矮生福祿考組織培養快速繁殖的研究

劉 陽，高 洋，蘇明月，寧淑香，姜長陽

（遼寧師范大學 生命科學學院，遼寧 大連116029）

1 引言

福祿考（Phlox drummondii）又稱草夾竹桃、洋梅花、桔梗石竹等，屬于花荵科福祿考屬一年生草本花卉，因其花色多樣，姿態優雅，既可作為花壇、花叢和庭院栽培，又可上盆作為擺花，使其具有極佳的觀賞美化效果，因此受到人們的歡迎，并多有栽培。在長期的栽培中，福祿考形成了很多變種。大連地區近年來把矮生福祿考（Phlox drummondii var nana）栽培到花壇上，除了具有福祿考的所有觀賞特點外，又因具有植株矮小特點而倍受人們的青睞。為此，有關園林綠化部門都要進行栽培。但由于福祿考本身存在發芽率低［1］的特點，而矮生福祿考這種特點更加突出，使其難以獲得用于栽培所需的大量種苗，極大地限制了矮生福祿考的觀賞栽培。為解決矮生福祿考觀賞栽培所需種苗的問題，筆者對其進行了組織培養及快速繁殖的研究。雖然目前多有觀賞植物組織培養及快速繁殖研究的報告［2～5］，但迄今未見福祿考組織培養及快速繁殖研究的報道。

2 材料和方法

2．1 實驗材料

將栽培于大連市區花壇上生長非常旺盛的福祿考具有葉片嫩莖采回實驗室后，剪掉葉片，將有芽嫩莖作為研究材料。

2．2 材料的滅菌

具體的滅菌方法參見張蕾蕾等的穿龍薯蕷的研究［6］。

2．3 培養條件

培養條件參見張嵩巖徐長卿等的研究［7］。

2．4 試驗方法

2．4．1 生長芽的培養

將無菌幼嫩切成長0．4cm左右具有生長點的莖段后，接種到以 MS、1／2MS、1／3MS、B5、N6、LS和 White為基本培養基，附加IBA0．1mg·L－1＋IAA0．2mg·L－1的培養基上，進行芽的生長培養。芽的生長培養試驗重復3次，每種培養基接種培養100個材料。

2．4．2 生長芽分化培養

將上述培養的生長芽從基部切下后，接種到以MS＋AgNO31．0mg·L－1為基本培養基，附加不同濃度6－BA和NAA的培養基上，進行不同濃度6－BA、NAA對生長芽分化培養的試驗。生長芽分化培養試驗重復3次，每種處理接種培養100個材料。

2．4．3 不定芽生根培養

將上述培養的不定芽從基部切下后，把不定芽下部切口在無菌的NAA20mg·L－1的溶液中處理5min，接種到 White＋IAA0．4mg·L－1的培養基上，進行不定芽生根培養試驗。不定芽生根培養試驗重復4次，每種處理接種培養200個不定芽。

2．4．4 試管苗生根繼代培養

將以上培養的試管苗切成長1．5cm左右、具有2個葉片（實際上是具有2個生長點）的莖段后，采用不定芽生根培養的方法，進行試管苗的生根繼代培養。試管苗生根繼代培養試驗重復3次，每次繼代培養5代，每次繼代接種培養200個莖段。

2．4．5 試管苗的移栽與定植

把培養著繼代培養試管苗的培養瓶瓶塞打開，在直射光下煉苗3d，取出試管苗，移栽到上半層為干凈河沙的營養缽中。移栽后前10d要保持濕度90%以上、無直射光的環境條件。移栽試驗重復2次，每次移栽800株。

3 實驗結果分析

3．1 不同培養基對芽生長培養的影響

培養到35d時統計，結果見表1。由表1可見，不同的培養基對芽的生長影響不同。以B5、N6、LS為基本培養基，培養芽不能生長；以 MS、1／2MS、1／3MS、White為基本培養基，培養芽均能生長；其中以1／2MS、1／3MS為基本培養基不僅培養芽生長率達到了92%以上，而且生長芽長勢好。觀察也表明，在這2種培養基上，培養8d左右可見培養芽開始生長，接著，伴隨著生長芽的不斷生長，芽的生長率也不斷增加。培養到35d時，培養的生長芽就會生長為高0．8cm以上、莖粗0．2cm左右、具有3～6個葉片的生長芽。3次重復試驗的結果基本相同。以上結果說明，1／3MS或1／2MS＋IBA 0．1mg·L－1＋IAA0．2mg·L－1這一培養基是矮生福祿考芽生長的理想培養基。

表1 不同培養基對芽生長的影響

3．2 不同濃度6－BA、NAA對生長芽分化培養的影響

觀察表明，培養到11d時，可見在有的生長芽基部分化出不定芽，隨后，隨著分化數的增加，在先分化的生長芽基部又會分化出多個不定芽。培養到45d時統計，結果見表2。由表2可見，不同的6－BA和NAA對生長芽分化的影響不同。當基本培養基中不加任何6－BA和NAA，或6－BA的濃度達到了1．6mg·L－1，或 NAA 的濃度為1．0mg·L－1時，所培養的生長芽不能分化；在6－BA的濃度為0．4mg·L－1和1．2mg·L－1、NAA 的濃度為0．5mg·L－1時，所培養的生長芽分化效果也不理想；在6－BA的濃度為0．8mg·L－1、NAA的濃度為0．1mg·L－1時，分化效果最理想，不僅分化率為92%、每個培養生長芽能分化出4．5個不定芽，而且外觀上分化的不定芽長勢好。觀察還表明，培養到45d時，在6－BA的濃度為0．8mg·L－1、NAA的濃度為0．1mg·L－1的培養基上，分化的不定芽呈叢生狀，每個分化的不定芽不僅高0．8cm左右、莖粗0．2cm左右，而且葉色嫩綠、葉片伸展。3次重復試驗的結果基本一致。以上結果說明，MS＋Ag－NO31．0mg· L－1＋ 6 － BA0．8mg · L－1＋NAA0．1mg·L－1這種培養基是矮生福祿考生長芽分化培養的理想培養基。

表2 不同培養基對芽生長的影響

3．3 不定芽生根培養

接種培養26d時觀察統計證明：4次重復試驗的平均生根率為95．4%，并且培養的試管苗高4．2～5．3cm，每株試管苗具有5～8個葉片，且外觀上生長非常旺盛。以上結果說明，用濃度為20mg·L－1的NAA溶液對不定芽基部處理5min后，接種到 White＋IAA0．4mg·L－1培養基上生根的方法是矮生福祿考不定芽生根培養的理想方法。

3．4 試管苗生根繼代培養

觀察統計證明：每次繼代培養的周期為24d，3次重復試驗的平均生根率為97．8%，其繼代培養的試管苗長勢與不定芽生根培養的長勢基本一致。平均每代的繁殖系數為2．9。

3．5 試管苗的移栽與定植

移栽后9d可見成活并長出新葉，移栽后30d統計，2次移栽共成活1 538株，移栽的平均成活率為96．1%。

將移栽成活的試管苗于5月上旬定植到大連市區的花壇上。共定植了1 500株，成活1 472株，定植成活率為98．1%。定植于花壇上的試管苗不僅保持了矮生福祿考的所有植物學性狀，而且出現了生長旺盛、根系增加1倍左右、平均花期延長7d、秋末冬初枯萎晚10d左右的特點。

4 結語

在本研究的試管苗生根繼代培養階段，1株試管苗一年能繁殖出2．915（約為85萬）株。除掉各種不利因素，一年能保證繁殖50萬株試管苗，達到了快速繁殖的目的。并且試管苗移栽成活率較高，容易定植成活。這證明本研究所獲得的快速繁殖技術，能滿足人們對矮生福祿考觀賞栽培種苗的需求。

在本研究中，出現了試管苗生長旺盛、根系增加1倍左右、平均花期延長7d、秋末冬初枯萎晚10d左右的特點。產生這些特點主要是由以下原因引起的，包括研究所用的實驗材料是選擇生長非常旺盛植株的嫩莖，這種材料本身具有生長旺盛的遺傳性，在試管苗的培養過程中，使用了較高濃度的生長素。試管苗定植后其體內的生長素仍發揮著后效作用，從而促進了植株生長，使得植株生長旺盛；生長素的后效作用促進定植的試管苗形成非常發達的根系，既能促進吸收更多的營養，也促進了營養生長，使之出現花期延長的現象。

［1］包滿珠．花卉學［M］．北京：中國農業出版社，2004．

［2］劉先芳，羅 軍，吳鐵明．重瓣大花萱草組織培養快速繁殖的研究［J］．草業學報，2002：11（4）：105～107．

［3］張茹琴．棣棠花組織培養及快速繁殖的研究［J］．安徽農業科學，2009，37（17）：7 877～7 878．

［4］高 鋌，陳繼敏，楊鎮明．海芋組織培養及快速繁殖［J］．植物生理學通訊，2006，427（5）：910．

［5］朱志國，黃承鈞，陶 陶，等．蝴蝶蘭組織培養及快速繁殖的研究［J］．安徽農業科學，2009，37（30）：14 614～14 615．

［6］張蕾蕾，李 瑋，趙 娜，等．穿龍薯蕷嫩莖高效無性系建立的研究［J］．江西科學，2009，27（3）：396～400．

［7］張嵩巖，高 揚，陳旸升，等．組織培養及再生體系建立的研究［J］．亞熱帶植物科學，2010，39（1）：45～48．