東當歸化學成分研究及定量分析

劉向前，李麗麗，倪 娜，鄭禮勝

1中南大學制藥工程系，長沙410083;2湖南中醫藥大學藥學院，長沙410007;3揚子江藥業集團有限公司，泰州225321

東當歸化學成分研究及定量分析

劉向前1，2*，李麗麗1，倪 娜3，鄭禮勝1

1中南大學制藥工程系，長沙410083;2湖南中醫藥大學藥學院，長沙410007;3揚子江藥業集團有限公司，泰州225321

從當歸屬植物東當歸的根的乙醇溶液中分離得到了4個化合物，通過理化特性和波譜分析分別鑒定為雙(5-甲酰基糠基)醚(bis(5-formylfurfuryl)ether，1)、5-羥甲基糠醛(5-hydroxymethyl-2-furaldehyde，2)、豆甾醇(stigmasterol，3)、十七烷酸(heptadecanoic acid，4)。所有化合物均為首次從該植物中分離得到，其中1為首次從該屬植物中分離得到。采用高效液相色譜法對東當歸所含該屬特征活性成分紫花前胡素進行了定量分析。

當歸屬;東當歸;雙(5-甲酰基糠基)醚;高效液相色譜法;紫花前胡素

傘形科(Umbelliferae)當歸屬(Angelica)植物屬溫帶性屬，全球約90種，主要分布于北溫帶(中國、朝鮮、韓國、日本)和新西蘭，多具有補血活血、調經止痛的功效［1］。東當歸為當歸屬植物東當歸Angelica acutiloba(sieb.et Zucc)kigusticum acutilobum.Siebet Zuce的根，別名日本當歸、大和當歸、延邊當歸。早在20世紀70年代，東當歸在中國吉林省延吉市引種成功，作為朝鮮族的民族藥材，廣泛應用于民間。國內除四川從1991年開始引種栽培外，其他地區尚未有栽培［2］。《日本藥局方》記載的“和當歸”，即為延邊地區引種的東當歸，具有補血調經、活血止痛、潤腸通便的作用，與中國當歸的功能主治相一致。目前，國內外學者僅對四川引種栽培的東當歸揮發油成分采用GC-MS聯用法進行了分析，未見其化學成分研究和定量分析的報道［3］。在系統研究當歸屬植物化學分類的基礎上［4］，為了進一步開發利用我國延邊地區的東當歸資源，本文對其化學成分進行研究，從中分離得到4個化合物;同時，采用HPLC法對其中所含的當歸屬植物的特征活性成分紫花前胡素進行了定量分析。

1 儀器與材料

Bruker DRX 500超導核磁共振波譜儀;Pekin-Elmer 983G型紅外光譜儀;ZAB-HS型質譜儀;X-4型顯微熔點儀。GF254薄層色譜硅膠、200～300目柱色譜硅膠(青島海洋化工廠);Sephadex LH-20(amersham pharmacia biotech公司)。實驗用甲醇和乙腈為色譜純，水為三蒸水，其他試劑均為分析純。

東當歸藥材購于吉林延邊，經湖南中醫藥大學藥學院劉向前教授鑒定為東當歸Angelica acutiloba (sieb.et Zucc)的根。標本(編號:20070827)存放于中南大學制藥工程系標本室。

2 提取分離

取干燥的東當歸根1.0 kg，以85%乙醇冷浸2次，分別為20、30 d。合并2次冷浸濾液，濃縮回收乙醇，得東當歸粗浸膏110.0 g。粗浸膏用水混懸，乙醚萃取，除去溶劑后得到干浸膏25.0 g，取約15.0 g進行硅膠柱層析分離，以正己烷∶乙酸乙酯= 12∶1→2∶1梯度洗脫，得到Fr.EA(10∶1)，Fr.EB(8∶1)，Fr.EC(5∶1)，Fr.ED(2∶1)4個粗組分。經反復硅膠柱層析及Sephadex LH-20凝膠柱層析純化，由Fr.ED(2∶1)部分分得化合物1(70 mg)和2(40 mg)，Fr.EB(8∶1)部分分得化合物3(45 mg)，Fr.EC (5∶1)部分分得化合物4(30 mg)。

圖1 化合物1和2的結構Fig.1 Stuctures of compounds 1 and 2

3 結構鑒定

化合物1 淡黃色針晶(甲醇)，mp.108～109℃。EI-MS m/z:234，205，138，125，109(基峰)，95; TOF-HRMS m/z:235.0585［M+H］+(計算值為235.0606)，分子式為C12H10O5;IR(KBr)νmax: 3111，2849，1671，1523 cm–1。質子核磁共振譜(δ 9.62)和碳譜核磁共振譜(δ 177.7)的信號說明該化合物含有醛基。質子核磁共振譜顯示四組峰號，其峰面積比為1∶1∶1∶2，碳譜核磁共振譜只有6個碳信號，說明該化合物為對稱結構。13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ:64.6(C-6，C-6')，177.7(CO)，4個芳碳信號:157.2(C-2，C-2')，111.8(C-3，C-3')，121.8(C-4，C-4')，152.8(C-5，C-5')，為呋喃環;1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ:4.63(H-6，H-6'，-CH2O-部分結構)，6.57(H-3，H-3')，7.21(H-4，H-4')，9.62(CHO，5'-H)。且數據與文獻報道［5］(5-甲酰基糠基)醚一致。

化合物2 棕黃色油狀化合物，EI-MS m/z: 126;IR(KBr)νmax:3386，2846，1673，1522，1397，1192，1023，811 cm–1;1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ: 3.91(-OH)，4.67(H-6)，6.49(H-4)，7.21(H-3)，9.51(CHO);13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ:57.4 (C-6)，161.1(C-5)，110.0(C-4)，123.4(C-3)，152.2(C-2)，177.8(CO)。以上數據與文獻報道［6］的5-羥甲基糠醛一致。

化合物3 白色粉末(正己烷-乙酸乙酯)，mp.127～128℃，Liebermann-Burchard反應陽性。IR (KBr)νmax:801，1064，1381，1465，1641，2867，2937， 2960，3429;1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ:0.68(s，3H，H-18)，1.01(s，3H，H-19)，0.90(d，3H，J=6.6 Hz，H-29)，0.93(d，6H，J=6.9 Hz，H-26和H-27)，0.82(d，3H，J=6.8 Hz，H-21)，5.35(d，1H，H-6)，5.14(dd，1H，J=15.5，8.5 Hz，H-22)，5.03(dd，1H，J=15.0，8.5 Hz，H-23)，3.52(m，1H，H-3);13C NMR(150 MHz，CDC13)δ:37.2(C-1)，31.7(C-2)，71.8(C-3)，42.3(C-4)，140.8(C-5)，121.7(C-6)，31.7(C-7)，31.7(C-8)，50.2(C-9)，36.2(C-10)，21.0(C-11)，39.7(C-12)，42.2(C-13)，56.9(C-14)，23.1(C-15)，28.3(C-16)，56.0(C-17)，12.0 (C-18)，19.8(C-19)，42.2(C-20)，21.2(C-21)，138.3(C-22)，129.3(C-23)，51.3(C-24)，34.0(C-25)，21.1(C-26)，18.8(C-27)，26.1(C-28)，12.3 (C-29)，140.8，121.7，138.3，129.3，71.8。以上數據與文獻報道［7］的豆甾醇一致。

化合物4 白色粉末(氯仿)，mp.60～61℃。IR(KBr)νmax:2918，2849，1702，1468，1410，1294，1272，從紅外譜中看出有一系列的飽和烴基存在，還有羰基吸收峰以及 C-O伸縮振動的吸收峰。1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ:1.185(s，26H)，0.810(m，3H)，2.27(m，2H)，1.56(m，2H);13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ:14.10(C-1)，22.7(C-2)，31.9(C-3)，29.68，29.68，29.66，29.65，29.63，29.58，29.42，29.35，29.23，29.05(10C，C-4～C-14)，24.67 (C-15)，34.02(C-16)，179.92(C-17)。以上數據與文獻報道［8］的十七烷酸一致。

4 紫花前胡素的定量分析

4.1 色譜條件［9］

AT.LICHROM C18色譜柱(250 mm×4.6 mm;5 μm)，流動相為pH=5.0的磷酸-磷酸二氫鈉緩沖液(稀釋10倍):乙腈(1∶1)，檢測波長為280 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為30°C，進樣量10 μL。

4.2 對照品溶液的制備

精密稱取紫花前胡素對照品8.25 mg，甲醇溶解并定容至50 mL，精密移取1 mL，用甲醇稀釋并定容至25 mL。經0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。

4.3 供試品溶液的制備

精密稱取東當歸藥材粉末10.3 g，加乙醚100 mL水浴提取4 h，過濾，濃縮，殘渣用甲醇溶解，轉移至50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。經0.45 μm微孔濾膜過濾，即得。

4.4 東當歸中紫花前胡素的含量測定

將“4.3”項下供試品溶液按照“4.1”項下色譜條件測定紫花前胡素含量，結果表明:東當歸藥材中紫花前胡素含量為10.05 μg/g。

5 討論

近年來關于東當歸揮發油組分［10］和提取物藥理作用［11］曾見報道，但對其化學組分及藥理作用卻未有報道。本文首次對延邊地區東當歸的根進行化學成分分析。紫花前胡素是1995年韓國學者研究發現的一種吡喃型香豆素，其對白血病、糖尿性高血壓以及降低腎毒素具有顯著效果［12］，有望開發成為抗腫瘤等疾病的新藥。筆者曾用HPLC法測定過不同批次、不同產地的12種當歸屬植物中紫花前胡素的含量，結果表明12種植物均含有紫花前胡素;在此基礎上，本文測定了東當歸中紫花前胡素的含量，結果亦含有紫花前胡素。由此可知，紫花前胡素可能為當歸屬的特征活性成分，廣泛存在于當歸屬植物中。本研究為東當歸的質量控制、今后作為正式藥材納入國家標準以及當歸屬植物的化學分類提供了實驗依據。

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Chemical Constituents and Quantitative Analysis of Angelica acutiloba kitag.

LIU Xiang-qian1，2*，LI Li-li1，NI Na3，ZHENG Li-sheng11Department of Pharmaceutical Engineering，Central South University，Changsha 410083，China;2College of Pharmacy，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410007，China;3Yangtze River Pharmaceutical Group，Taizhou 225321，China

Four compounds were isolated from the roots of Angelica acutiloba kitag.and their structures were identified as bis(5-formylfurfuryl)ether(1)，5-hydroxymethyl-2-furaldehyde(2)，stigmasterol(3)，heptadecanoic acid(4)by spectroseopic evidences(1H NMR，13C NMR，HR-MS，etc).All the compounds were isolated from this plant for the first time and compounds 1 was obtained from this genus for the first time.The relative contents of decursin which was the special active constituent of Angelica genus were analyzed by HPLC.

Angelica;Angelica acutiloba kitag.;bis(5-formylfurfuryl)ether;HPLC;decursin

1001-6880(2011)04-0693-03

2009-11-09 接受日期:2010-01-14

*通訊作者 Tel:86-731-88995848;E-mail:lxq0001cn@163.com

R284.2

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