國外兔人工授精技術介紹

蔣美山，蒲華靖

（1.重慶市開縣畜牧技術推廣站，重慶 開縣，405400；2.重慶市開縣農業委員會，重慶 開縣 405400）

1 所需的材料

1.1 試劑 凡士林，精液稀釋液（4°C保存），促排3號。

1.2 設備 硅膠安全套，血細胞計算器，輸精槍，集精瓶，輸精管，顯微鏡，載玻片，烘箱，吸管，PVC管，注射器，帶針頭注射器，集精杯，保溫箱，水浴鍋，恒溫箱，保溫箱、試管架。

2 方法

2.1 組裝假陰道

2.1.1 用玻璃棒將硅膠避孕套插入PVC管中。

2.1.2 翻轉硅膠避孕套使其包裹在PVC管的兩端，不斷調整硅膠避孕套使其內部成“一”字型。

2.1.3 如果假陰道是冷的，須用50mL的注射器向避孕套和PVC管之間的空間注入 40～45mL 55℃溫水。

2.1.4 把集精杯套在假陰道上。

2.1.5 立即使用或保存在55℃的烘箱備用。收集精液時，假陰道的溫度應該在41～42℃，如果溫度太冷，公兔將不會射精或者排尿。

2.2 收集精液

2.2.1 抓住臺兔頸背皮膚將其送到公兔籠中，公兔將立即爬跨臺兔。

2.2.2 將假陰道靠近公兔的陰莖，讓其插入假陰道并射精。在交配結束時公兔從臺兔背部翻滾下來說明射精成功，否則反之。

2.2.3 采精結束后，豎直采集器，取下集精杯，放到保溫箱的試管架中。

2.3 精液檢測 通過以下指標評估精液質量。

2.3.1 射精量。如果精液中有果凍樣凝結物存在，須在測定前，用吸管將其移除。通過精液收集管上的刻度線可以直接讀出精液的體積。標準值在0.3～2mL，平均值為0.8mL。

2.3.2 外觀。精液呈乳白色表明是正常的，像水樣的精液說明精子的濃度低，呈黃色說明有尿液存在，有棕色、紅色或者顆粒存在說明精液被血污染。

2.3.3 活力。將吸管吸一滴精液在預熱到38℃的載玻片上，再用蓋玻片蓋上，通過顯微鏡觀察直線活動精子占精子總數的比例。正常精液精子的活力在0%～100%，但是僅僅活力在70%以上的精液可以用于人工授精。

2.4 精液稀釋

2.4.1 在人工授精前1h，將精液稀釋液在水浴鍋里加熱到35℃。

2.4.2 根據精液的質量（濃度和活力），用稀釋液將精液稀釋4-10倍（即加入3～9倍體積的稀釋液），并裝入在15mL的管子中。稀釋過程注意：應以逐滴添加的方式向精液中加入稀釋液，每次滴加完后，應輕柔地搖動混合，直到初始體積的2倍；加入更大劑量的稀釋液直到想要的體積。

2.4.3 精液在稀釋液中的質量評估。

2.4.4 評估稀釋后精液的質量。注意在精液稀釋后不要立即評估其質量，因為稀釋本身會對精液產生短暫的不良影響，否則容易引起誤判導致質量好的精液被丟棄。

2.5 人工授精

2.5.1 將稀釋好的精液裝入輸精瓶，然后裝載到輸精槍上，再把輸精管套在輸精槍的前端。

2.5.2 輸精前肌肉注射促排3號 0.8μg。

2.5.3 助手一手抓住母兔的耳朵和頸皮，另一只手輕輕按住背部，把母兔保定在桌面上。

2.5.4 輸精者一手抓緊兔尾根皮膚，緩慢抬起母兔后驅并懸空，使外陰盡可能高地暴露，另一只手用槍頭撥開母兔外陰，沿著脊背方向進槍輸精。

2.5.5 緩慢按壓輸精槍活塞將精液注入（0.5mL），然后緩慢將輸精槍拔出，并順勢在母兔臀部輕拍一下。