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人胎盤膜鐵蛋白同類型雙亞基功能\\鐵核結構和釋放鐵動力學研究

2011-04-12 00:00:00羅聯金宏偉蔡宗葦黃河清
分析化學 2011年2期

摘 要 以人胎盤組織為實驗材料,小批量制備電泳純人胎盤膜鐵蛋白 (HPMF),對其結構與功能進行研究。十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDSPAGE)技術揭示, HPMF蛋白殼由分子量分別為15 kDa(MF15)和20 kDa(MF20)的亞基組成,其中MF15蛋白含量約為MF20的3倍。經肽質量指紋圖譜(PMF)技術鑒定,發現PHMF的MF15和MF20亞基與人鐵蛋白(HF) L亞基均具有較高的同源性,提出HPMF由單類型但分子量不同的雙亞基組成的新觀點。在選用基質輔助電離激光解吸飛行時間質譜(MALDITOF MS)技術直接分析HPMF亞基穩定性過程中,獲得5個質荷比(m/z)值為 5071.25, 9962.51, 15131.55 (MF15),19936.40(MF20)和20147.61的特征質譜峰,其對應的亞基分子式分別為[MF15]3+,[MF20]2+,[MF15]+,[MF20]+和[MF20+Fe]+。ICPMS分析發現,HPMF鐵核中的鐵和無機磷酸鹽(Pi)含量僅為85Fe3+/HPMF 和15Pi/HPMF,其中Fe3+/Pi比值約為5.72,明顯低于絕大多數哺乳動物鐵蛋白,但卻高于細菌鐵蛋白(BF)。在釋放鐵動力學方面,HPMF以一級反應動力學途徑釋放完整鐵核中的鐵量,其釋放時間約需750 min,其釋放鐵的速率慢于馬脾鐵蛋白(HSF)和豬胰鐵蛋白(PPF)(約60 min)。根據HPMF完全不同于大部分哺乳動物、植物和細菌鐵蛋白的新穎結構與功能,提出HPMF在母體和胎兒之間中起著釋放、儲存和轉運鐵的復合生理功能的鐵轉運模型。

關鍵詞 人胎盤膜鐵蛋白; 單類型亞基; 亞基作用; 鐵轉運模型; 結構與功能

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