來福膠囊對小鼠藥物損傷的保護與修復

劉躍金， 高羽彤， 于春影

(沈陽化工大學化學工程學院，遼寧沈陽110142)

來福膠囊是發芽玉米水提物經過濾、濃縮、干燥、粉碎等工藝，再加維生素C制成的膠囊，于2003年被批準為保健食品(批準文號:衛食健字(2003)第0457號).它的主要功能是抗氧化，延緩衰老，免疫增強作用等，主要有效成分為超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶、維生素C等.據文獻報道［1－3］抗氧化物對藥物損傷有較強的保護與修復能力，本實驗擬對來福膠囊對小鼠化療藥物損傷的保護與修復作用進行研究.

1 實驗材料和方法

1.1 實驗材料

SPF級昆明種小鼠，體重(20±2)g，雌雄各半，由中國醫科大學實驗動物中心提供，生產許可證號:SYXK(遼)2008－0005;來福膠囊，批號:2009/12/23，批準文號:衛食健字(2003)第0457號，含量以SOD計:＞3 788 U/g，遼寧成大生物技術有限公司，普通冰箱4℃下避光、密封保存，實驗前去膠囊用生理鹽水配制各組相應劑量的混懸液;環磷酰胺，0.2 g/支，白色粉末，批號:08071721，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司，以生理鹽水配成相應濃度;生理鹽水，批號: 07080604，沈陽志鷹制藥廠;SOD測定試劑盒，南京建成科技有限公司;還原性谷胱甘肽(GSH) (除蛋白)測定試劑盒，南京建成科技有限公司;丙二醛(MDA)測定試劑盒，南京建成科技有限公司.

1.2 實驗方法

小鼠隨機分4組，即高劑量組、中劑量組、低劑量組和對照組，每組10只，雌雄各半，觀察1 d;第2天，各組小鼠尾靜脈采血，檢驗血常規.第3天，各組按相應劑量(高劑量組:1.8 g/kg、中劑量組:1.2 g/kg、低劑量組:0.6 g/kg和對照組:生理鹽水)每日灌胃0.2 mL/只，連續45 d.給藥劑量按臨床有效劑量0.6 g/kg，人體質量60 kg計.

給藥期間，每天上午觀察記錄小鼠的一般體癥、攝食量、飲水量等，每7 d稱體重一次并按體重隨時調整用藥量;給藥45 d后即第48天，停藥，各組小鼠尾靜脈采血，做血常規檢查.第48天各組小鼠腹腔注射環磷酰胺，劑量為20 mg/kg、隔日給藥1次，共5次，建化療損傷模型，劑量根據《醫學動物學實驗方法》.第57天尾靜脈采，做血常規檢查.第58天各組再按上述方法和劑量連續給藥45 d，每天上午觀察記錄小鼠的一般體癥、攝食量、飲水量及死亡情況等.停藥后第2天即第103天，處死小鼠，取血清、肝臟、脾臟和腎臟.

血常規:按常規方法檢測;SOD測定:黃嘌呤氧化酶法(方法見SOD測定試劑盒);GSH測定:DTNB法(方法見GSH(除蛋白)測定試劑盒);MDA測定:硫代巴比妥酸法(方法見MDA測定試劑盒).統計方法:采用EXCEL數據庫錄用數據，SPSS11.5進行實驗數據處理及統計.

2 實驗結果

2.1 不同劑量來福膠囊對小鼠WBC、RBC、Hb及PLT的影響

化療損傷前后，灌服不同劑量來福膠囊，小鼠白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)和血小板(PLT)的變化如表1所示.

表1 灌服不同劑量來福膠囊對小鼠WBC、RBC、Hb及PLT的影響Table 1 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on WBC、RBC、Hb and PLT

WBC:化療前與起始相比，對照組升高不明顯，各劑量組降低不明顯;處死前與化療前相比，對照組升高明顯，中、低劑量組降低不明顯，高劑量組降低明顯;處死前與化療后相比，對照組及中、低劑量組升高明顯，高劑量組升高不明顯.RBC:化療前與起始相比，對照組和低劑量組降低明顯，高劑量組降低不明顯，中劑量組升高明顯;處死前與化療前相比，對照組降低不明顯，高、中劑量組降低明顯，低劑量組升高明顯;處死前與化療后相比，對照組和低劑量組升高明顯，中劑量組升高不明顯，高劑量組降低不明顯.Hb:化療前與起始相比，對照組及高、低劑量組降低明顯，中劑量組升高明顯;處死前與化療前相比，對照組降低不明顯，高、中劑量組降低明顯，低劑量組升高明顯;處死前與化療后相比，對照組及中、低劑量組升高明顯，高劑量組降低明顯.PLT:化療前與起始相比，對照組及高、低劑量組降低明顯，中劑量組升高明顯;處死前與化療前相比，對照組及高、中劑量組降低明顯，低劑量組升高明顯;處死前與化療后相比，對照組和低劑量組升高明顯，中劑量組降低不明顯，高劑量組降低明顯.

2.2 不同劑量來福膠囊對小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中SOD的影響

灌服不同劑量來福膠囊小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中SOD的變化，結果見表2.由表2可以看出:低劑量組與對照組比較，血清、肝臟和腎臟SOD明顯升高，脾臟升高不明顯;中、高劑量組與對照組比較，血清、肝臟SOD明顯降低，腎臟和脾臟升高明顯.

表2 灌服不同劑量來福膠囊對小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中SOD的影響Table 2 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on SOD in sera，livers，kidneys and spleens

2.3 不同劑量來福膠囊對小鼠肝臟、腎臟、脾臟中GSH的影響

灌服不同劑量來福膠囊小鼠肝臟、腎臟及脾臟中GSH的變化，結果見表3(表注同表2).由表3可以看出:中、低劑量組與對照組比較，肝臟GSH降低不明顯，腎臟升高明顯，脾臟變化不顯著;高劑量組與對照組比較，肝臟GSH降低不明顯，腎臟升高明顯，脾臟降低明顯.

表3 灌服不同劑量來福膠囊對小鼠肝臟、腎臟及脾臟中GSH的影響Table 3 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on GSH in livers，kidneys and spleens

2.4 不同劑量來福膠囊對小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中MDA的影響

灌服不同劑量來福膠囊小鼠血清、肝臟、腎臟及脾臟中MDA的變化，結果見表4(表注同表2).由表4可以看出:低劑量組與對照組比較，血清MDA明顯降低，肝臟、腎臟和脾臟降低不明顯，但較其他劑量組值最低.中劑量組與對照組比較，血清MDA明顯降低，肝臟升高不明顯，腎臟降低不明顯，脾臟升高明顯.高劑量組與對照組比較，血清MDA降低不明顯，肝臟、腎臟和脾臟升高明顯.

表4 灌服不同劑量來福膠囊對血清、肝臟、腎臟及脾臟中MDA的影響Table 4 Effects of different dosage(p.o.)of Life Capsule on MDA in sera，livers，kidneys and spleens

3 結論與分析

由表1可知，來福膠囊與對照組比較沒有提升和恢復WBC的作用.而中劑量時有一定提升RBC、Hb和PLT的作用，中、低劑量時有一定恢復RBC的作用，低劑量時有一定恢復Hb和PLT的作用.提示中劑量的連續不間斷服用來福膠囊會在一定程度上提升骨髓造血功能，低劑量的連續不間斷服用來福膠囊會在一定程度上恢復受到抑制的骨髓造血功能，對機體有一定的保護和損傷后的修復作用.

1969年，McCord和Fridovich［4］首先揭示了SOD的生物學功能.SOD是活性氧清除反應過程中第1個發揮作用的抗氧化酶，能將超氧物陰離子自由基(O－·2)快速歧化為過氧化氫(H2O2)和分子氧.H2O2在過氧化氫酶、各種過氧化物酶、抗壞血酸等的作用下轉變為水和分子氧.SOD可清除氧自由基，防止氧自由基破壞細胞的蛋白質、核酸等，保護細胞免受氧化損傷.此外，來福膠囊中可能還存在其他抗氧化成份［5－6］，值得進一步研究.

來福膠囊高、中劑量組對比對照組，血清中代表機體抗氧化狀態的SOD值皆降低，且高劑量時降低更多，說明來福膠囊的大部分SOD沒有被機體完全吸收，被吸收的是其他可被吸收的抗氧化物，機體對其他可被吸收的抗氧化物吸收增多，意味著對自身SOD的需求減少.肝臟的SOD值也遵循同樣的規律，但腎臟和脾臟SOD值不同，可能來自其他原因.提示對口服來福膠囊抗氧化作用非SOD成分也是重要的.低劑量組中血清、肝臟、腎臟和脾臟的SOD值皆高于對照組，這也提示低劑量來福膠囊對機體具有一定的保護或修復損傷的作用.

來福膠囊中、低劑量組與對照組比較，肝臟、腎臟和脾臟中的GSH值降低不明顯或升高顯著，GSH的消耗較少，可能是抗氧化物吸收增多所致，說明中、低劑量的來福膠囊對機體的抗氧化狀態有保護或恢復作用.而高劑量組有升有降，保護或恢復作用難判斷.

來福膠囊低劑量組中所列MDA值最低或接近最低，中劑量組MDA次之，高劑量組MDA最高.說明低劑量時所產生的脂質過氧化產物最少，口服低劑量來福膠囊能增強或恢復機體的抗氧化作用，而高劑量起到相反的效果.綜上所述，連續口服低劑量來福膠囊會一定程度上增強機體的抗氧化作用，對化療藥引起的損傷有一定修復作用.

［1］ 張艷紅，寥曉全，袁勤生.人錳超氧化物歧化酶(hMn-SOD)的研究進展［J］.藥物生物技術，2001，8(6):352－356.

［2］ 成元華，代大英，肖開棋，等.抗氧化中藥對慢性氟中毒大鼠腎臟SOD活性、MDA含量及超微結構的影響［J］.貴州醫藥，1998，22(2):94－97.

［3］ 鄭光海，樸惠順.朝天委陵菜乙醇提取物對CCl4致小鼠肝損傷的保護作用［J］.華西藥學雜志，2010，25(3):311－312.

［4］ McCord J M，Fridovich I.Superoxide Dismutase:An Enzymic Function for Erythrocuprein(Hemocuprein)［J］.J.Biol.Chem.，1969，244:6049－6055.

［5］ 謝詳，楊吉霞.幾種粗糧抗氧化活性物質的研究進展［J］.糧食與飼料工業，2009(11):13－15.

［6］ Chethan S，Dharmesh Shylaja M，Malleshi Nagappa G.Inhibition of Aldose Reductase from Cataracted Eye Lenses by Finger Millet(Eleusine Coracana) Polyphenols［J］.Bioorganic＆Medicinal Chemistry，2008，16:10085－10090.