民族藥物河谷地不容的生物堿成分研究

左愛學,李 莉,饒高雄

(云南中醫學院云南省高校民族藥現代研究重點實驗室,云南昆明 650500)

民族藥物河谷地不容的生物堿成分研究

左愛學,李 莉,饒高雄

(云南中醫學院云南省高校民族藥現代研究重點實驗室,云南昆明 650500)

研究了民族藥河谷地不容 (Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.)的生物堿成分,用色譜法從其塊根提取物中分離得到 7個生物堿,經波譜分析鑒定為千金藤堿 (Stephanine,1)、克班寧(Crebanine,2)、異可利定 (Isocorydine,3)、千金藤寧堿 (Stepharanine,4)、藥根堿 (Jatrorrhizine,5)、巴馬汀 (Palmatine,6)和四氫巴馬汀 (Tetrahydropa lmatine,7).其中化合物 1～3是首次從河谷地不容中分離得到.研究結果表明,河谷地不容生物堿的結構類型和地不容正品 (Stephania epigaeaH.S.Lo)類似,但具體成分有明顯區別,為保證藥品安全,河谷地不容不宜作為藥材地不容混用、代用.

河谷地不容;化學成分;生物堿

地不容是云南各地中草藥以及各少數民族醫藥中廣泛使用的一類天然藥物,中草藥習稱地不容、山烏龜、一文錢[1].彝族醫藥稱為必伍告 (Bi-Wu-Gao)[2],傣醫藥稱為波波罕 (Bo-Bo-Han)[3].《云南省中藥材標準》(2005年版)收載其正品來源為防己科千金藤屬植物地不容 (Stephania epigaeaH.S.Lo)的干燥塊根[4].但在實際應用中,由于物種和資源的地理分布、民族區域分布的不同,有多種同屬近緣植物也在各地被當作地不容使用.如何評價這些代用、混用的地不容類似品種,除了植物親緣關系的聯系以外,從其所含化學物質基礎的比較,以及相關藥理活性的驗證等多個方面來尋求科學依據,均是具有重要意義的工作,為此,我們比較系統地對云南各地各民族應用的地不容類藥材進行了化學成分的研究與比較.

河谷地不容主產于云南省紅河州和文山州,當地草醫和彝醫、苗醫等均當作地不容藥用.有關河谷地不容的化學成分和生物活性,陳嬿等[5]從采自云南省紅河州個舊市的藥材樣品中分離鑒定了 10個生物堿成分,馬養民等[6-11]總結千金藤屬植物化學成分的主要特征是富含原小檗堿型和阿撲啡型生物堿,多具有抗心律失常、降血壓、細胞毒活性等作用,以四氫巴馬亭為原料開發的顱痛定等已應用于臨床.為了進一步闡明河谷地不容的化學物質基礎,我們對產于云南省文山州西疇縣的河谷地不容的生物堿成分進行了研究.

1 實驗部分

1.1 儀器與材料

熔點用 YANACO顯微熔點儀測定 (溫度未校正);MS用 Finnigan MAT-95質譜儀測定;NMR用BrukerAM-400核磁共振儀測定,T MS內標.柱色譜硅膠及薄層色譜硅膠板均為青島海洋化工廠生產,柱色譜氧化鋁為上海陸都化學試劑廠生產,葡聚糖凝膠 LH-20為 Phar macia公司生產;乙醇、丙酮、環己烷等試劑均用普通工業級溶劑或化學純溶劑;薄層色譜顯色劑用改良碘化鉍鉀試液或 10%硫酸-乙醇溶液.

河谷地不容藥材 (塊根)采于云南省文山州西疇縣,植物標本經云南中醫學院藥用植物教研室錢子剛教授鑒定為防己科千金藤屬植物河谷地不容Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.,標本保存于云南中醫學院標本館(DBR-00137-M).

1.2 提取與分離

新鮮的河谷地不容塊根 9 kg,刮去粗皮,切成碎塊,用攪拌機磨成糊狀,再以 2%的稀硫酸于室溫下浸泡提取 2次,每次 3 d,不時攪拌以促進溶出.合并2次酸水提取液,用 20%氫氧化鈉調節至 pH=9,依次用氯仿、正丁醇萃取,得到脂溶性生物堿部分 (Fr-A,18 g)和水溶性生物堿部分 (Fr-B,78 g).

Fr-A部分用氧化鋁柱色譜分離,以環己烷 -丙酮 -三乙胺系統梯度洗脫 (80∶20∶1～60∶40∶1)分為 4個流份段,再分別以硅膠柱色譜反復分離,用氯仿 -丙酮 -三乙氨 (100∶5∶0.5～100∶25∶1)梯度洗脫,以及葡聚糖凝膠 LH-20柱色譜 (丙酮洗脫)反復純化得到化合物 1(1 140 mg)、2(960 mg)、3(17 mg)、7(37mg).

Fr-B部分用氧化鋁柱色譜分離,以氯仿 -甲醇 -三乙胺系統梯度洗脫 (100∶10∶1～100∶100∶1)分為 3個流份段,再分別以葡聚糖凝膠 LH-20柱色譜 (甲醇洗脫)反復純化得到化合物 4(12mg)、5(71mg)、6(231mg).

2 結構鑒定

化合物 1:淺黃色片晶 (丙酮),m.p.154～155℃,MS m/z 309(M+,C19H19NO3),1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:2.55(3H,s,N-CH3),3.90(3H,s,8-OCH3),2.21(1H,td,J=14.5、3.1 Hz,5-Ha),3.05(3H,m,5-Hb和7-H2),2.52(2H,m,4-H2),3.69(1H,dd,J=14.9、4.6 Hz,6a-H),5.90、6.01(各 1H,d,J=1.4 Hz,-OCH2O-),6.55(1H,s,3-H),6.82(1H,br.d,J=8.0 Hz,9-H),7.30(1H,br.t,J=8.0 Hz,10-H),7.78(1H,br.d,J=8.0 Hz,11-H);上述1H NMR數據與文獻報道基本一致[12],故鑒定為千金藤堿 (Stephanine).

化合物 2:淺黃色柱晶 (甲醇),m.p.109～110℃.MSm/z339(M+,C20H21O4N).其1HNMR和13CNMR數據與文獻報道一致[13],故鑒定為克班寧(Crebanine).

化合物 3:無色柱晶 (甲醇),m.p.181～183℃.MSm/z341(M+,C20H23O4N).其1H NMR和13C NMR數據與文獻報道一致[14],故鑒定為異可利定 (Isocorydine).

化合物 4:紅色針晶 (甲醇),m.p.＞200℃.MS m/z324(M+,C18H15NO4).1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:3.96(3H,s,3-OCH3),4.07(3H,s,9-OCH3),7.50(1H,s,1-H),6.90(1H,s,4-H),3.31(2H,m,5-H2),4.86(2H,m,6-H2),9.40(1H,s,8-H),7.66(1H,d,J=9.0Hz,11-H),7.74(1H,d,J=9.0 Hz,12-H),8.41(1H,s,13-H).上述波譜數據與文獻報道基本一致[12,15],故鑒定為千金藤寧堿 (Stepharanine).

化合物 5:橘紅色針晶 (甲醇),m.p.202～205℃.MS m/z 338(M+,C19H17NO4).其1H NMR和13CNMR數據與文獻報道一致[16],故鑒定為藥根堿(Jatrorrhizine).

化合物 6:黃色針晶 (甲醇),m.p.205～207℃.MSm/z 352(M+,C20H19NO4).其1H NMR和13C NMR數據與文獻報道一致[17],故鑒定為巴馬汀 (Palmatine).

化合物 7:無色片晶 (甲醇),m.p.140～142℃.MSm/z 355(M+,C21H25NO4).其1H NMR和13C NMR與文獻報道一致[15,18],故鑒定為四氫巴馬汀 (Tetrahydropalmatine).

4 結果與討論

從河谷地不容中分離得到 7個生物堿成分,分別鑒定為千金藤堿 (1)、克班寧 (2)、異可利定 (3),千金藤寧堿 (4)、藥根堿 (5)、巴馬汀 (6)和四氫巴馬汀 (7).其中,化合物 1～3為首次從該種植物中分離得到.研究結果豐富了對民族藥物河谷地不容化學成分的認識,也為從內在物質基礎的角度評價其藥用價值提供了一些分析比較的線索和依據.

河谷地不容的生物堿成分主要屬阿樸菲型 (化合物 1～3)、小檗堿型 (化合物 4～7),且阿樸菲型生物堿含量較高.從生物堿的結構類型看,河谷地不容和《云南省中藥材標準》收載的地不容正品(Stephania epigaeaH.S.Lo)有相似性[6-8],但所含的具體化合物,尤其是高含量生物堿成分有明顯區別,因此,從內在物質基礎的比較來分析,河谷地不容當作地不容藥材使用是否可行,還有待進一步的深入研究和探索.在目前的臨床使用中,為保證藥品安全,河谷地不容 (Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.)應視為藥材地不容偽品,不得混用代用.

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[2]楊本雷.中國彝族藥學 [M].昆明:云南民族出版社,2004:103-105.

[3]林艷芳.中國傣族醫藥彩色圖譜 [M].昆明:云南民族出版社,2003.494.

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[7]王憲楷,趙同芳.千金藤屬植物中的生物堿[J].華西藥學雜志,1990,5(1):39-43.

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(責任編輯王 琳)

Studies on the Alkaloids from the Ethno-Remedy Plants Stephania Intermedia H.S.Losp.Nov.

ZUO Ai-xue,LILi,RAO Gao-xiong
(KeyLaboratory of Ethnic-Pha rmacy of Yunnan Higher School,Yunnan University of Traditional ChineseMedicine,Kunming 650500,China)

This research is an analysis of the chemical constituents ofStephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.,an ethno-medicine,in which seven alkaloids were isolated and characterized as(1)Stephanine,(2)Crebanine,(3)isocorydine,(4)Stepharanine,(5)Jatrorrhizine,(6)Palmatine and(7)Tetrahydro-pa lmatine.Among them,compounds 1—3 were isolated from this plant for the first t ime.The results showed that the structures of alkaloids inS.inter m ediaandS.epigaeawere similar,but the major componentswere quite different.Thus,it is no good to replaceS.epigaeawithS.inter m ediafor the sake of safety.

Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.;chemical constituents;alkaloids

Q 946.88

A

1672-8513(2011)01-0017-03

10.3969/j.issn.1672-8513.2011.01.004

2010-10-26.

左愛學 (1978-),男,博士.主要研究方向:中草藥、民族藥的化學成分及質量標準.

饒高雄 (1965-),男,教授.主要研究方向:天然藥物化學.