不同激素水平對文心蘭原球莖脫分化的影響1）

尤海波

（黑龍江省農科院園藝分院，哈爾濱 150069）

文心蘭屬蘭科文心蘭屬（Oncidium），花形奇特似舞女，又名跳舞蘭、金粉蝶蘭、瘤瓣蘭，屬復莖類洋蘭，附生或地生［1］，原產墨西哥、西印度群島、巴西等地［1－7］。可作為盆花和切花，同蝴蝶蘭及大花蕙蘭一樣，作為主要的栽培品種，市場需求量越來越大［2－5］。文心蘭傳統的繁殖方式為分株繁殖，繁殖系數較低，容易受到病毒感染，造成品質退化，應用植物組織培養技術進行快繁利于保持種苗特性，有效控制病害，因此，探索文心蘭組織培養快速繁殖方式具有重要意義。

細胞分裂素類激素在試管苗增殖中起關鍵作用。本試驗以誘導出的文心蘭原本球莖為外植體，采用3種常用的細胞分裂素考察文心蘭原球莖分化效果，選出適于文心蘭原球莖分化培養基，同時也為進一步研究3種細胞分裂素的作用機理奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黑龍江省農科院科技園區栽培的寬唇文心蘭品種（Oncidium ）誘導的原球莖；6－BA（6－芐基腺嘌呤）、KT（激動素）、Ad（腺嘌呤硫酸鹽）、NAA（α－萘乙酸）等購于中國上海惠興生化試劑公司。

1.2 培養基

以 MS為基本培養基，糖30g／L、瓊脂粉6g／L、pH 5.6，各種激素配比見表1。

1.3 試驗設計

3種細胞分裂素分別采用單因素隨機區組設計。

1.4 接種方法

將文心蘭原球莖置于超凈工作臺上，用手術刀分成大小均勻的小塊，接種于上述不同培養基，每處理10瓶，每瓶5塊原球莖。觀察記錄接種后新芽產生的時間、生長狀況及35d的分化情況。

1.5 培養條件

培養室溫度（25±1）℃、光強2000～1500lx、光照時間12h／d。

表1 各處理培養基中激素的組合及濃度 mg·L－1

2 結果與分析

2.1 不同濃度6－BA對文心蘭原球莖分化試管苗的影響

表2 不同濃度6－BA對文心蘭新芽產生的時間及分化率的影響

不同濃度6－BA對文心蘭原球莖分化的影響情況見表2。由表2可以看出，當NAA濃度一定時，在6－BA低濃度時沒有原球莖（Protocorm Like Body，PLB）形成。6－BA濃度在0.5～3.0mg／L范圍內，隨著濃度的逐漸增加，新芽形成時間逐漸縮短，且試管苗的分化率逐漸提高；當6－BA濃度為2.0mg／L，NAA濃度0.1mg／L時，試管苗的分化率較高，分化系數達7.27，同時在苗與培養基接觸面附近有少量原球莖形成；當6－BA 濃度為2.0mg／L，NAA 濃度0.2mg／L時，試管苗的分化率最高，分化系數達7.27，在苗與培養基接觸面附近沒有原球莖形成；但當6－BA濃度超過3.0mg／L時，分化系數下降，而原球莖形成量卻增加。這說明濃度適中的6－BA對BA對增殖率影響達到了極顯著差異的水平。6－BA濃度在2.0mg／L，NAA濃度在0.2水平下的培養基較適合試管苗的增殖。

2.2 不同濃度KT對文心蘭試管苗增殖的影響

由表3可以看出，KT濃度在0.5～2.0mg／L的處理中沒有新芽產生，而當KT濃度為3.0～4.0mg／L時有叢生芽形成，但形成叢生芽的時間在不同處理之間差異不大，同時，在NAA為0.2mg／L的情況下，KT無論在高濃度或低濃度時均有原球莖產生。由此可見，KT對文心蘭的原球莖有增殖作用，對原球莖分化成苗作用相對較弱。

表3 不同濃度KT對文心蘭原球莖分化的時間及分化率的影響

3 結論

以MS培養基為基本培養基，用2種不同的細胞分裂素6－BA、KT和不同濃度生長素NAA組配對文心蘭原球莖分化影響的研究結果表明，2種激素對文心蘭試管苗的影響差異較大。用一定濃度（2.0mg／L）的6－BA對文心蘭原球莖進行分化不僅增殖率高，而且苗的狀況好，沒有原球莖的增殖，比較適合文心蘭原球莖分化的培養基為 MS＋6－BA 2.0mg／L＋NAA 0.2。

［1］Santana G E，Chaparro K.Clonal Progpgation of Oncidium Through the Culture of Floral buds［J］.Acculture，1997，482：315－320.

［2］Kerbelly G B.1984.Plant regeneration of Oncidium varicosum by means of root tip culture.Plant Cell Reports.3（1）21－29.

［3］陳興貽.文心蘭組織培養［J］.植物生理學通訊，1989（2）：49.

［4］陳菁英，藍賀勝，陳雄鷹.蘭花組織培養與快速繁殖技術［M］.北京：中國農業出版社，2004：107－115.

［5］崔廣榮，劉云兵，何玉華，等.不同細胞分裂素對文心蘭試管苗增殖的影響［J］.特產研究，2005（2）：37－40.

［6］朱根發，王懷宇，陳明莉，等.文心蘭脫毒快速繁殖技術研究［J］.廣東農業科學，1997（4）：27－28.