酸堿度對人參皂苷提取率及其穩定性影響分析

陳木洲 劉延輝 黃姬 江丹娜

酸堿度對人參皂苷提取率及其穩定性影響分析

陳木洲 劉延輝 黃姬 江丹娜

目的考察酸堿度對人參皂苷浸漬提取及其穩定性的影響。方法采用高效液相色譜法測定人參皂苷總含量，以人參皂苷Rg1、人參皂苷Re的含量為考察指標，選用不同酸堿度的乙醇浸漬提取法提取人參皂苷，在加速與常溫條件下考察人參皂苷穩定性。結果乙醇pH值為8.7時，人參皂苷提取率最高;人參制劑最穩定的pH值為5.8。結論調節提取溶劑及制劑的酸堿度，可有效提高人參皂苷的穩定性。

人參皂苷;酸堿度;糖漿劑;浸漬提取

人參為五加科植物人參(Panax ginsenC.A.Mey)的干燥根，具有大補元氣，固脫生津，安神的功效。近代醫學研究表明［1，2］，人參可促進大腦對能量物質的利用，可以提高學習記憶能力，增強機體的免疫功能，且具有抗腫瘤，抗氧化等多種功能。人參的有效成份是人參皂苷，藥理研究證明某些人參皂苷具有抗癌、抗心律失常等活性。

目前中藥材提取方法多為水煎法［3］。但人參皂苷具有熱不穩定，在高溫中極易被破壞的性質，水煎法提取效率最低［4］，在乙醇溶液中有較好的溶解性，因此，采用乙醇溶液作為提取溶劑，能提高人參皂苷的提取率、確保藥效。

因為人參皂苷Rb1在強酸和強堿條件下水解，人參總皂苷有明顯減少。因此本試驗著重考察浸漬法中溶劑酸堿度以及人參液體制劑的酸堿度，對人參皂苷提取率及穩定性的影響。

1 儀器與試藥

粉碎機(貝利);U3000高效液相色譜儀(美國戴安);人參(電白縣明康醫藥有限公司，ZG-100601)，經眾生藥業檢驗室檢驗為Panax ginseng C.A.Mey.;人參皂苷Rg1對照品與人參皂苷Re對照品(中國藥品生物制品檢定所);D101型大孔吸附樹脂(安徽三星樹脂科技有限公司);乙腈為色譜純，乙醇、甲醇、磷酸均為分析純，水為純化水。

2 方法與結果

2.1 不同酸堿度溶劑浸漬提取人參皂苷 根據提取預試驗結果，以浸漬乙醇溶液酸堿為試驗因素(A)，選pH值為6.7、 7.7、8.7、9.7的乙醇溶液進行浸漬提取試驗。取人參120 g，打成中粉，加12倍量已用枸櫞酸/NaOH調好酸堿度的30%乙醇溶液浸漬提取72 h，浸漬液濾過;藥渣再加12倍量已調好酸堿度的30%乙醇溶液浸漬提取48 h，濾過;合并兩次濾液，濃縮至720ml，加水至1200ml水沉4 h，濾過，濾液平分三份，至1000 m l容量瓶中，加水稀釋至刻度，精密移取本品溶液25 ml，加水50 ml，搖勻，通過D101型大孔樹脂(內徑1.5 cm，長15 cm)，用水250 ml洗脫，棄去水洗脫液，繼用95%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液75 ml，蒸干，殘渣加甲醇溶解并移至5 ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，用微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液。

2.2 人參皂苷含量測定 參照文獻［5］，采用高效液相測定法。

色譜條件及系統適用性試驗:用十八烷基鍵合相硅膠為填充劑，流動相:乙腈-0.05%磷酸溶液(20:80)，流速:1 m l/ min;柱溫:25℃，檢測波長:203nm，理論塔板數安人參皂苷Re計算應不低于2500。

對照品溶液配制:精密稱取人參皂苷Rg1、人參皂苷Re對照品適量，分別加甲醇制成每1 m l中含0.4 mg、0.2 mg的溶液，即得。

測定法:分別精密吸取上述兩種對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

2.3 浸漬提取試驗結果 試驗以人參皂苷Rg1、人參皂苷Re總含量為考察指標，制劑中的人參皂苷含量結果見表1。

表1 試驗制劑人參皂苷含量(μg/ml，%)

2.4 人參皂苷穩定性試驗 根據提取試驗結果，選擇最佳浸漬酸堿度(pH=8.7)提取、制備人參液體制劑，再平分為4份，將制劑的pH值用枸櫞酸調為3.8、4.8、5.8、6.8。按藥典穩定性試驗指導原則，以人參皂苷Rg1、人參皂苷Re總含量，制劑的pH值為考查指標，分別進行加速試驗［溫度為(40± 2)℃，相對濕度為(75±5)%］與長期試驗(溫度為25±2℃，相對濕度為60±10%)考察。

3 結果與討論

3.1 采用浸漬法提取人參皂苷，以乙醇作為提取溶劑，選擇不同乙醇酸堿度進行提取，結果pH值在8.7時，人參皂苷Rg1與人參皂苷Re的提取率最高。

3.2 人參液體制劑產品多為偏酸性，考慮液體制劑產品的口感與酸堿度要求，本試驗選擇弱酸性條件考察其穩定性。從表2與表3結果可知，在加速試驗條件下與常溫試驗條件下，人參液體制劑最穩定的pH值為5.8。

［1］ Qing-song JIANG，Xie-nan HUANG，Gui-zhong YANG，et al.Inhibitory Effectof Ginsenoside Rbl on Cal-cineurin Signal Pathway in Cardiomyocyte Hypertrophy In-duced by Prostaglandin.Acta Pharmacologica Sinica，2007，28(8):1149-1154．

［2］ Li SHEN，Jian-zhong HAN，Chen LI，et al.Protective Effect of Ginsenoside Rgl on Glutamate-induced Lung In-jury.Acta Pharmacologica Sinica，2007，28(3):392-397．

［3］ 李伯廷.植物藥有效成分的提取與分離.太原:山兩高校聯合出版社，1993:262．

［4］ 閆光軍，張寶江，徐道娟.幾種常用人參提取工藝研究比較.山東醫藥工業，2002，22(4):8．

［5］ 付桂香，趙世萍，范保全，孫蓉.高效液相色譜法測定人參五味子糖漿中人參Rg1和Re的含量．藥物分析雜志，2004，24(2): 206-208．

523325東莞，廣東眾生藥業股份有限公司

表2 試驗樣品加速穩定性考察結果(μg/mg，pH)

試驗號 0個月 1個月 2個月 3個月 6個月μg/ml pH μg/ml pH μg/ml pH μg/ml pH μg/ml pH 1 331 3.8 60 3.20 20 3.13 9 3.03 0 3.01 2 331 4.8 251 4.75 206 4.70 154 4.65 102 4.60 3 331 5.8 266 5.60 225 5.50 171 5.38 136 5.31 4 331 6.8 256 6.54 215 6.25 162 5.88 108 5.60

表3 試驗樣品長期穩定性考察結果

試驗號 0個月 3個月 6個月 9個月 12個月μg/ml pH μg/ml pH μg/ml pH μg/ml pH μg/ml pH 1 331 3.8 244 3.56 148 3.37 84 3.17 18 3.01 2 331 4.8 295 4.76 258 4.70 229 4.64 204 4.57 3 331 5.8 301 5.73 272 5.65 245 5.57 240 5.46 4 331 6.8 298 6.70 266 6.59 239 6.35 213 6.20