廣西香蕉真菌性葉斑病病原菌種群結(jié)構(gòu)分析

林善海， 黃思良， 覃麗萍， 付 崗，， 岑貞陸， 謝 玲

（1.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院，南寧 530005； 2.南陽師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，南陽 473061；3.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，南寧 530007）

廣西香蕉真菌性葉斑病病原菌種群結(jié)構(gòu)分析

林善海1， 黃思良2＊， 覃麗萍3， 付 崗1，3， 岑貞陸3， 謝 玲3

（1.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院，南寧 530005； 2.南陽師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，南陽 473061；3.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物研究所，南寧 530007）

2009年2－3月對廣西香蕉主產(chǎn)區(qū)真菌性葉斑病病原進(jìn)行抽樣鑒定。結(jié)果顯示，廣西香蕉真菌性葉斑病病原至少有10種，主要病原為Cordana musae，分布廣，檢出率為56.77%～92.19%；Corynespora cassiicola和Deightoniella torulosa為次，兩種病原菌均主要集中在南寧地區(qū)，檢出率分別為32.34%和22.61%；葉斑病類型以單一病原侵染為主，檢出率為78.13%～92.19%；復(fù)合侵染的葉斑病類型以2種病原共同侵染居多。

香蕉葉斑??； 病原菌； 調(diào)查； 復(fù)合侵染

香蕉葉斑病是多種病原真菌引起的一類世界性病害。據(jù)統(tǒng)計(jì)，其病原菌至少有50種［1－4］。香蕉葉斑病常由兩種或多種病原復(fù)合侵染所致，通過癥狀難以準(zhǔn)確判斷病原種類，給香蕉葉斑病的有效防治帶來較大的困難。國內(nèi)已有香蕉葉斑病病原種類和分布的相關(guān)報(bào)道［5－8，11］，但缺乏病原菌種群結(jié)構(gòu)的系統(tǒng)研究。20世紀(jì)80年代，巫錫奎等［6］報(bào)道廣西真菌性香蕉葉斑病的主要病原菌為香蕉暗雙孢（Cordana musae），但調(diào)查區(qū)域僅限于廣西東南部（浦北、玉林、博白和南寧郊區(qū)）。近十幾年，隨著水果產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整和不斷深化，香蕉市場效益逐漸提升，廣西香蕉產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，特別是20世紀(jì)90年代之后，在氣候最適宜栽培香蕉的右江河谷一帶的百色市香蕉產(chǎn)業(yè)得到蓬勃發(fā)展［9］。種植結(jié)構(gòu)、優(yōu)良品種的更替及種苗的頻繁調(diào)運(yùn)勢必造成香蕉葉斑病病原的擴(kuò)散及群體的變化。此外，隨著香蕉連作年限的延長，病原菌的種群結(jié)構(gòu)也可能發(fā)生變化。因此，在廣西開展更大范圍的香蕉葉斑病病原菌的調(diào)查，對指導(dǎo)香蕉病害防治具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 病害標(biāo)本的采集

調(diào)查時(shí)間為2009年2－3月。廣西香蕉主產(chǎn)區(qū)隨機(jī)抽樣地點(diǎn)：南寧市金陵鎮(zhèn)（22°54′N，108°02′E）、古潭鎮(zhèn)（22°58′N，107°46′E）、南圩鎮(zhèn)（23°07′N，107°40′E）和寧武鎮(zhèn)（23°17′N，108°27′E）；百色市祥周鎮(zhèn)（23°35′N，107°03′E）、林逢鎮(zhèn)（23°35′N，107°12′E）和百育鎮(zhèn)（23°40′N，106°59′E）；北海市常樂鎮(zhèn)（21°50′N，109°25′E）和潿洲島鎮(zhèn)（21°02′N，109°06′E）；欽州市武利鎮(zhèn)（22°09′N，109°14′E）；玉林市福綿鎮(zhèn)（22°34′N，110°03′E）。每個(gè)地點(diǎn)隨機(jī)采集樣品100份以上，觀察和記錄典型病害癥狀，將新鮮樣品帶回實(shí)驗(yàn)室。

1.2 病原真菌的鑒定

用干凈紗布去除葉面的灰塵和雜物，解剖刀刮取病健交界處葉肉組織，制成臨時(shí)玻片，在光學(xué)顯微鏡下觀察，記錄每一份樣品的病原種類。病原菌的鑒定參照《真菌鑒定手冊》［10］和《廣東果樹真菌病害志》［11］。對病斑組織上產(chǎn)生真菌較少的樣品噴灑無菌水，保鮮袋分裝，室溫保濕2～3d，再刮取病斑組織上的真菌進(jìn)行顯微觀察。根據(jù)不同類型典型癥狀進(jìn)行病原菌的分離、培養(yǎng)和純化，光學(xué)顯微鏡觀察分離物的形態(tài)特征，對不常見的或難確定的分離菌，通過柯赫氏法則驗(yàn)證其致病性。

1.3 病原真菌組成分析

根據(jù)病原鑒定的結(jié)果，統(tǒng)計(jì)、比較每個(gè)調(diào)查點(diǎn)病原菌的檢出頻率以及所分離的單個(gè)病斑由單一病原侵染或兩種及多種病原復(fù)合侵染的頻率。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原種類及分布

調(diào)查結(jié)果表明，廣西真菌性香蕉葉斑病病原至少有10種，分別為Alternaria musae、Cordana musae、Corynespora cassiicola、Curvularia fallax、C.lunata、Deightoniella torulosa、Exserohilum rostratum、Mycosphaerella fijiensis、Mycosphaerella musicola和Pestalotiopsis menezesiana。南寧檢出10種，百色7種，北海9種，欽州8種，玉林7種（表1）。在多種病原真菌中，以Cordana musae為主，檢出率達(dá)11.83%～94.49%，其所致的灰紋病發(fā)生較嚴(yán)重；Corynespora cassiicola和Deightoniella torulosa為次，兩個(gè)病原菌分布廣泛，但均以南寧市的檢出率較高（分別為32.34%和22.61%）。M.musicola引起的病害局部發(fā)生，在北海市常樂鎮(zhèn)發(fā)生較嚴(yán)重，病原菌檢出率達(dá)86.02%（表1，表2）。P.menezesiana主要危害西貢蕉，在南寧較常見。

表1 廣西香蕉葉斑病病原真菌檢出率1）

2.2 病原菌復(fù)合侵染情況

廣西香蕉主產(chǎn)區(qū)的葉斑病以單一病原獨(dú)立侵染為主，檢出率為78.13%～92.19%；復(fù)合侵染葉斑類型以兩種病原真菌共同侵染居多，最高比率達(dá)21.87%（表3）。

表2 幾種主要香蕉葉斑病菌在廣西不同市的檢出率比較

表3 廣西真菌性香蕉葉斑病復(fù)合侵染狀況

3 小結(jié)與討論

對廣西香蕉主產(chǎn)區(qū)葉斑病病原真菌進(jìn)行了調(diào)查和鑒定。結(jié)果表明，廣西真菌性香蕉葉斑病病原菌至少有10種（表1），其中3種在廣西尚未見報(bào)道，分別為多主棒孢（C.cassiicola）、斐濟(jì)球腔菌（M.fijiensis）和嘴突臍孢（E.rostratum）。

20世紀(jì)80年代，廣西真菌性香蕉葉斑病的主要病原菌為Cordana musae［6］。經(jīng)過多年種植模式、規(guī)模、品種等的調(diào)整后，病原群體勢必發(fā)生變化。本研究結(jié)果表明，Cordana musae在廣西各香蕉產(chǎn)區(qū)分布廣泛，檢出率56.77%～92.19%，是廣西香蕉葉斑病的主要病原真菌（表1）。近十多年來，百色市的香蕉產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，但至今未見有該產(chǎn)區(qū)香蕉葉斑病病原菌調(diào)查的相關(guān)報(bào)道。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，Cordana musae也是百色香蕉產(chǎn)區(qū)的主要病原真菌，與廣西其他種植時(shí)間長的香蕉產(chǎn)區(qū)基本一致?？赡艿脑蚴牵海?）通過種苗調(diào)運(yùn)將病原從其他發(fā)病嚴(yán)重產(chǎn)區(qū)帶入了百色香蕉產(chǎn)區(qū)，百色地區(qū)氣候與廣西其他香蕉產(chǎn)區(qū)差異不大，適合Cordana musae的發(fā)生、發(fā)展；（2）該地區(qū)一直有香蕉種植，但10年前種植規(guī)模較小，病害的發(fā)生情況未曾引起重視，隨著當(dāng)?shù)胤N植規(guī)模的不斷擴(kuò)大并多年連作，病原基數(shù)不斷提高，使得該病也嚴(yán)重發(fā)生。

在世界香蕉主產(chǎn)區(qū)多種葉斑病病原真菌中，以Mycosphaerella屬的3個(gè)種M.fijiensis、M.musicola和M.eumusae為主要病原菌，其中以M.fijiensis對香蕉造成的損失最大［1］。國內(nèi)報(bào)道認(rèn)為Mycosphaerella屬引起的香蕉葉斑病病原菌為M.musicola［5－7，12］。巫錫奎等［6］報(bào)道，在 20世紀(jì)80年代中后期，該菌在廣西局部地區(qū)（欽州）出現(xiàn)。本研究結(jié)果顯示，廣西的Mycosphaerella香蕉葉斑病的主要病原為M.musicola，與前人報(bào)道一致，但在廣西分布廣泛，主要在北海和南寧地區(qū)，以北海市常樂鎮(zhèn)危害較嚴(yán)重，檢出率高達(dá)86.02%（表1，表2）。20世紀(jì)80年代，M.fijiensis傳播到我國臺灣［13］，90年代末，該菌出現(xiàn)在海南，屬次要病原菌［7］。幾年后，該菌引起的葉斑病已上升為海南島的主要香蕉葉斑?。?4－15］。本研究結(jié)果顯示，M.fijiensis已在廣西零星出現(xiàn)。出現(xiàn)的可能原因有：1）香蕉苗和種質(zhì)材料的引種將該病原菌從海南帶入廣西；2）沿海地區(qū)為我國西南窗口，進(jìn)出口貿(mào)易的通道，貿(mào)易頻繁，M.fijiensis隨著包裝材料從相鄰香蕉種植國家進(jìn)入廣西沿海地區(qū)。

雖然香蕉葉斑病存在多種病原真菌，且常發(fā)生復(fù)合侵染，但調(diào)查結(jié)果顯示，廣西的香蕉葉斑病主要是由Cordana musae獨(dú)立侵染引起（表2，表3）。復(fù)合侵染的香蕉葉斑病較少，在復(fù)合侵染中以兩種病原的復(fù)合侵染為主（表3）。Mycosphaerella葉斑病是香蕉的一個(gè)毀滅性病害，尤其是M.fijiensis引起的香蕉葉斑病對香蕉造成的損失最大，因此有必要對該菌在廣西所致的葉斑病進(jìn)行病害流行學(xué)研究，為該病害的科學(xué)防控提供指導(dǎo)。

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Investigations on the fungal populations associated with banana leaf spot diseases in Guangxi

Lin Shanhai1， Huang Siliang2， Qin Liping3， Fu Gang1，3， Cen Zhenlu3， Xie Ling3
（1.College of Agriculture，Guangxi University，Nanning530005，China；2.College of Life Science and Technology，Nanyang Normal University，Nanyang473061，China；3.Microbiological Research Institute，Guangxi Academy of Agricultural Sciences，Nanning530007，China）

Investigations on banana leaf spot fungal pathogens were conducted in major banana production areas in Guangxi between February and March in2009.The results showed that at least 10 fungal pathogens were found in the banana leaf spot samples.Cordana musaewas the most frequently observed fungal pathogen with a detection rate of 56.77%－92.19%in the samples.Corynespora cassiicolaandDeightoniella torulosawere mainly observed in the samples collected from the plantations at Nanning City，with the detection rates of 32.34%and 22.61%，respectively.The banana leaf spots with only a single pathogen were predominant（78.13%－92.19%）compared to those with two or more fungal pathogens.

banana leaf spot disease； pathogen； investigation； complex infection

S 436.67

A

10.3969／j.issn.0529-1542.2011.05.036

2010-11-03

2010-12-14

廣西科學(xué)基金（桂科自0728071）

＊ 通信作者 E-mail：silianghuang＠126.com