中藥退黃外洗液穩(wěn)定性的追蹤分析*

王艷寧， 高桂娥， 黃仕孫， 吳曙粵

(廣西南寧市第一人民醫(yī)院， 廣西 南寧 530022)

中藥退黃外洗液是由茵陳、柴胡、郁金、薄荷腦等16味中藥組成的復(fù)方制劑，具有行氣解郁、利膽退黃等功效，主要用于預(yù)防和治療新生兒黃疸。經(jīng)長期的臨床驗證，效果顯著[1～3]，另其質(zhì)量控制簡單易行，重現(xiàn)性好。為更好探討中藥退黃外洗液的質(zhì)量穩(wěn)定性，本試驗進(jìn)行了相關(guān)檢測，現(xiàn)報道如下。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 電子分析天平(GR-202，精度十萬分之一)；AE240S電子天平(十萬分之一)；酸度計(pHS-3C)；高效液相色譜儀(Shimadzu LC-2010、Shimadzu 20AD)。

1.2 試藥 大黃對照藥材(批號902-9002)；薄荷腦對照品(批號0728-9304)；梔子苷對照品(批號10749-200613)，均購自中國藥品生物制品檢定所。中藥退黃外洗液(批號為071125，071115，071127)，以及缺大黃的陰性對照樣品、缺薄荷腦的陰性對照樣品、缺梔子的陰性對照樣品均由南寧市第一人民醫(yī)院提供；乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。藥品的包裝材料：鈉蓋玻璃瓶。

2 中藥退黃外洗液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2.1 性狀 按照中國藥典2005年版一部附錄XIA“溶液顏色檢查法”檢測3個批號中藥退黃外洗液的性狀，均為黃色澄明液體。

2.2.1 大黃的鑒別[4]取本品10 mL，用乙醚振搖提取2次，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.1 g，加甲醇20 mL，浸泡1 h，濾過，取濾液5 mL，蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，再加鹽酸1 mL，加熱回流30 min，立即冷卻，用乙醚分2次提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為對照藥材溶液。按照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄Ⅵ B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。缺大黃的陰性對照無干擾。

2.2.2 薄荷腦的鑒別[4]取本品10 mL，置具塞錐形瓶中，加乙醚10 mL，振搖數(shù)分鐘，靜置分層，分取乙醚層，濃縮至2.5 mL，作為供試品溶液。另取薄荷腦對照品，加乙醚制成每1 mL含2 mg的的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗，吸取上述兩種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(17：3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。缺薄荷腦的陰性對照無干擾。

2.3 檢查

2.3.1 裝量 每個容器裝量：不少于標(biāo)示裝量的97%；平均裝量：不少于標(biāo)示裝量(《中國藥典》2005版一部附錄Ⅻ C)。

2.3.2 微生物限度 照微生物限度檢查法檢查(《中國藥典》2005版一部附錄XⅢC[2])。

2.4 梔子苷的含量的測定[5]

2.4.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：甲醇-水(25∶75)；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：35℃；檢測波長：238 nm；進(jìn)樣量：10 μL。理論板數(shù)按梔子苷峰計算不低于2000，梔子苷與其相鄰峰均能達(dá)到基線分離，分離度R>1.5。

2.4.2 對照品溶液的制備 精密稱取梔子苷對照品13.65 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇定容制成濃度為0.273 mg·mL-1的對照品溶液。

2.4.3 供試品溶液的制備 精密量取中藥退黃外洗液2 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇定容，搖勻，濾過，即得。

2.4.4 陰性供試品溶液的制備 取缺梔子的陰性對照樣品，按“2.2.3”法制成。

2.4.5 線性考察 精密量取梔子苷對照品溶液(0.273 mg·mL-1)0.2、0.5、1.0、2.0、3.0 mL，置于10 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。得每1 mL含梔子苷5.46，13.6， 27.3，54.6， 81.9 μg的對照品溶液，按3.1項下色譜條件下分別進(jìn)樣測定(進(jìn)樣量為10 μL)，測定峰面積，以梔子苷對照品進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)(Y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸直線方程為 Y=15 998.125X +11 969.984(r=0.999 8)。結(jié)果表明，梔子苷進(jìn)樣量在5.46～81.9 μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好線性關(guān)系。加樣回收率為98.38%，RSD=1.53%(n=6)，精密度試驗以及重復(fù)性試驗效果滿意。可制訂本制劑含梔子苷的量不得少于0.75 mg/ mL。

3 穩(wěn)定性考察及結(jié)果

按中藥退黃外洗液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)“2”項下，三批樣品置于室溫常規(guī)的貯藏條件下，在0、3、6、9、12、18、24月分別進(jìn)行性狀、鑒別、檢查等以及梔子苷的測定。結(jié)果各項指標(biāo)未發(fā)生顯著變化，其性狀均為棕黃色液體，味苦、辛涼；薄層鑒別中均能清晰檢出大黃和薄荷腦的斑點(diǎn)；Ph值在4.6～5.1之間；密度為0.97～0.98；裝量符合要求；微生物監(jiān)測未檢出金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、活螨；細(xì)菌總數(shù)≤100個/g；霉菌、酵母菌的總數(shù)≤100個/g，均符合要求。制劑中梔子苷的含量變化詳見表1。表明中藥退黃外洗液在兩年內(nèi)的質(zhì)量穩(wěn)定，無明顯變化。

表1 3批制劑中梔子苷含量 (mg/mL，n=3)

4 討論

長期留樣觀察法[6～7]是指在接近藥物的實際貯存條件下進(jìn)行，穩(wěn)定性考察的目的是考察藥物制劑在溫度、濕度、光線的影響下隨時間變化的規(guī)律，為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運(yùn)輸條件提供科學(xué)依據(jù)，同時通過試驗建立藥品的有效期[8]。而留樣觀察法是與藥品的生產(chǎn)、儲存、流通的實際情況接近，其試驗結(jié)果可靠，試驗方法簡單，為此，筆者選用了長期留樣觀察法對中藥退黃外洗液進(jìn)行穩(wěn)定性的考察。

結(jié)果表明，中藥退黃外洗液3批制劑在兩年的檢測中，其外觀性狀、鑒別、微生物限度等方面在各階段都沒有顯著性變化，含量經(jīng)兩年考察，變化很小，表明中藥退黃外洗液是穩(wěn)定的。另外，中藥退黃外洗液包裝用的是鈉蓋玻璃輸液瓶，對制劑的質(zhì)量無影響，具有良好的防潮防霉變等作用，故本制劑可定有效期為2 a。

[1]吳曙粵，高桂娥，王利民，等.新生兒退黃外洗液的臨床效果觀察[J].廣西醫(yī)學(xué)，2005，27(12))：2014.

[2]王利民，吳曙粵，黃春蘭，等.新生兒退黃洗液早期干預(yù)新生兒黃疸的療效[J].實用兒科志，2006，21(14)：944～945.

[3]高桂娥，吳曙粵，黃仕孫，等.新生兒退黃外洗液的制備和臨床觀察[J].中成藥，2006，28(11)：附4～附5.

[4]黃仕孫、王艷寧、髙桂娥，等.中藥退黃外洗液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中薄層鑒別的探討[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2009，30(8)：46～51.

[5]黃仕孫，王艷寧，高桂娥，等.中藥退黃外洗液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國藥房，2010，21(15)：1399～1400.

[6]趙緒元，李煥德，向大雄，等.加味腦樂靜合劑穩(wěn)定性的跟蹤分析[J].中草藥，2002，33(2)：118～120.

[7]魯漢蘭，徐雅敏，張亞金，等.疏肝舒乳顆粒穩(wěn)定性考察[J].中藥材，2003，26(5)：367.

[8]閻海燕，張海英.金氏腎炎丸的穩(wěn)定性[J].新疆中醫(yī)藥，2009，27(1)：49～50.