抗風濕類中成藥和保健食品中非法添加雙氯芬酸鈉快速篩查方法研究

2011-05-26 07:18:22池浩波張夢虹李國毅黃冬梅

中成藥 2011年6期

池浩波，張夢虹，李國毅，黃冬梅

(廣東省潮州市藥品檢驗所，廣東潮州 521011)

我國地理緯度跨度大，高寒、高濕地區多，特別是少數民族居住的氣候條件惡劣的山區。同時，我國農村人口較多，聚居及生活工作在高寒、高濕環境，感受風寒濕三氣的機會較多，因此具有較高的風濕病發病率［1］。

千百年來，人們一直同風濕病進行頑強的斗爭，積累了豐富的經驗，經過數千年的探索和實踐，中醫對風濕病的認識、治療得到進一步的發展，并形成了系統的中醫風濕病學理論，中成藥是由中草藥直接加工而成，方便病人服用，在規定的劑量內中藥副作用少，但中藥的藥性緩和，所以藥效也比化學藥(俗稱西藥)要慢一些。西藥療效較為明顯，但同時副作用也比中藥大一些，因此大多數西藥都不適合長期服用，必須在醫生的指導下服用［2］。

由于用于治療風濕疾病的化學藥雙氯芬酸鈉價格低廉，且有一定的控制風濕性和類風濕性關節炎的功效。為了迎合患者既想快速治療風濕疾病又想副作用小的心理，近年來雙氯芬酸鈉屢被一些不法商家加入到治療風濕、類風濕疾病的中成藥和保健食品中，并被標榜為所謂的“祖傳秘方”、“純中藥制劑”或“天然食品”，以增強其療效，從中牟取暴利。患者在不知情的情況下服用了含有雙氯芬酸鈉的中成藥或保健食品后，癥狀看似緩解了，認為有“療效”，其實往往會掩蓋病情，有可能產生嚴重的后果，危害身體健康，如長期口服非甾體抗炎藥的患者中，大約有10% ～25%的病人發生消化性潰瘍，嚴重的并發癥會導致出血或穿孔;能導致10%的患者出現肝臟輕度受損的生化異常;可引起尿蛋白、管型，尿中可出現紅、白細胞等，嚴重者可引起間質性腎炎等;有的會造成骨質疏松或肌肉萎縮等嚴重不良反應，使得病情惡化，甚至導致癱瘓［3］。

為了凈化我國的藥品市場，打擊不法分子的囂張氣焰，保護廣大人民群眾的身體健康，本實驗建立一種簡單、快速、高效、可靠的篩查方法，以滿足基層藥品現場打假的需求。

1 擬定快速篩查方法的標準操作規程

1.1 取樣量各種口服制劑均取一次服用量，片劑可壓碎或剪碎(紅色糖衣片應除去糖衣);膠囊劑取內容物;丸劑研碎或剪碎;口服液直接取服用量;酊劑取約1 mL。

1.2 供試液的制備取經壓碎或剪碎的一次服用量固體樣品于20 mL具塞試管中，加入乙醇約10 mL，密塞，上下強烈振搖約1 min，濾過，取續濾液約1 mL作為供試液。

1.3 檢驗方法與結果判斷在供試液中加入40%硝酸溶液約1 mL(注意加入硝酸溶液時不要振搖)，約40～50 s后檢視，如試管下部顯紅棕色，則可判斷供試品中含有雙氯芬酸鈉;如試管下部不變色或顏色變淺，則不含雙氯芬酸鈉。

2 確證方法采用薄層色譜法和高效液相色譜法。

2.1 薄層色譜法取一次服用量的樣品于具塞錐形瓶中，加乙醇10 mL，振搖提取1 min，濾過，濾液作為供試品溶液;另取雙氯芬酸鈉對照品適量，加乙醇制成每1 mL含2.5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010版附錄Ⅵ B)試驗［4］，分別吸取上述兩種溶液各 1 μL，分別點于同一硅膠GF254板上，以乙酸乙酯－乙醇(15∶5)為展開劑［5］，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。見圖1。

圖1 TLC薄層鑒別色譜圖

2.2 高效液相色譜法

2.2.1 檢測波長的選擇精密稱取雙氯芬酸鈉對照品適量，加甲醇制成每1 mL中含雙氯芬酸鈉約10 μg的溶液，于400～190 nm波長范圍內掃描，結果在204.4 nm與281.2 nm的波長處有最大吸收，參考有關文獻［6］，故選擇281 nm作為本品的檢測波長。

2.2.2 色譜條件和系統適應性參考有關文獻［6－7］，采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充柱的色譜柱，以二極管陣列式檢測器(DAD)為檢測器，以甲醇－0.2%冰乙酸溶液(3∶2)為流動相，檢測波長為281 nm，進樣量為10 μL，雙氯芬酸鈉的理論塔板數不低于10 000，與其它色譜峰的分離度大于1.5。

2.2.3 對照品溶液的制備精密稱取雙氯芬酸鈉對照品約15 mg，置100 mL量瓶中，加適量甲醇振搖使溶解，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.4 供試品溶液的制備若供試品為片劑(如糖衣片應去糖衣)，稱量后研磨粉碎，然后稱取一次服用量的樣品，置100 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理10 min，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻;若供試品為膠囊劑，取出內容物研磨粉碎，然后稱取一次服用量的樣品，置100 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理10 min，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻;若供試品為丸劑，稱量后研碎或剪碎，然后稱取一次服用量的樣品，置100 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理10 min，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻;若供試品為口服液，直接量取一次服用量的樣品，置100 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻;若供試品為酊劑，直接量取約1 mL的樣品，置100 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理10 min，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

上述溶液經微孔濾膜過濾后，分別吸取10 μL，注入液相色譜儀，若供試品色譜峰保留時間與雙氯芬酸鈉對照品色譜峰的保留時間一致，且供試品溶液與對照品溶液具有相同的紫外光譜圖，則初步確證供試品中含有雙氯芬酸鈉。HPLC－DAD 圖譜見圖2～5。