郝志欣,安東臣,黃 芬
(大連民族學院生命科學學院學生遼寧大連 116605)
螺旋藻多糖提取優選工藝條件的研究
郝志欣,安東臣,黃 芬
(大連民族學院生命科學學院學生遼寧大連 116605)
本研究以杭州螺旋藻為研究材料,對浸提pH值、溫度、浸提固液比以及浸提次數作為單因素進行正交實驗,通過方差分析得到螺旋藻水溶性多糖浸提工藝的優選組合,進而獲得最大浸提率,為螺旋藻的深度開發利用提供參考。
(1)樣品來源:實驗樣品為杭州螺旋藻。將樣品研碎,干燥,密封在干燥器內待用。
(2)樣品處理:準確稱取0.5 g樣品于250 mL燒杯中,每份加水150 mL,依實驗確定的4個因素見表1。分別浸提1h,過濾,濾渣加150 mL水浸提,過濾,濾液合并,濃縮至10 mL,用5%三氯乙酸調pH值到中性(因為堿性條件下多糖易分解,不易保存),取3 mL濃縮液加入3倍體積(即9 mL)的95%乙醇,在3 000 r·s-1離心20 min,收集沉淀得粗多糖。

表1 正交實驗因素水平表
將蒽酮-濃硫酸試劑(0.1 g蒽酮加50 mL的濃硫酸,現用現配)按下表處理標準樣品,加完蒽酮-濃硫酸后立即蓋蓋并放入冰水中,冷卻約1 min后放入沸水浴中,加熱10 min后取出冷卻至室溫,用紫外分光光度計在620 nm處比色測定,每組實驗做3個平行,結果見表2。由測定結果得出標準曲線回歸方程:
A=0.0069 C - 0.002,R2=0.999
其中,A為吸光度值;C為葡萄糖濃度μg·mL-1。

表2 多糖含量測定標準曲線
通過對單因素梯度實驗和正交實驗的結果分析,得到螺旋藻多糖的最佳浸提工藝條件:pH值為11,溫度為80℃,固液比1:30,浸提次數為2次,每次浸提1 h。對螺旋藻多糖浸出率影響最大的因素是浸提次數,其次是pH值、固液比,而浸提溫度沒有顯著影響。經醇沉及脫蛋白處理后的螺旋藻多糖浸出率最高可達4.213%。
通過對螺旋藻多糖提取過程中各環節的最佳條件的探討,找到了一條提取螺旋藻多糖較好的工藝方法。應用柱層層析或氣相色譜等方法測定多糖組分,有待于進一步深入研究。
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R282.4
A
(責任編輯 劉敏)
1009-315X(2011)05-0543-01
2010-06-12;最后
2011-03-28
大連民族學院太陽鳥計劃資助項目(20080330)。
指導教師:楊寶靈(1969-),女,內蒙古通遼人,高級實驗師,主要從事細胞生物學研究。