恒溫搖擺式水浴箱制備冷沉淀的優勢

孫森，譚幫財，杜濱

青島市中心血站 業務科；山東 青島266071

恒溫搖擺式水浴箱制備冷沉淀的優勢

孫森，譚幫財，杜濱

青島市中心血站 業務科；山東 青島266071

目的研究恒溫搖擺式水浴箱制備冷沉淀的優勢及影響因素。方法隨機取24袋新鮮冰凍血漿（200±20）mL，隨機分為第1組和第2組，每組12袋，分別用恒溫搖擺式回收率。結果第1組冷沉淀FⅧ的回收率為（47.63±4.06）%，第2組冷沉淀FⅧ的回收率為（64.17±5.96）%，前者平均用時2.5h，而后者平均用時僅為1.0h。結論使用恒溫搖擺式水浴箱 （CT-4T.6C型）制備冷沉淀其優勢在于能夠有效控制虹吸法制備冷沉淀的關鍵控制點，即精確控制水浴溫度和融化速度。

水浴箱；冷沉淀；恒溫搖擺式；凝血因子；回收率

隨著現代輸血醫學的不斷發展，冷沉淀制劑（內含凝血因子FⅧ、纖維蛋白原Fbg等）的臨床應用越來越廣泛，該制劑對兒童及成人甲型血友病、血管性血友病、纖維蛋白原缺乏癥及產婦大出血等均有明顯療效[1]。但不同的制備工藝所制備的冷沉淀，其質量存在較大差異。虹吸法制備冷沉淀會使FⅧ、Fbg的回收率明顯提高，而專業的融化設備和制備技術是保證冷沉淀質量的重要因素。因此，筆者分別采用普通水浴箱（KJX-Ⅲ型）和恒溫搖擺式水浴箱（CT-4T.6C型）制備冷沉淀并進行質量比較，分析虹吸法制備冷沉淀的關鍵點與人為因素。現報告如下。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

大容量離心機（CR-7型），日本日立公司生產；速凍冰箱（MODF-U460B型），美國Themofoma公司生產；冷凍冰箱（BP-375型），中國Haier公司生產；普通水浴箱（KJX-Ⅲ型），蘇州醫用儀器廠生產；低溫水浴箱（CT-4T.6C型自動搖擺式），美國Cytotherm公司生產；四通道凝血因子分析儀（CA-50），日本SYSMEX公司生產；熱合機（SE-50），國產。

1.2 冷沉淀原料漿制備

選用蘇州萊士公司生產的密閉三聯袋，在采集400mL全血后6～8h內離心分離制得血漿24袋（200±20mL），混勻后每袋留取2mL樣本備用。后血漿迅速置于-80°C速凍冰箱內速凍，凍結后置于-30°C冰箱保存備用。

1.3 制備冷沉淀

取24袋備用血漿在室溫中放置5min，待塑料管道變軟后，隨機分為第1組和第2組，每組12袋。

步驟一：將第1組放入設定溫度為4°C的普通水浴箱中。血漿逐漸融化虹吸到空衛星袋中，剩余白色絮狀物附著于冰塊上約（25±5）mL，即冷沉淀。

步驟二：將第2組固定于恒溫搖擺式水浴箱的血袋夾中，并垂直浸沒于恒溫（6°C）的循環水浴中。水浴箱自動搖擺，血漿融化，上清液虹吸流入空袋，底部剩余白色絮狀物，制得冷沉淀（25±5）mL。

1.4 取樣檢測

將冷沉淀及FFP樣本置入37°C水浴中，冷沉淀融化后取2mL樣本與FFP樣本一起檢測Ⅷ活性，并計算其回收率。Ⅷ回收率（%）=冷沉淀FVIII獲得量（IU）/原料血漿FⅧ總量（IU）×100%[2-4]。

1.5 統計學處理

采用t檢驗，兩組制備冷沉淀所得FⅧ回收率比較如表 1。

表1 兩組制備冷沉淀所得FVIII回收率比較 （n=12，x±s）

2 結 果

從表1中可以看出，兩組設備制備的冷沉淀，其FⅧ含量均符合國家衛生部制訂的《血站基本標準》的質量要求。但恒溫搖擺式（CT-4T.6C型）制備冷沉淀所需時間短，僅為1h，并且該設備所制備的FⅧ回收率明顯高于普通水浴箱制備的冷沉淀（t=27.232，P<0.01）。

3 討 論

冷沉淀主要富含有FⅧ、Fbg、XIII等活性物質，是FFP在2～6°C緩慢解凍后，產生的一種附著于冰塊的白色絮狀物。FⅧ是一種性質不穩定的凝血因子，在2～6°C的水浴中制備回收率較高，在8°C以上產生自融，所以制備冷沉淀對融化溫度、融化時間及操作方法有較高的要求[5]。

美國Cytotherm公司生產的CT-4T.6C型恒溫水浴融化箱，具有微電腦系統，可精確控制水浴溫度保持在設定溫度；擁有血袋固定裝置，保證血袋垂直浸沒于水浴中，保證受溫均勻、完全；自動水浴箱搖擺及循環水，保證血袋間溫度均勻，融化速度均一、快速，所制備的冷沉淀質量均一，回收率較高。該設備制備的冷沉淀之所以質量高，品質好，是因為其把握住制備過程中的關鍵控制點。溫度控制點，精確的水浴溫度控制，可以保證良好的融化環境，特別是初始水溫恒定在6°C時，冷沉淀中凝血因子FⅧ回收率最高[2-4]，并能保證凝血因子不會產生復溶；速度控制點，新鮮血漿在-30°C以下儲存才能保證FⅧ的活性，在制備冷沉淀時，加快融化速度能夠確保更高的凝血因子回收率，所以較高的水浴溫度（6°C），充分的循環水，以及搖擺運動，能夠加速血漿的融化。據國內報道，在1h內融化完成所制備的冷沉淀質量最好[6]。

此外，圍繞溫度和速度控制點，操作過程中人為因素亦不可忽視，如制備原料血漿時，排空血袋中的空氣，可以保證虹吸作用充分，提高融化速度；固定于浸沒水浴中，不僅可以確保血袋受溫均勻，也可以防止血袋與空氣接觸并產生部分凝血因子復溶；另外，垂直放置，有利于白色絮狀物沉淀于血袋底部的冰塊上，防止被虹吸到衛星袋中。

[1]江朝富,崔徐江,汪傳喜.現代成分輸血與臨床[M].天津:天津科學技術出版社,2003:241-242.

[2]張國清,楊玉發.兩種融化方法制備冷沉淀比較[J].廣州醫藥,2006,37(3):58-59.

[3]杜曉明,金振良,陳冬芬.冷沉淀中纖維結合蛋白的檢測方法比較[J].中國輸血雜志,2004,(3):36.

[4]李錫蘭,禹曉彬.制備冷沉淀的兩種方法比較[J].實用預防醫學,2010,(3):174-175.

[5]高峰.臨床輸血與檢驗[M].北京:人民衛生出版社,2003:139-140.

[6]楊紹明.冷沉淀制備的關鍵控制點[J].贛南醫學院學報,2005,26.

[7]朱雅軒,陳敏.醫用恒溫水浴鍋的數控化革新[J].醫療衛生裝備,2006,(10):100.

[8]李雪梅,鮑自謙,伍秀英,等.不同方法制備冷沉淀的質量評估[J].現代檢驗醫學雜志,2006,(2):22-23.

Advantages of Producing Cold Precipitation from Thermostatic Rock Water Bath Box

SUN Sen,TAN Bang-cai, DU Bin
Service Department, Qingdao Blood Center, Qingdao Shandong 266071, China

R554, TH788+.4

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2011.01.040

1674-1633(2011)01-0107-02

2010-07-30

作者郵箱：sunsen1999@163.com

Abstract:ObjectiveTo study the advantages and impact factors of producing cold precipitation from thermostatic rock water bath box.MethodsObtained 24 bags of fresh frozen plasma (200mL±10%)and divided them into two groups of 12 bags.Produced cold precipitation by thermostatic rock water bath box and common water bath box.Measured the coagulation factor FⅧ and rate of recovery.ResultsThe rate of recovery of group 1 was （47.63±4.06）%, and the finish time was 2.5h, while the rate of recovery of group 2 was （64.17±5.96）%, and the finish time was 1h.ConclusionThe thermostatic rock water bath box has advantages of effectively controlling the temperature of water bath and the thawing speed.

Key words:water bath box; cold precipitation; thermostatic rock; coagulation factor; rate of recovery