高效液相色譜法測定小兒氨酚烷胺顆粒中對乙酰氨基酚的含量

閆海燕

(寶雞文理學院 陜西省植物化學重點實驗室，陜西 寶雞 721013)

小兒氨酚烷胺顆粒是由對乙酰氨基酚、咖啡因、撲爾敏、人工牛黃等組成的復方制劑，常用于兒童傷風感冒引起的鼻塞、咽喉痛、頭痛、發熱等[1，2]。其中主要成分對乙酰氨基酚含量測定的藥典方法不僅復雜且不夠準確。在文獻[3，4]的基礎上，作者建立了一種快速檢測小兒氨酚烷胺顆粒中對乙酰氨基酚含量的高效液相色譜法，結果令人滿意。

1 實驗

1.1 材料、試劑與儀器

小兒氨酚烷胺顆粒(批號為1008035、20100834、623136726100815)購自藥店。

對乙酰氨基酚對照品(批號為100018-200408)，中國藥品生物制品檢定所；甲醇(色譜純)，美國Methanex公司；娃哈哈純水。

Agilent 1200型高效液相色譜儀(G1328B二級管陣列檢測器)，美國安捷倫公司；KQ5200E型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；DZF-1型電熱恒溫鼓風干燥箱，上海一恒科學儀器有限公司；ME254S型電子天平，德國Sartorius公司；UV-2550型紫外分光光度計，日本島津公司。

1.2 對照品溶液的制備

精密稱取105 ℃干燥至恒重的對乙酰氨基酚對照品0.0146 g，置50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

1.3 樣品溶液的制備

分別取3種批號的小兒氨酚烷胺顆粒6袋，研細，精密稱取1/6袋，置100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，用微孔濾膜(0.45 μm)過濾，即為樣品溶液。

1.4 色譜條件

Eclipse XDB-C18色譜柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流動相為甲醇-水(40∶60)，流速1.0 mL · min-1，進樣量20 μL，柱溫25 ℃，檢測波長275 nm。

2 結果與討論

2.1 線性關系

分別量取對照品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，加入50 mL容量瓶中定容，定容后的濃度(μg·mL-1)分別為5.84、17.52、29.20、40.88、58.40，每次進樣20 μL，得到色譜流出曲線。以對乙酰氨基酚濃度(μg · mL-1)為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線，結果見圖1。

圖1 對乙酰氨基酚標準曲線

由圖1可知，對乙酰氨基酚濃度與峰面積在5.84～58.4 μg · mL-1范圍內線性關系良好。其擬合回歸方程為y=20.96x+0.8787，R2=0.9998。

2.2 精密度

取同一種對照品溶液(58.4 μg · mL-1)重復進樣6次，每次20 μL，記錄峰面積，計算其RSD值為1.19%(n=6)，表明該方法精密度良好。

圖2 對乙酰氨基酚對照品(a)與樣品(b)的HPLC圖譜

2.3 重復性

分別取3種批號的樣品溶液按色譜條件重復進樣3 次，記錄峰面積，計算其RSD值分別為0.71%、0.15%、0.38%(n=3)，表明該方法的重復性好。

2.4 穩定性

分別取3種批號的樣品溶液，在0 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h按色譜條件進樣，記錄峰面積，計算其RSD值分別為2.87%、2.08%、1.31%(n=6)，表明樣品在5 h內穩定。

2.5 樣品測定

樣品溶液的HPLC譜圖見圖2。

由圖2可知，對乙酰氨基酚與其它組分分離較好，保留時間約為2.15 min。含量測定結果見表1。

表1 3種樣品中對乙酰氨基酚的含量測定結果

2.6 加標回收率

取已知含量樣品，加入對乙酰氨基酚對照品，進行回收實驗，結果見表2。

表2 對乙酰氨基酚回收率測定結果

由表2可知，平均加標回收率為103.3%，RSD為3.57%。

2.7 討論

嘗試用乙腈-水、甲醇-水(40∶60)、甲醇-水(20∶80)體系為流動相，其中甲醇-水(40∶60)體系保留時間合適、分離度高、峰形對稱，故選定甲醇-水(40∶60)為該方法的流動相。

3 結論

利用高效液相色譜法測定小兒氨酚烷胺顆粒中對乙酰氨基酚含量。對乙酰氨基酚濃度在5.84～58.4 μg · mL-1范圍內與峰面積線性關系良好，回歸方程為y=20.96x+0.8787，R2=0.9998，平均加標回收率為103.3%，RSD=3.57%。該方法快速、簡便、結果可靠，可用于小兒氨酚烷胺顆粒中對乙酰氨基酚含量的測定。

[1] 姜紅，周希英，賈善學.HPLC 法測定小兒速效感冒顆粒中對乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].山東醫藥工業，2002，21(5)：9-10.

[2] 孫桂榮，盧華偉，潘舒平.HPLC測定氨咖麻敏膠囊中各組分的含量[J].中國藥學雜志，2004，39(7)：542-544.

[3] 吳衛濤.高效液相色譜法測定對乙酰氨基酚片的含量[J].中國醫藥導報，2009，6(15)：52-53.

[4] 陳瑩，莫連峰，明娜，等.高效液相色譜法測定復方對乙酰氨基酚片的含量[J].海峽藥學，2007，19(7)：41-42.