來福膠囊對小鼠藥物損傷的保護與修復(fù)

劉躍金， 高羽彤， 于春影

(沈陽化工大學化學工程學院，遼寧沈陽110142)

來福膠囊是發(fā)芽玉米水提物經(jīng)過濾、濃縮、干燥、粉碎等工藝，再加維生素C制成的膠囊，于2003年被批準為保健食品(批準文號:衛(wèi)食健字(2003)第0457號).它的主要功能是抗氧化，延緩衰老，免疫增強作用等，主要有效成分為超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶、維生素C等.據(jù)文獻報道［1－3］抗氧化物對藥物損傷有較強的保護與修復(fù)能力，本實驗擬對來福膠囊對小鼠化療藥物損傷的保護與修復(fù)作用進行研究.

1 實驗材料和方法

1.1 實驗材料

SPF級昆明種小鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，由中國醫(yī)科大學實驗動物中心提供，生產(chǎn)許可證號:SYXK(遼)2008－0005;來福膠囊，批號:2009/12/23，批準文號:衛(wèi)食健字(2003)第0457號，含量以SOD計:＞3 788 U/g，遼寧成大生物技術(shù)有限公司，普通冰箱4℃下避光、密封保存，實驗前去膠囊用生理鹽水配制各組相應(yīng)劑量的混懸液;環(huán)磷酰胺，0.2 g/支，白色粉末，批號:08071721，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，以生理鹽水配成相應(yīng)濃度;生理鹽水，批號: 07080604，沈陽志鷹制藥廠;SOD測定試劑盒，南京建成科技有限公司;還原性谷胱甘肽(GSH) (除蛋白)測定試劑盒，南京建成科技有限公司;丙二醛(MDA)測定試劑盒，南京建成科技有限公司.

1.2 實驗方法

小鼠隨機分4組，即高劑量組、中劑量組、低劑量組和對照組，每組10只，雌雄各半，觀察1 d;第2天，各組小鼠尾靜脈采血，檢驗血常規(guī).第3天，各組按相應(yīng)劑量(高劑量組:1.8 g/kg、中劑量組:1.2 g/kg、低劑量組:0.6 g/kg和對照組:生理鹽水)每日灌胃0.2 mL/只，連續(xù)45 d.給藥劑量按臨床有效劑量0.6 g/kg，人體質(zhì)量60 kg計.

給藥期間，每天上午觀察記錄小鼠的一般體癥、攝食量、飲水量等，每7 d稱體重一次并按體重隨時調(diào)整用藥量;給藥45 d后即第48天，停藥，各組小鼠尾靜脈采血，做血常規(guī)檢查.第48天各組小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺，劑量為20 mg/kg、隔日給藥1次，共5次，建化療損傷模型，劑量根據(jù)《醫(yī)學動物學實驗方法》.第57天尾靜脈采，做血常規(guī)檢查.第58天各組再按上述方法和劑量連續(xù)給藥45 d，每天上午觀察記錄小鼠的一般體癥、攝食量、飲水量及死亡情況等.停藥后第2天即第103天，處死小鼠，取血清、肝臟、脾臟和腎臟.

血常規(guī):按常規(guī)方法檢測;SOD測定:黃嘌呤氧化酶法(方法見SOD測定試劑盒);GSH測定:DTNB法(方法見GSH(除蛋白)測定試劑盒);MDA測定:硫代巴比妥酸法(方法見MDA測定試劑盒).統(tǒng)計方法:采用EXCEL數(shù)據(jù)庫錄用數(shù)據(jù)，SPSS11.5進行實驗數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計.

2 實驗結(jié)果

2.1 不同劑量來福膠囊對小鼠WBC、RBC、Hb及PLT的影響

化療損傷前后，灌服不同劑量來福膠囊，小鼠白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)和血小板(PLT)的變化如表1所示.

表1 灌服不同劑量來福膠囊對小鼠WBC、RBC、Hb及PLT的影響Table 1 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on WBC、RBC、Hb and PLT

WBC:化療前與起始相比，對照組升高不明顯，各劑量組降低不明顯;處死前與化療前相比，對照組升高明顯，中、低劑量組降低不明顯，高劑量組降低明顯;處死前與化療后相比，對照組及中、低劑量組升高明顯，高劑量組升高不明顯.RBC:化療前與起始相比，對照組和低劑量組降低明顯，高劑量組降低不明顯，中劑量組升高明顯;處死前與化療前相比，對照組降低不明顯，高、中劑量組降低明顯，低劑量組升高明顯;處死前與化療后相比，對照組和低劑量組升高明顯，中劑量組升高不明顯，高劑量組降低不明顯.Hb:化療前與起始相比，對照組及高、低劑量組降低明顯，中劑量組升高明顯;處死前與化療前相比，對照組降低不明顯，高、中劑量組降低明顯，低劑量組升高明顯;處死前與化療后相比，對照組及中、低劑量組升高明顯，高劑量組降低明顯.PLT:化療前與起始相比，對照組及高、低劑量組降低明顯，中劑量組升高明顯;處死前與化療前相比，對照組及高、中劑量組降低明顯，低劑量組升高明顯;處死前與化療后相比，對照組和低劑量組升高明顯，中劑量組降低不明顯，高劑量組降低明顯.

2.2 不同劑量來福膠囊對小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中SOD的影響

灌服不同劑量來福膠囊小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中SOD的變化，結(jié)果見表2.由表2可以看出:低劑量組與對照組比較，血清、肝臟和腎臟SOD明顯升高，脾臟升高不明顯;中、高劑量組與對照組比較，血清、肝臟SOD明顯降低，腎臟和脾臟升高明顯.

表2 灌服不同劑量來福膠囊對小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中SOD的影響Table 2 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on SOD in sera，livers，kidneys and spleens

2.3 不同劑量來福膠囊對小鼠肝臟、腎臟、脾臟中GSH的影響

灌服不同劑量來福膠囊小鼠肝臟、腎臟及脾臟中GSH的變化，結(jié)果見表3(表注同表2).由表3可以看出:中、低劑量組與對照組比較，肝臟GSH降低不明顯，腎臟升高明顯，脾臟變化不顯著;高劑量組與對照組比較，肝臟GSH降低不明顯，腎臟升高明顯，脾臟降低明顯.

表3 灌服不同劑量來福膠囊對小鼠肝臟、腎臟及脾臟中GSH的影響Table 3 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on GSH in livers，kidneys and spleens

2.4 不同劑量來福膠囊對小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中MDA的影響

灌服不同劑量來福膠囊小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中MDA的變化，結(jié)果見表4(表注同表2).由表4可以看出:低劑量組與對照組比較，血清MDA明顯降低，肝臟、腎臟和脾臟降低不明顯，但較其他劑量組值最低.中劑量組與對照組比較，血清MDA明顯降低，肝臟升高不明顯，腎臟降低不明顯，脾臟升高明顯.高劑量組與對照組比較，血清MDA降低不明顯，肝臟、腎臟和脾臟升高明顯.

表4 灌服不同劑量來福膠囊對血清、肝臟、腎臟及脾臟中MDA的影響Table 4 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on MDA in sera，livers，kidneys and spleens

3 結(jié)論與分析

由表1可知，來福膠囊與對照組比較沒有提升和恢復(fù)WBC的作用.而中劑量時有一定提升RBC、Hb和PLT的作用，中、低劑量時有一定恢復(fù)RBC的作用，低劑量時有一定恢復(fù)Hb和PLT的作用.提示中劑量的連續(xù)不間斷服用來福膠囊會在一定程度上提升骨髓造血功能，低劑量的連續(xù)不間斷服用來福膠囊會在一定程度上恢復(fù)受到抑制的骨髓造血功能，對機體有一定的保護和損傷后的修復(fù)作用.

1969年，McCord和Fridovich［4］首先揭示了SOD的生物學功能.SOD是活性氧清除反應(yīng)過程中第1個發(fā)揮作用的抗氧化酶，能將超氧物陰離子自由基(O－·2)快速歧化為過氧化氫(H2O2)和分子氧.H2O2在過氧化氫酶、各種過氧化物酶、抗壞血酸等的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)樗头肿友?SOD可清除氧自由基，防止氧自由基破壞細胞的蛋白質(zhì)、核酸等，保護細胞免受氧化損傷.此外，來福膠囊中可能還存在其他抗氧化成份［5－6］，值得進一步研究.

來福膠囊高、中劑量組對比對照組，血清中代表機體抗氧化狀態(tài)的SOD值皆降低，且高劑量時降低更多，說明來福膠囊的大部分SOD沒有被機體完全吸收，被吸收的是其他可被吸收的抗氧化物，機體對其他可被吸收的抗氧化物吸收增多，意味著對自身SOD的需求減少.肝臟的SOD值也遵循同樣的規(guī)律，但腎臟和脾臟SOD值不同，可能來自其他原因.提示對口服來福膠囊抗氧化作用非SOD成分也是重要的.低劑量組中血清、肝臟、腎臟和脾臟的SOD值皆高于對照組，這也提示低劑量來福膠囊對機體具有一定的保護或修復(fù)損傷的作用.

來福膠囊中、低劑量組與對照組比較，肝臟、腎臟和脾臟中的GSH值降低不明顯或升高顯著，GSH的消耗較少，可能是抗氧化物吸收增多所致，說明中、低劑量的來福膠囊對機體的抗氧化狀態(tài)有保護或恢復(fù)作用.而高劑量組有升有降，保護或恢復(fù)作用難判斷.

來福膠囊低劑量組中所列MDA值最低或接近最低，中劑量組MDA次之，高劑量組MDA最高.說明低劑量時所產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物最少，口服低劑量來福膠囊能增強或恢復(fù)機體的抗氧化作用，而高劑量起到相反的效果.綜上所述，連續(xù)口服低劑量來福膠囊會一定程度上增強機體的抗氧化作用，對化療藥引起的損傷有一定修復(fù)作用.

［1］ 張艷紅，寥曉全，袁勤生.人錳超氧化物歧化酶(hMn-SOD)的研究進展［J］.藥物生物技術(shù)，2001，8(6):352－356.

［2］ 成元華，代大英，肖開棋，等.抗氧化中藥對慢性氟中毒大鼠腎臟SOD活性、MDA含量及超微結(jié)構(gòu)的影響［J］.貴州醫(yī)藥，1998，22(2):94－97.

［3］ 鄭光海，樸惠順.朝天委陵菜乙醇提取物對CCl4致小鼠肝損傷的保護作用［J］.華西藥學雜志，2010，25(3):311－312.

［4］ McCord J M，F(xiàn)ridovich I.Superoxide Dismutase:An Enzymic Function for Erythrocuprein(Hemocuprein)［J］.J.Biol.Chem.，1969，244:6049－6055.

［5］ 謝詳，楊吉霞.幾種粗糧抗氧化活性物質(zhì)的研究進展［J］.糧食與飼料工業(yè)，2009(11):13－15.

［6］ Chethan S，Dharmesh Shylaja M，Malleshi Nagappa G.Inhibition of Aldose Reductase from Cataracted Eye Lenses by Finger Millet(Eleusine Coracana) Polyphenols［J］.Bioorganic＆Medicinal Chemistry，2008，16:10085－10090.