熒光光譜法研究橙皮素與牛血清白蛋白的相互作用*

尚永輝

（咸陽師范學院 化學與化工學院，陜西 咸陽712000）

科研與開發

熒光光譜法研究橙皮素與牛血清白蛋白的相互作用*

尚永輝

（咸陽師范學院 化學與化工學院，陜西 咸陽712000）

采用熒光光譜技術研究了橙皮素與牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。研究發現橙皮素對BSA的熒光猝滅屬于靜態猝滅過程，由熱力學參數焓變△r H m=-60.543 kJ·mol-1，熵變△r S m=-114.121J·mol-1均小于零,判斷橙皮素與BSA之間主要靠氫鍵和范德華力相結合,生成自由能變(△r G m)為負值,表明橙皮素與BSA的作用過程是一個自發過程;并應用同步熒光光譜考察了橙皮素對BSA構象的影響。

橙皮素；牛血清白蛋白；熒光光譜

Abstract:The interaction behavior between Hesperetin and Bovine Serum Albumin(BSA)was studied by fluorescence spectroscopy.The quenching constants were obtained at 292K,299 K,311K and 315t K,the results indicated that the fluorescence quenching mechanism for BSA through Hesperetin binding is likely a static quenching process.The thermodynamic parameters,enthalpy change (△r H m)and entropy change(△r S m),were calculated to be-60.543 kJ·mol-1＜0,and-114.121J·mol-1＜0,respectively,which indicated that the interaction of Hesperetin with BSA was driven mainly by hydrogen bond and Van der Walls force.The process of binding was a spontaneous process in which Gibbs free energy change(△r G m)was negative.The effect of Hesperetin on the conformation of BSA was analyzed using synchronous fluorescence spectroscopy.

Key words:Hesperetin;Bovine Serum Albumin（BSA）;fluorescence spectroscopy

藥物進入人體首先與血清白蛋白結合，通過血漿的存儲和運輸到達受體部位產生藥理作用[1]。因此，從不同角度研究蛋白與藥物分子間的相互作用已成為目前藥物研究的熱點問題之一。熒光光譜法是目前研究蛋白質與各種小分子以及離子相互作用的重要手段之一，通過研究，可獲得蛋白質分子中熒光生色基團結構和所處微環境及其分布情況等信息，同時還可得到外源物質與生物大分子相互作用的有關數據。

橙皮素（Hesperetin）屬于雙氫黃酮類化合物，能有效抑制脂肪分解，促進DNA生物的合成，具有健胃、祛痰、鎮咳、利尿以及抗氧化、抗腫瘤等多種功效。實驗在pH值為7.40的Tris-HCl介質中運用熒光光譜技術研究了橙皮素與BSA的相互作用，并對其作用機理進行了初步分析。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

牛血清白蛋白（Amresco.0930，分子量:65000）；橙皮素（中國藥品生物制品檢定所）；……