國CDC組織的BED-capture EIA檢測能力驗證。嚴格按試劑盒說明書進行實驗操作及結果判斷，采用Excel錄入數據和分析，包括檢測人群總數、HIV-1抗體陽性人數、BED-CEIA檢測人數和新近感染人數。

1.2.3 計算公式[6～7]

使用中國校正系數對所獲得的 HIV-1數據進行校正，分別為：W＝155天，α=0.7682，β=0.7231，γ=0.9443，ε=0.0557。新近感染率估算公式：HIV-1年新近感染率=[(365/155)×HIV-1近期感染人數]/[HIV-1抗體陰性數+(365/155)×HIV-1近期感染人數]×100%。95%可信區間：95% CI=+/-1.96(I/SQRT R)。HIV感染率=監測人群中所有HIV-1抗體陽性人數/總監測人數。

2 結果

2.1 基本情況

監測的105例MSM人群中，平均年齡33.3±11.3歲；與異性婚姻狀況中,未婚57例（占54.3%），已婚有配偶38例，占36.2%，離異或喪偶10例，占9.5%；文化程度為文盲者1例，占1.0%，小學18例，占17.1%，初中38例，占36.2%，高中及中專30例，占28.6%，大專及以上18例，占17.1%；民族為漢、彝、回、壯及其他族5個民族，以漢族居多（87例，占82.9%），彝族11例（占10.5%），回、壯各2例各占1.9%；有13個職業中，無業（20例，占19.04%）、服務行業（9例，占8.6%）、農民（12例，占11.4%）、醫務人員（10例，占9.5%）居多，其余職業54例（占51.4%）。

2.2 HIV年新近感染情況

2010年玉溪市MSM哨點檢測人數105人，13例HIV陽性，BED方法檢測得出3例為HIV-1陽性，初步判斷為新近感染。根據新近感染率估算公式[6～7]，計算得到2010年玉溪市 MSM人群 HIV-1年新近感染率為 6.67%（95%CI:2.07%～14.18%）。

3 討論

近年來，國內對于BED-CEIA方法的研究主要集中于靜脈注射吸毒人群[8～10]，很少應用于其他人群。胡海洋等[11]應用BED-CEIA方法對江蘇省MSM人群HIV-1年新近感染率進行研究，估算得出的年新近感染率為 7.54%（95%CI:4.46%～10.62%）。本研究用同樣方法對玉溪市MSM人群HIV-1年新近感染率估算的結果為6.67%（95%CI 2.07%～14.18%），略低于上述結果，但值得注意的是遠遠高于同樣方法監測的吸毒人群、性病就診者、孕產婦人群[8～10]，同樣也遠遠高于2010年玉溪市用相同方法估算靜脈注射吸毒人群的年新近感染率1.20%（95%CI:1.37%～2.55%）。可見，MSM人群HIV-1的感染較為嚴重，已經遠遠高于其他人群，加強監測干預時不可待。

在 MSM人群中開展類似研究除江蘇省有報道外[8]，還未見更多關于MSM人群年新近感染的報道。本研究的局限性及建議如下：只為一年的監測結果，僅供橫向比較，縱向比較MSM人群的感染趨勢仍需進一步跟蹤完善；BED-CEIA發病率的評估結果只適用于應用此方法對其進行研究的人群，對于更多人群的推斷，必須有合法的輔助數據的支持才能進行[12],特此對于BED-CEIA在MSM人群中的應用還有待于探討；無論是橫斷面血清學調查、病例為基礎的HIV-1監測還是連續的代表性的研究都必須有充足的樣本的數量以作出HIV-1發病率評估的正確結論[12]，而本研究樣本數相對不足，可能會影響結果的穩定性。盡管本研究結果有諸多不足之處，但從結果粗略可見MSM人群HIV-1的感染較其他人群嚴重，加強干預、監測工作勢在必行。特此，本結果僅供橫向比較參考，不建議用于MSM人群新近感染趨勢的評估。

（特別感謝云南省疾控中心艾滋病中心實驗室的支持！）

[1]Janssen RS,Satten GA,Stramer SL,et a1.New testing strategy to detect early HIV 1 infection for use in incidence estimates and for clinical and prevention purposes[J].JAMA,1998.280:42-48.

[2]Parekh BS,Kennedy MS,Dobbs T,et al.Quantitative detection of increasing HIV type1 antibodies after seroconversion:a simple assay for detecting recent HIV infection and estimating incidence[J].AIDS Res Hum Retroviruses, 2002,18:295-307.

[3]Hargrove JW, Humphrey JH, Mutasa K, et al.Improved HIV-1 incidence estimates using the BED capture enzyme immunoassay[J].AIDS,2008,22(4):511-518.

[4]Westreich D,Pettifor A,Karuta E,et al. Over estimation of the South African HIV incidence using the BED IgG,assay[J].S Afr Med J,2007,97(7):476-478.

[5]CDC.HIV Incidence Surveillance : Estimating National and Local HIV Incidence Using a Population-based Serologic Method to Detect Recent HIV-1 Infection[R].March 30,2005.

[6]呂 繁,趙金扣,蔣 巖,等.BED HIV-1發病監測方法及其應用[J].中國艾滋性病,2006,12(2):179-181.

[7]田 飛,蔣 巖.BED-CEIA HIV-1發病捕獲酶聯法應用的現狀和發展趨勢[J].中國艾滋病性病,2007,13(6):582-584.

[8]梁 妹,魏東兵,曾亞莉,等.BED HIV-1發病捕獲酶免疫測定法檢測四川省2006年吸毒哨點HIV新發感染[J].中國艾滋病性病,2008,14(2):115-117.

[9]王豫林,韓 梅,王憨杰,等.應用BED-CEIA方法估算重慶市靜脈吸毒人員HIV發病率[J].中華流行病學雜志,2007,28(11):1077-1080.

[10]楊 莉,馬艷玲,羅紅兵,等.云南省2000-2007年靜脈吸毒者、性病就診者和孕產婦HIV-1新近感染率及流行趨勢變化[J].中華流行病學,2008,29(12):1204-1207.

[11]胡海洋,沈 圣,還錫萍,等.應用BED-CEIA方法估算江蘇省男男性行為人群艾滋病病毒感染的新發感染率[J].南京醫科大學學報(自然科學版),2010,30(4):467-471.

[12]張麗芳,鄭克勤,李 洪.使用BED捕獲酶聯免疫方法對HIV—1發病率估計和監測的要點和建議[J].皮膚病與性病,2007,29(3):29-31.