白藜蘆醇苷的穩定性研究

葉秋雄，黃 葦

(華南農業大學食品學院，廣東廣州510642)

白藜蘆醇苷的穩定性研究

葉秋雄，黃 葦*

(華南農業大學食品學院，廣東廣州510642)

通過紫外分光光度法，研究了溫度、光照、pH、氧化劑對白藜蘆醇苷穩定性的影響。結果表明:白藜蘆醇苷對熱、紫外光，尤其是直射太陽光的穩定性較差;而對pH表現較為穩定;白藜蘆醇苷穩定性受氧化劑影響較大，白藜蘆醇苷在常溫、弱酸性或中性、避光條件下提取分離及儲存較適宜。

白藜蘆醇苷，穩定性，測定

白藜蘆醇苷在植物中分布廣，含量較高，目前至少已經在70余種植物中發現了白藜蘆醇苷，是虎杖的主要功效成分。研究表明，它對心肌細胞、血管平滑肌細胞、改善微循環等有顯著作用。此外白藜蘆醇苷能減輕多種因素造成的組織器官損傷，具有保護肝臟，抑制血小板聚集、鎮咳平喘、抗菌、抗病毒、降血脂及抗脂質過氧化等作用［1－7］。白藜蘆醇苷是存在于天然植物中的功效成分，并且有多種藥理作用，由于制備原料成本低廉，資源豐富，因此是生產保健食品的理想原料。目前世界上有十余個國家和地區在開發白藜蘆醇苷原料及制劑，據有關資料統計表明，全球白藜蘆醇苷市場年需求量為100余噸，未來幾年，需求量還有繼續增加的趨勢，而目前白藜蘆醇苷的年生產能力約50～60t，由此可見，需求缺口較大，市場前景極為廣闊［8］。但是我國目前對白藜蘆醇苷的研究主要集中在藥理研究方面，缺乏對白藜蘆醇苷穩定性等方面的理論與技術研究，容易在提取、純化過程中造成不必要的損失，無法對白藜蘆醇苷進行有效的保藏。因此選擇白藜蘆醇苷對照品作為研究對象，在不同條件下對其穩定性進行研究，為白藜蘆醇苷的提取、純化、開發利用等方面打下理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

白藜蘆醇苷對照品 中國藥品生物制品檢定所;甲醇、雙氧水、HCl、NaOH等 均為分析純。

TU－1800紫外可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司;電子天平 梅特勒－托利多儀器(上海)有限公司;pHB－5便攜式pH計 上海偉業儀器廠;電熱恒溫水浴鍋 北京市長風儀器儀表公司;新亞特紫外線殺菌燈(ZWS20) 新亞特光源廠。

1.2 實驗方法

1.2.1 白藜蘆醇苷對照品溶液的制備 精密稱取白藜蘆醇苷對照品5.0mg，用甲醇溶解于50mL容量瓶中，稀釋到刻度、搖勻，吸取此液1mL于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋到刻度、搖勻，所得濃度為10μg/mL的對照品溶液，待測。

1.2.2 白藜蘆醇苷的光譜特征 取10μg/mL的白藜蘆醇苷對照品溶液，以甲醇為參比，在200～700nm光譜范圍內對白藜蘆醇苷的甲醇溶液進行紫外掃描分析，根據紫外掃描圖譜可知，白藜蘆醇苷對照品最大吸收峰是在波長306nm處。

1.2.3 白藜蘆醇苷穩定性的研究 根據紫外掃描圖譜得到白藜蘆醇苷的最大吸收峰，在此波長下測定白藜蘆醇苷在各種環境條件下的吸光度，并在不同環境下對白藜蘆醇苷甲醇溶液進行全波長的掃描。重復二次實驗，取平均值。

1.2.3.1 溫度對白藜蘆醇苷穩定性的影響 取含量為10μg/mL白藜蘆醇苷對照品甲醇溶液25mL，分別在室溫、50、60、70、80℃ 恒溫水浴保溫0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0h，取出后補充甲醇溶液至25mL，利用紫外可見分光光度計測定306nm處吸光值的大小及200～700nm范圍內全波長掃描。

表1 溫度對白藜蘆醇苷穩定性的影響

表2 光照對白藜蘆醇苷穩定性的影響

1.2.3.2 光對白藜蘆醇苷穩定性的影響 取含量為10μg/mL白藜蘆醇苷對照品甲醇溶液25mL，在太陽光直射下分別放置0.0、0.5、1.0、5.0、30.0、60.0、120.0、240.0min，在日光燈和波長為253.7nm，輻照強度≥60μW/cm2的紫外燈(功率20W，照射距離為15cm)下分 別 照射 0.0、0.5、1.0、5.0、30.0、60.0、120.0、240.0min，利用紫外可見分光光度計測定306nm處吸光值的大小及200～700nm范圍內全波長掃描。

1.2.3.3 pH對白藜蘆醇苷穩定性的影響 用精密pH計檢測，通過NaOH和HCl調節甲醇溶液的pH，分別配制出pH約為2、4、6、8、10、12的溶液。移取1mL白藜蘆醇苷母液(100μg/mL)于10mL容量瓶中，分別用不同pH的甲醇溶液定容、振搖。利用紫外可見分光光度計測定306nm處吸光值的大小及200～700nm范圍內全波長掃描。

1.2.3.4 H2O2對白藜蘆醇苷穩定性的影響 取含量為10μg/mL白藜蘆醇苷對照品甲醇溶液25mL，分別加入不同濃度的 H2O2溶液 0.17mL，得 0.01%、0.05%、0.10%、0.20%H2O2的甲醇溶液，分別放置0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0h，利用紫外可見分光光度計測定306nm處吸光值的大小及200～700nm范圍內全波長掃描。

2 結果與分析

2.1 白藜蘆醇苷的光譜特征

取10μg/mL的白藜蘆醇苷對照品溶液，以甲醇為參比，在200～700nm光譜范圍內對白藜蘆醇苷的甲醇溶液進行紫外掃描分析，測得其吸收光譜如圖1所示。

由圖1可以看出，白藜蘆醇苷對照品溶液在紫外可見光區的最大吸收峰是306nm處，因此選擇306nm作為白藜蘆醇苷的測定波長。

2.2 白藜蘆醇苷穩定性的研究

圖1 白藜蘆醇苷的紫外掃描圖譜

白藜蘆醇苷在提取、純化過程中容易造成不必要的損失，為此選擇白藜蘆醇苷對照品作為研究對象，在不同條件下對其穩定性進行了系統的研究。

2.2.1 溫度對白藜蘆醇苷穩定性的影響 由表1可見，隨時間延長，白藜蘆醇苷甲醇溶液的吸光度均表現出下降趨勢，尤其是隨著溫度升高，白藜蘆醇苷穩定性隨時間延長而下降的趨勢更為顯著。表明保存溫度越高，白藜蘆醇苷越不穩定，同時發現溫度較高情況下，一定時間保存后，最大吸收波長也會略微下降。

2.2.2 光對白藜蘆醇苷穩定性的影響 由表2可知，在不同光源下，白藜蘆醇苷表現出不同的穩定性。在室內自然光和日光燈條件下，白藜蘆醇苷含量變化較小;在紫外燈和太陽光直射下，白藜蘆醇苷容易造成損失，且最大吸收波長也發生變化。尤其太陽光直射對白藜蘆醇苷影響最大，從表2可知，僅照射0.5min，吸光度值就由0.885下降到0.633，1min后，最大吸收波長由306nm紫移到300nm，隨著時間的延長吸光度值緩慢下降。2.2.3 pH對白藜蘆醇苷穩定性的影響 由表3可知，在弱酸性和中性條件下，白藜蘆醇苷比較穩定，含量損失較少;在pH小于2或pH大于10的條件下，白藜蘆醇苷含量損失較多，且最大吸收波長也發生變化。

2.2.4 H2O2對白藜蘆醇苷穩定性的影響 由表4可知，在不加H2O2或H2O2濃度為0.01%條件下，白藜蘆醇苷比較穩定，24.0h范圍內含量損失較少;隨著H2O2濃度的增大，吸光度逐漸增大，最大吸收波長發生了變化。但吸光值增大到一定程度之后，隨時間的變化而趨于穩定。

表3 pH對白藜蘆醇苷穩定性的影響

3 結論

3.1 白藜蘆醇苷在常溫條件下穩定性良好，在室溫、50、60℃下水浴保溫一定的時間，白藜蘆醇苷的含量變化不大;但70℃以上，在8h內對白藜蘆醇苷影響較小，隨著時間的增加，會對白藜蘆醇苷產生破壞。因此，在提取分離時應注意溫度等因素的控制，避免長時間高溫處理，盡量在低溫下保存。

3.2 在不同光源下，白藜蘆醇苷穩定性有顯著的差異。室內自然光和日光燈對白藜蘆醇苷含量影響小;紫外燈和太陽光直射極易導致白藜蘆醇苷的破壞損失。因此，在虎杖提取、純化操作過程中應盡量避免強光，尤其是太陽光直射。原料的干燥，以陰干的方式，更有利于白藜蘆醇苷的保存。

3.3 在弱酸性和中性條件下，白藜蘆醇苷比較穩定，含量損失較少;在pH小于2或pH大于10的條件下，白藜蘆醇苷含量損失較多，而且最大吸收波長也發生變化。因此，在提取分離時應在弱酸性或是中性環境下進行，可以減少白藜蘆醇苷的損失。

3.4 在H2O2濃度較小條件下，白藜蘆醇苷比較穩定，含量損失較少;隨著H2O2濃度的增大，吸光度逐漸增大，最大吸收波長發生了變化。其原因可能是白藜蘆醇苷遭到破壞，使吸光度增大。因此，在提取分離時應避免接觸氧化劑，否則會造成白藜蘆醇苷氧化分解。

［1］張海防，竇國貴，劉曉華，等.虎杖提取物抗炎作用的實驗研究［J］.藥學進展，2003，27(4):230－233.

［2］黃永洪，史若飛.虎杖的活性成分及其在心血管方面的研究進展［J］.牡丹江醫學院學報，2006，27(1):58－60.

［3］高守紅，楊少麟，范國榮.虎杖苷的研究進展［J］.藥學實踐雜志，2005，23(3):145－147.

［4］劉瑞源，謝揚.虎杖中提取蒽醌苷的研究［J］.時珍國醫國藥，2003，14(8):463－464.

［5］韓繼業，寧登科.虎杖藥理作用研究進展［J］.中國藥業，2001，10(8):55－56.

［6］盧成瑛，黃早成，李翔，等.湘西虎杖抑菌成分提取及其抑菌活性研究初報［J］.中國林副特產，2005，4(2):l－3.

［7］周建軍.虎杖中二苯乙烯類化合物藥理作用研究的進展［J］.西北藥學，2000，15(2):86－88.

［8］孫娟.虎杖中白藜蘆醇苷和揮發油的分離分析研究［D］.湖南:中南大學，2007.

Study on the stability of piceid

YE Qiu－xiong，HUANG Wei*
(College of Food Science，South China Agricultural University，Guangzhou 510642，China)

According to spectrophotometry，the influences of temperature，illumination，acidity and alkalinity，oxidant were studied.The results showed that:piceid had poor stability to heat，ultraviolet light，especially direct sunlight.Oxidant had a great effect on piceid stability，piceid was more stable in a wide range of pH.Piceid extraction and isolation were more appropriate of storage at room temperature，the weak acidic or neutral and dark.

piceid;stability;determination

TS201.1

A

1002－0306(2011)04－0155－03

2010－01－15 *通訊聯系人

葉秋雄(1983－)，男，碩士研究生，研究方向:食品加工、保藏與包裝。