紫番薯原花青素的提取和穩(wěn)定性研究

劉 萍王文君

（1秦皇島市海港區(qū)農(nóng)業(yè)局，秦皇島066000） （2遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)，珠海 519041）

·基礎(chǔ)研究·

紫番薯原花青素的提取和穩(wěn)定性研究

劉 萍1*王文君2

（1秦皇島市海港區(qū)農(nóng)業(yè)局，秦皇島066000） （2遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)，珠海 519041）

采用乙醇提取紫番薯原花青素，運(yùn)用AB-8大孔樹(shù)脂進(jìn)行純化，洗脫液分別為體積濃度10%、30%、50%和70%的乙醇。洗脫液經(jīng)濃縮、冷凍干燥制得4種紫番薯原花青素樣品，并對(duì)每個(gè)樣品的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。

紫番薯；原花青素；穩(wěn)定性

原花青素（procyanidins，PC） 是從植物中分離得到的一類可在熱酸處理下產(chǎn)生紅色花色素的多酚類化合物，因其具有較強(qiáng)的清除自由基、抗氧化、改善心血管疾病、抗癌、抗輻射和抗病毒等生物活性，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥等領(lǐng)域。目前市場(chǎng)上的商品原花青素主要源于葡萄籽提取物，而葡萄籽原花青素的穩(wěn)定性比較差。因此，近幾年有許多探索從其他的植物中提取原花青素并分析穩(wěn)定性的研究報(bào)道。我們研究發(fā)現(xiàn)紫番薯中也富含原花青素，因此對(duì)紫番薯原花青素進(jìn)行了提取，并用AB-8大孔樹(shù)脂進(jìn)行了純化，同時(shí)對(duì)樣品的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，希望對(duì)紫番薯原花青素的開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 試劑與儀器

紫番薯，珠海市三灶市場(chǎng)；原花青素標(biāo)準(zhǔn)品，上海中藥研究所；AB-8型國(guó)產(chǎn)大孔吸附樹(shù)脂，北京慧德易科技有限責(zé)任公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

UV2550型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，日本島津；CQ-200B型超聲波振蕩器，上海躍進(jìn)醫(yī)學(xué)用光學(xué)器械廠；400 g搖擺式高速中藥粉碎機(jī)，溫嶺市林大機(jī)械有限公司；RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；Scientz-10N型冷凍干燥機(jī)，寧波新藝生物科技股份有限公司。

2 試驗(yàn)方法

2.1 脫脂紫番薯粉的制備

取新鮮紫番薯洗凈、切成細(xì)絲放在陰涼避風(fēng)處自然風(fēng)干，將風(fēng)干后的紫番薯絲用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)80目篩，稱重，細(xì)粉用石油醚按料液比1 g∶1 mL的比例浸泡1 h，然后超聲波20 min，抽濾至近干，45℃烘烤24 h，備用。

2.2 原花青素的提取

脫脂紫番薯粉用體積濃度30%的乙醇以料液比1 g∶3 mL浸提2.5 h，超聲提取20 min，抽濾，收集濾液。將濾渣再用體積濃度30%乙醇以料液比1 g∶2 mL進(jìn)行浸提，再次超聲提取20 min，抽濾，收集濾液。將濾渣再用體積濃度30%乙醇按料液比1 g∶1 mL進(jìn)行浸提，再次超聲提取20 min，抽濾，收集濾液。將濾液合并用旋蒸儀蒸至黏稠狀，然后用AB-8大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附洗脫，洗脫液分別用體積濃度10%、30%、50%、70%的乙醇，把洗脫液真空濃縮至20 mL左右，冷凍干燥24 h，分別得到紫番薯原花青素樣品 S1、S2、S3、S4。

2.3 原花青素含量測(cè)定（標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制）

原理：鐵鹽作為催化劑的條件下，原花青素在酸性條件下加熱轉(zhuǎn)化為紅色，紅色的深淺與原花青素的含量成正比關(guān)系。該方法特征性顯著，操作方便，重現(xiàn)性好。

試驗(yàn)方法：稱取原花青素標(biāo)準(zhǔn)品10.00 mg溶于乙醇中，定容至10 mL，吸取該溶液0.10 mL、0.25 mL、0.50 mL、1.00 mL、1.50 mL分別置于5個(gè)10 mL容量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻。將正丁醇與鹽酸按95∶5的體積比混合后，取出6.00 mL分別置于5個(gè)10 mL具塞比色管中，再加入0.20 mL硫酸鐵銨溶液（24.1 mg/mL） 和1.00 mL原花青素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，混勻，置沸水浴回流，加熱40 min，立即置冰水中冷卻。以V（正丁醇—鹽酸溶液）∶V（硫酸鐵銨溶液）∶V（乙醇）=6.00∶0.20∶1.00的試劑作空白參比，在549 nm處用紫外分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品同樣條件下測(cè)定吸光度。

2.4 金屬離子對(duì)原花青素穩(wěn)定性的影響

配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)均為0.1%的各種金屬離子溶液（K+、Ca2+、Zn2+、Na+、Fe3+）各50mL，分別取9mL置于10 mL容量瓶中，向其中加入1 mL一定濃度的樣品溶液或標(biāo)準(zhǔn)品溶液，搖勻，立即取樣測(cè)定280 nm波長(zhǎng)處吸光度，然后密封避光放置并測(cè)定24 h和48 h后吸光度；另取9 mL水加入相同濃度的樣品溶液或標(biāo)準(zhǔn)品溶液1 mL搖勻（結(jié)果中記為原液），同法測(cè)定做對(duì)照。

2.5 食品添加劑對(duì)原花青素穩(wěn)定性的影響

配制0.4 mol/L的葡萄糖溶液、0.1 mol/L的食鹽溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.02%的谷氨酸鈉溶液、0.02%的檸檬酸溶液各50 mL，分別取9 mL置于10 mL容量瓶中，向其中加入1 mL一定濃度的樣品溶液或標(biāo)準(zhǔn)品溶液，搖勻，立即取樣測(cè)定280 nm波長(zhǎng)處吸光度，然后密封避光保存并測(cè)定24 h和48 h后吸光度；另取9 mL水加入1 mL相同濃度的樣品溶液或標(biāo)準(zhǔn)品溶液搖勻（結(jié)果中記為原液），同法測(cè)定做對(duì)照。

3 結(jié)果

3.1 紫番薯原花青素含量

根據(jù)原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線得回歸方程為D（λ）=1.7418 ρ-0.0104，R2=0.999，線性關(guān)系很好，可以用于定量分析。乙醇洗脫得到的4個(gè)紫番薯樣品原花青素的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)） 分別為1.6%、10.8%、8.2%、4.3%。從這里可以看出，AB-8大孔樹(shù)脂對(duì)紫番薯色素具有一定的富集能力，但效果有限。

3.2 金屬離子對(duì)原花青素穩(wěn)定性的影響

金屬離子對(duì)原花青素穩(wěn)定性的影響見(jiàn)圖1～圖5。

圖1 金屬離子對(duì)S1穩(wěn)定性的影響

圖2 金屬離子對(duì)S2穩(wěn)定性的影響

圖3 金屬離子對(duì)S3穩(wěn)定性的影響

圖4 金屬離子對(duì)S4穩(wěn)定性的影響

圖5 金屬離子對(duì)S5穩(wěn)定性的影響

由圖1～圖5可知，紫番薯原花青素在加入各種金屬離子后吸光度均有不同程度的變化。各樣品和標(biāo)準(zhǔn)品溶液穩(wěn)定性受Fe3+和Zn2+的影響比較大，F(xiàn)e3+的加入后有絮狀沉淀物產(chǎn)生；K+、Ca2+、Na+對(duì)其穩(wěn)定性影響較小。

3.3 食品添加劑對(duì)原花青素穩(wěn)定性的影響

食品添加劑對(duì)原花青素穩(wěn)定性的影響見(jiàn)圖6～圖10。

由圖6～圖10可以看出，常用的食品添加劑對(duì)4個(gè)紫番薯原花青素穩(wěn)定性影響均較小。同一種添加劑放置24 h、48 h后值基本不變；各種不同的添加劑加入后初始的吸光度值也非常接近。這些均表明紫番薯原花青素對(duì)食品添加劑表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。

圖6 食品添加劑對(duì)S1穩(wěn)定性的影響

圖7 食品添加劑對(duì)S2穩(wěn)定性的影響

圖8 食品添加劑對(duì)S3穩(wěn)定性的影響

圖9 食品添加劑對(duì)S4穩(wěn)定性的影響

圖10 食品添加劑對(duì)S10穩(wěn)定性的影響

4 結(jié) 論

研究表明，紫番薯原花青素對(duì)食品中常用的金屬離子、添加劑等具有良好的穩(wěn)定性。AB-8大孔樹(shù)脂對(duì)紫番薯原花青素具有一定的富集能力（粗提物含量為7.442 mg/g），但效果有限。

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Research on extraction and stability ofprocyanidin from purple sweet potato

LIUPing1*WANGWen-jun2
1（Haigangarea agriculture bureau ofQinhuangdaocity，Qinhuangdao 066000，China）1（Zunyi medical college zhuhai campus，Zhuhai 519041，China）

Procyanidins in purple sweet potatoes extracted by ethanol were studied.And the extract was purified with AB-8 macroporous resin.The eluent concentration included 10%，30%，50%and 70%of ethanol solution.Four samples were obtained byconcentration and freeze dryingtreatment.Stabilityofeach sample was studied.

purple sweet potatos；procyanidins；stability

TS201.2+4

A

1673-6004（2012）02-0024-04

* 劉萍，女，1974年出生，2002年畢業(yè)于河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，水產(chǎn)工程師

2012-03-20