潘壽文 方建強
母犬發情和適時配種的技術鑒定
潘壽文 方建強
外陰水腫、增大、流出血性分泌物,陰門周圍及尾毛濕潤、粘結;發情期腫脹明顯,觸摸陰部和陰門時擺向一側,后驅升高,此期后期水腫有所減退;發情結束1周~2周復原,表現為陰門小,有皺褶,具有良好的緊張度。
陰道檢查法對于確定母犬的發情具有一定的說服力。此法一般在站立保定下進行,需要大小適度的犬用開膣器及專用的光源。首先用軟紙將陰門周圍擦干凈,然后用左手的大拇指和食指把陰門口輕輕的翻開,以保證開膣器的前端直接與陰道黏膜接觸。右手持已消毒完好與體溫接近的開膣器,澆上一些生理鹽水以保證潤滑,緩緩地插入陰道。起初開膣器的方向朝上,然后水平向前推,達到一定深度后,在專用光源的幫助下,觀察陰道黏膜顏色及分泌物等。檢查結果與判定:判定母犬發情期的不同時期主要根據陰道黏膜的顏色變化、黏膜的腫脹情況及分泌物的多少。判定標準見表1。

表1 母犬不同發情周期時間內陰道黏膜顏色等的變化情況
陰道上皮的組織學構建受雌激素的影響很大, 間情期陰道黏膜由2層~3層非角質化的扁平上皮覆蓋。在雌激素的影響下細胞層增生且表層細胞角質化,最大程度的細胞增生可以達到20層。角質化的過程發生在發情期。從發情后期開始陰道上皮逐漸退化。陰道細胞學檢查的目的即在此基礎上達到認識發情周期的時間、確定排卵時間及了解卵巢功能狀況等。陰道細胞學檢查可在做陰道檢查的同時用無菌的棉拭子在陰道深處輕輕擦拭一下以采得陰道黏膜上皮(陰道前庭處的陰道黏膜上皮受雌激素的影響不大,故要在陰道深處采樣),然后在載玻片上輕輕的滾一下用帕尼科方法染色。但此法比較復雜,需要較多時間。目前德國漢諾威獸醫大學繁殖醫學院使用的是一種工廠化生產的專用染色劑,染色時非常方便,且效果非常好但其詳細成分不清。陰道黏膜上皮亦可用姬姆薩方法染色。陰道細胞染色的判定標準主要是根據細胞的大小、形狀、細胞核與細胞漿成分的比例及核內物質的存在與否。見表2。
在間情期看到的是基底細胞或副基底細胞為主,這些細胞在發情前期消失,形成中間細胞和淺層細胞。除上皮細胞之外,在發情前期還有大量的紅細胞滲出并能觀察到少量的白細胞。在發情前期向發情期過渡時,淺層細胞增多,且逐漸的角質化。在接近排卵時看到的幾乎都是角質化的表層細胞(80%~90%),這些細胞單個的平位于載玻片上。檢驗證明,大約75%的母犬在最大角質化程度后的第1天發生排卵。最大角質化程度持續1天~6天,平均2.6天。在發情期的后期表層角質層細胞幾天之內逐漸脫落,陰道細胞抹片的角質化細胞相互連接。在這個再生過程中陰道黏膜層也出現了白細胞,在發情后期的2天~4天內陰道抹片上可見到大量的白細胞,同時重新出現深層細胞。在發情后期的早期做陰道細胞抹片間或可見到泡沫細胞(空泡細胞)及發情后期細胞(限制性基底細胞,其細胞漿中含有中性粒細胞)。后一種細胞為發情后期的典型特征。但在陰道炎時也有類似的現象。個別母犬在陰道黏膜的再生過程中常伴有大量的炎性細胞的產生,引起膿性細胞的排出,此點要與子宮疾病區別開來。發情周期中陰道細胞抹片不同細胞的分布情況,見表3。

表2 陰道深層上皮細胞與表層細胞的形態學區別

表3 母犬發情周期過程中陰道細胞抹片不同細胞的分布情況(%)

表4發情周期中血液中孕酮的變化
有資料表明:觀察母犬子宮的血管變化可以確定母犬的排卵時間。
事實上,使用腹腔鏡觀察卵巢上卵泡的發育情況,就可以準確地判定排卵時間,即卵泡的一部分突出于卵巢表面1.5毫米左右,其頂端透明,這預示著母犬即將排卵,此時是配種的最適時間。如果在卵巢上看到的“卵泡”是中間塌陷,顏色為肉紅色,這表明排卵已經發生,當時的“卵泡”已發育成黃體。
到目前為止,確定母犬排卵時間的范圍最可靠的方法是測定孕酮。因為孕酮在發情前期即將結束時開始升高,一般在達到5ng/ml時即可排卵。臨床實踐中通常這樣處理:母犬動情之后(開始進入了發情前期)可每2天進行一次陰道黏膜及陰道細胞學檢查,只要陰道細胞角質化達到了50%,即可采血進行孕酮測定,孕酮量達到4ng/ml~5ng/ml時,即可對母犬配種。發情周期中孕酮濃度的變化,見表4。
將發情母犬的口腔液置于載玻片上自然烘干,在顯微鏡下觀察唾液結晶體的變化,當被檢結果出現典型的羊齒狀或松針狀,主梗粗而硬,分支密而長時,為母犬最佳配種時期;但出現的羊齒或松針狀不典型,主梗有彎曲,分支少而短則為可配期,可能受孕,但產仔不多,可滯1天~2天后再鏡檢;若出現氣泡狀,則不能受孕。
B型超聲診斷技術亦可用于母犬的排卵鑒定,但對B超儀器的質量要求及操作人員的技術要求均很高。在德國,這種方法已經作為一種排卵時間確定的重要輔助手段,但國內尚未見有成功的報道。
(作者單位:公安部南京警犬研究所,210012)
(編輯:李 冰)