鴨免疫重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5N1,Re-5+Re-4)后抗體水平分析

陳桂英

(青海省西寧市城中區總寨獸醫站,青海 西寧 810003)

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一種禽類傳染病。根據致病性的不同將禽流感分為高致病性禽流感(HPAI)和低致病性禽流感(IPAI),HPAI被世界動物衛生組織(OIE)列為A類傳染病,我國將其列為一類動物疫病[1]。近幾年來,禽流感在世界各地反復出現,我國養禽業也一直受到禽流感的威脅。疫苗免疫仍是預防禽流感的有效手段之一,有關禽流感疫苗的免疫效果及抗體消長規律國內學者做了一些研究工作[2-5],但作為我國現階段使用的主要疫苗,重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)免疫鴨的抗體動態變化尚未見報道。本試驗分析了禽流感二價苗免疫鴨后抗體消長規律,以期為該疫苗的推廣使用提供科學的試驗依據。

1 材料與方法

1.1 疫苗 重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)3批,批號分別為200807、200808、200809,哈藥集團生物疫苗有限公司生產。

1.2 血凝抑制(HI)試驗用抗原 禽流感病毒H5亞型HI試驗Re-4株和Re-5株抗原由哈爾濱維科生物技術開發公司生產,批號分別為 200702和200801。

1.3 標準陽性血清 哈爾濱維科生物技術開發公司生產。

1.4 試驗動物 購自北京平谷種鴨場的1周齡北京麻鴨。

1.5 分組和接種 將新購進的1周齡北京麻鴨分別隨機分成4組,每組10只。待鴨禽流感母源抗體衰減到4log2以下時,將重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)按推薦劑量免疫接種(0.5 mL/只),每批次1組,頸部皮下注射,首免3周后加強免疫1次。免疫后每隔2周翅靜脈采血(1 m L/只)并分離血清。

1.6 HI抗體效價測定 按照“重組禽流感病毒H5亞型雙價滅活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)制造及檢驗試行規程”中血凝抑制(HI)試驗操作術式進行。

2 結果

疫苗免疫鴨后HI抗體消長情況 不同批次的重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)均能有效地刺激鴨產生HI抗體,而且HI抗體效價的消長規律一致。免疫后第2周HI抗體效價達到2.7 log2～4.0 log2,第 4周達到4.0 log2～5.6 log2,加強免疫(首次免疫后第3周)后,各免疫組鴨HI抗體效價迅速升高,在加強免疫后第3周(首次免疫后第6周)達到最高值9.9 log2～11.0 log2。HI抗體效價在8周以后開始下降。首次免疫后16周抗體水平5.2 log2～5.9 log2之間,首次免疫后20周以后抗體水平均在4log2以下。不同批次的疫苗免疫組各個采樣點的抗體效價t檢驗差異不顯著(P＞0.05)。

圖1 禽流感二價苗免疫鴨后的抗體變化水平

3 分析和討論

鴨首次免疫后第 2周 HI抗體效價達到2.7log2～4.0log2,第4周達到4.0log2～5.6 log2。加強免疫后,免疫組鴨HI抗體效價迅速升高,首次免疫后第6周(加強免疫后3周)達到最高值9.9 log2～11.0log2。HI抗體效價在首次免疫后8周開始下降,20周后抗體水平均降至4log2以下,此時不足以抵御外界病毒侵襲[3]。所以,鴨加強免疫后才能達到較高的抗體水平,而且下次免疫時間不能超過4個月。

同時期內相應免疫組的 HI抗體效價Re-4株均稍高于Re-5株,這可能與疫苗在制備過程中的抗原量配比有關。

本次試驗表明,鴨免疫禽流感疫苗時,要在首免20 d后加強免疫1次,方可抵御禽流感病毒侵襲。許多人認為禽流感病毒不易引起水禽發病,有一些水禽養殖場對禽流感的預防不太重視,只是免疫1次甚至不免疫。劉超男等[6]的研究表明,禽流感病毒不僅對雞具有高致病性,而且對鴨也具有高致病性。因此,水禽養殖場不能忽視對禽流感的防控,加強疫苗免疫注射。本試驗表明,鴨1次免疫禽流感二價苗后,抗體水平難以達到有效保護范圍,只有加強免疫后,抗體能夠保持較高水平,對禽流感具有較強的抵抗力。

由于受國家有關涉及HPAI研究要求的限制,本試驗未進一步做攻毒保護試驗,有關重組禽流感病毒H5亞型雙價滅活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)對鴨HPAI的攻毒保護情況沒有繼續進行。關于這種疫苗對鴨的攻毒保護情況還有待進一步試驗研究。

[1] 世界動物衛生組織.服乳動物、禽、蜜蜂 A和B類病診斷試驗和疫苗標準手冊[M].農業部畜牧獸醫局,譯.北京:中國農業科學技術出版社,2002:197-206.

[2] 靳月生,姚學軍,見滿振,等.蛋雞重組告知并行禽流感H 5N1(Re-1+Re-4)二價滅活疫苗免疫效果的評價[J].中國畜牧獸醫,2008,35(7):92-93.

[3] NY/T769-2004.高致病性禽流感免疫技術規范[S].

[4] 陳坤永,翁良樹,張祥解,等.種鴿免疫禽流感疫苗HI抗體水平消長規律的研究[J].養禽與禽病防治,2004(7):12-13.

[5] 何長生,朱良強,鄭舉,等.對重組禽流感滅活疫苗(H5N1亞型,Re-1)在家禽免疫效果方面的調研[J].中國獸藥雜志,2008,42(7):30-32.

[6] 劉超男,劉明,張云,等.H5N1亞型禽流感病毒的亞致病性研究[J].中國農業科學,2006(2):412-417.