四妙勇安湯合補陽還五湯對實驗性玻璃體積血IL-6的影響*

王醫平， 張 儒， 王紅鴿

(陜西渭南職業技術學院， 陜西 渭南 714000)

玻璃體積血(vitreous hemorrhage，VH)是臨床上常見的一種眼科疾病，積血一旦形成，不僅破壞玻璃體正常透明結構，使屈光間質混濁，導致視力下降或喪失，同時對眼部組織產生嚴重的破壞作用。目前西醫治療多采用玻璃體切割術、視網膜冷凝術及一些激光手術等。筆者照中醫理論，將辨證與辨病相結合，運用四妙勇安湯合補陽還五湯加減治療玻璃體積血取得了較好的臨床療效。為進一步探討四妙勇安湯合補陽還五湯治療本病的作用及機理，筆者進行了如下實驗，現報道如下。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 健康家兔32只，體重1.0～2.0 kg，雌雄不限，購于西安交通大學實驗動物中心。經裂隙燈顯微鏡、眼底鏡檢查眼前節及眼底均無明顯異常，飼料及青菜喂養。

1.2 藥品 四妙勇安湯合補陽還五湯(玄參30 g，銀花20 g，當歸15 g，甘草10 g，黃芪30 g，桃仁、紅花、赤芍、地龍、川芎各10 g，豬苓、茯苓各15 g，三七粉6 g，每劑藥煎好后濃縮至100 mL，放冰箱冷藏備用)；安妥碘注射液2 mL 0.4 g；0.9%氯化鈉注射液250 mL 2.25 g；鹽酸利多卡因注射液5 mL 0.1 g；0.25%氯霉素滴眼液8 mL 20 mg；1%阿托品滴眼液8 mL

1.3 試劑 兔IL-6雙抗體夾心法酶聯免疫檢測(ELISA)試劑盒(由森雄制劑公司提供)。

2 實驗方法

2.1 動物分組 32只家兔按數字隨機法分為A正常組(空白對照組)、B模型組、C對照組(安妥碘組)和D實驗組(四妙勇安湯合補陽還五湯組)，每組8只。

2.2 模型制備 實驗動物適應性喂養3 d，B、C、D 3組均造成右眼玻璃體積血模型。先用生理鹽水清潔右眼結膜囊，用1%阿托品滴眼液散瞳，1%丁卡因滴眼行結膜表面麻醉，酒精消毒后用lmL一次性注射器從兔耳緣靜脈取血0.5 mL備用，迅速用9號針頭于1點位距角膜緣3 mm處直接刺透鞏膜，抽取玻璃體液0.2 mL，迅速于10點位距離角鞏膜緣3 mm處用9號針頭向玻璃體內注入自體血0.2 mL，立即拔除針頭，用消毒棉簽按壓30 s后滴0.25%氯霉素滴眼液1滴。造模后每天以0.25%氯霉素滴眼液滴眼，3次/d；1%阿托品滴眼液滴眼，1次/d。造模24 h后用裂隙燈顯微鏡及檢眼鏡觀察造模兔眼，以確認玻璃體積血造模成功。

2.3 給藥方法 造模后24 h開始給藥，連續用藥5周，根據施新猷[1]介紹的以人的常用量推算兔的用藥量。A正常組不予任何干預；B模型組每天用生理鹽水灌胃，1次10 mL，1次/d；C對照組，安妥碘 0.125 g，肌肉注射，1次/d；D實驗組，每天灌服中藥“四妙勇安湯合補陽還五湯”濃縮煎劑10 mL/kg，2次/d。

2.4 標本采集及動物處理 治療結束時，在眼科常規檢查完畢后，在兔右眼結膜囊內滴1%丁卡因行表面麻醉，于10點位距角膜緣3 mm處用4號針頭抽取玻璃體液0.5 mL，并予5000r/min離心，5 min后，立即貯存于-20 ℃待測。

觀察指標：采用酶聯免疫檢測法(ELISA)檢測玻璃體液中的IL-6含量，嚴格按試劑盒說明書進行操作

2.5 統計學處理 采用SPSS 19.0統計軟件進行分析，計量資料以均數士標準差表示，組間比較用One-way ANOVA檢驗，方差齊使用Bonferroni法，方差不齊使用Tamhane’sT2法，以P<0.05為顯著統計學差異，以P<0.01為極顯著統計學差異。

3 實驗結果

玻璃體液中IL-6的含量正常組IL-6的含量較低；模型組IL-6的含量顯著增加，與正常組比較P<0.01；對照組、實驗組均能明顯降低IL-6的含量，與模型組比較P<0.01；實驗組降低的更為明顯，與對照組相比P<0.05，見表1。

表1 各組實驗兔玻璃液中IL-6的含量( ±s )

表1 各組實驗兔玻璃液中IL-6的含量( ±s )

組別nFe2+濃度(pg/mL)正常組858 75±1 37 模型組8287 56±11 34?對照組8201 69±9 17?#實驗組8152 14±1 87?#△

注：與正常組相比,*P<0.01；與模型組相比,#P<0.01；與對照組相比,△P<0.05

4 討論

4.1 玻璃體積血的中醫認識 玻璃體積血屬中醫“內障”“血證”范疇。輕中度玻璃體積血，患者僅覺眼前有飛蚊，云霧移動，屬“云霧移睛”，“視瞻昏渺”；重度玻璃體積血，患者視物盲而不見，屬“暴盲”；若合并血溢于瞳神屬“血灌瞳神”；眼外傷所致屬“撞擊傷目”。本病主要病機可概括為火熱灼傷目絡、絡破血溢，氣虛不攝血、氣滯血瘀，瘀血不去、日久出血，血溢脈外、目失濡養等。中醫治療本病治療多采用分期論治，提倡出血早期涼血止血，防止進一步出血；中期活血化瘀，加速積血吸收；晚期多用軟堅散結之法防止積血機化；也有學者采用分證論治，所分證型雖各有差異，但均與血熱、血瘀、陰虛、氣滯、氣虛有關，治療上多在止血活血的基礎上加用清肝、養陰、益氣的藥物。

4.2 四妙勇安湯與補陽還五湯 筆者在臨床中按照中醫理論，將辨證與辨病結合相結合，采用清熱養陰利水、益氣活血祛瘀法治療本病，方用四妙勇安湯合補陽還五湯加減，療效較為滿意。四妙勇安湯是清代鮑相璈用來治療手足脫骨疽之方，曰此方：“一連十劑，永無后患，藥味不可少，減則不效”[2]。 既然本方能夠治療脫骨疽，則必有促進代謝、改善血液循環作用；補陽還五湯是清代王清任治療氣虛血瘀中風之方，具有益氣活血祛瘀功效。故推而廣之，將兩方合用治療玻璃體積血。方中玄參清熱涼血、養陰生津，銀花清熱解毒、涼散風熱，黃芪益氣，當歸、桃仁、紅花、赤芍、地龍、川芎活血，茯苓、豬苓利水滲濕，三七化瘀止血，甘草清熱解毒，調和諸藥，全方共奏益氣活血、清熱養陰利水之功。

4.3 四妙勇安湯合補陽還五湯對玻璃體積血后玻璃體液中IL-6含量的影響 玻璃體是屈光系統重要組成部分，透明度要求極高，與視網膜關系密切，但本身代謝極低，出血不易吸收，對視力影響大，常導致增殖性視網膜病變(proliferative vitreotinopathy，PVR)的發生。PVR是眼內組織損傷后過度修復的反應，同時伴有復雜的免疫調節機制[3]，而損傷初期的炎癥是啟動細胞增生修復的先決條件。研究證實[4～5]，在PVR形成過程中有多種細胞因子參與，這些細胞因子對細胞移行、增殖、膠原合成以及PVR膜的形成起到重要作用，白介素-6(IL-6)是其中重要的炎性因子之一。IL-6是由單核巨噬細胞、淋巴細胞產生的炎性因子，巨噬細胞在清除積血的過程中，又可誘導眼內局部的炎癥反應，細胞的移行和增殖，誘導PVR的發生。

本實驗結果顯示，模型組IL-6的含量顯著增加，四妙勇安湯合補陽還五湯可顯著降低降低IL-6的含量，與模型組、對照組均有顯著差異，表明兩方合用可加速玻璃體積血的吸收，減少炎性因子的釋放，降低PVR 形成過程中IL-6的表達，從而防止PVR的發生，同時也為臨床應用四妙勇安湯合補陽還五湯治療玻璃體積血提供了依據。

[1]施新猷.醫用實驗動物學[M].西安：陜西科學技術出版社，1989：417.

[2]鮑相璈.驗方新編[M].天津：天津科學技術出版社，1991：234.

[3]石一寧，惠延年.增殖性玻璃體視網膜病變的免疫機制[J].國外醫學眼科分冊，1995，19：239.

[4]惠延年，石一寧，張新海，等.巨噬細胞誘發的實驗性增殖性玻璃體視網膜病變中的幾種早期炎性細胞因子[J].中華眼科雜志，1999，35：140～143.

[5]高平，惠延年，馬吉獻，等.視網膜前膜內相關炎性細胞因子的免疫組化研究[J].眼科新進展，2000，20(6)：390～392.