燈盞生脈滴丸的制備工藝研究

趙惠茹，馮素香，靖會

(1.西安醫學院藥學院，陜西西安710021;2.河南中醫學院藥學院，河南鄭州450008)

燈盞生脈膠囊由燈盞細辛、人參、五味子、麥冬組成，具有益氣養陰、活血健腦之功效，臨床上用于氣陰兩虛，瘀阻腦絡引起的胸痹心痛、中風后遺癥［1-3］。其有效化學成分為燈盞乙素、芹菜素、高黃芹菜素等黃酮類化合物及二咖啡酰奎寧酸等［4-6］。因該復方制劑中有部分難溶性組分不利于藥物的吸收利用，為達到提高藥物的生物利用度，增加藥物的穩定性，確保藥物的質量和療效的目的，故將其制成滴丸劑。本實驗對燈盞生脈滴丸制備工藝進行了研究，并以燈盞生脈膠囊劑作對照考察了其體外溶出度。

1 試藥與儀器

燈盞細辛、人參、五味子、麥冬購自西安市藥材公司;聚乙二醇-4000(河北省邢臺科王助劑有限公司);聚乙二醇-6000(上海光明化工廠);液體石蠟(廣州市德隆化工貿易有限公司);DY-201-100硅油、DY-201-200硅油、DY-201-300硅油(山東大易化工有限公司);野黃芩苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號110842-200705);甲醇、四氫呋喃為色譜純，其余試劑均為分析純;燈盞生脈膠囊(云南生物谷燈盞花藥業有限公司規格:0.18g/粒);高效液相色譜儀(LC—10ATvp泵，SPD—M10Avp二極管陣列檢測器，日本島津公司);DWJ—2000型滴丸機(山東煙臺康達爾藥業有限公司);ZLPG—25型噴霧干燥機(常州市遠宇干燥設備有限公司);ZRS—8G智能溶出儀(天津大學天發科技有限公司)。

2 滴丸制備的方法與結果

2.1 藥材的提取以上四味藥材，粉碎成粗粉，加75%乙醇回流提取3次，第1次、第2次加10倍量，各提取2 h，第3次加8倍量，提取1 h，合并提取液，減壓濃縮至約20 mL，用正丁醇提取3次，每次15 mL，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至無正丁醇味，加水10 mL，加熱溶解，再加稀氫氧化鈉調節pH值至7，濾過，濾液噴霧干燥，分別稱定質量，計算藥粉收率為(3.06±0.31)%，HPLC法測定其燈盞乙素的質量分數為(10.86±0.29)%。

2.2 滴丸制備工藝稱取基質適量，置燒杯中水浴加熱溶融，加入噴霧干燥所得藥粉(過100目篩)，混勻，保溫滴制，滴入冷卻劑中滴制成丸，用濾紙吸除其表面的冷卻劑，即得。

2.3 基質的選擇滴丸常選用水溶性基質以發揮速效作用。聚乙二醇類基質可用于釋放水溶性或油溶性藥物，同時能容納部分液體藥物，是比較理想的水溶性基質［7］。本實驗以聚乙二醇4000和聚乙二醇6000為備選基質，按上述工藝制備滴丸，用10分制對包括滴丸成型性、外形、圓整度、硬度和光澤度在內的外觀質量評分，以確定比較理想的基質及其用量。結果見表1。

表1 不同基質對滴丸外觀質量的影響

從表1可以看出:單獨用聚乙二醇4000或聚乙二醇6000為基質時，滴丸的外觀質量均不佳，而選用聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000(2∶3)作為滴丸的基質較好。

2.4 冷卻劑的選擇冷卻劑是滴丸劑的重要助劑，其密度和黏度直接影響著藥液的沉降速度和滴丸的圓整度，本實驗以聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000(2∶3)作為滴丸的基質，以液體石蠟和二甲基硅油為備選冷卻劑，按上述工藝制備滴丸，結果可見用液體石蠟、二甲基硅油DY-201-200和DY-201-300作冷卻劑，沉降速度及圓整性均不理想;而在二甲基硅油DY-201-100中下沉速度適中且成型圓整，故選其為冷卻劑。

2.5 藥物與基質配比的選擇本實驗在制作滴丸的配方設計時，按藥物與基質的配比分別為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4進行了研究。選擇聚乙二醇4000∶聚乙二醇6000(2∶3)為基質，二甲基硅油DY-201-100為冷卻劑，以丸重變異系數、溶散時限和用10分制對包括滴丸成型性、外形、圓整度、硬度和光澤度在內的外觀質量評分，以確定比較理想的藥物與基質的比例。結果見表2。

表2 藥物與基質配比對滴丸成型的影響

由試驗結果可知，當基質的比例愈大時，滴丸的成型率愈高，滴制愈容易，丸劑的外觀質量愈好，丸重的變異系數愈小，相對溶散時限愈短。當藥物與基質的比例小于1∶2時，滴丸劑的成型性不佳，外觀質量也不符合滴丸劑的規定。因此，為了保證滴丸劑的質量，同時保證藥物的療效，選擇藥物與基質的比例為1∶3。

2.6 滴頭口徑大小的選擇分別考察滴頭口徑(內-外徑)為3.0～3.5 mm、3.5～4.5 mm、4.0～5.5 mm時滴丸的成型情況。結果表明，當滴口壁較厚時，有些液滴需要充滿整個滴口外壁后才能下滴，而有些液滴則直接沿著滴口內徑往下滴，故滴丸大小不均勻，丸重差異較大;當滴口壁較薄時，丸重差異愈小且圓整度好。故選擇滴頭口徑(內-外徑)為3.0～3.5 mm。

2.7 滴丸成型工藝的選擇在前述單因素篩選出基質的種類及配比、冷卻劑的種類、載藥量、滴頭口徑大小等試驗的基礎上，選出對滴丸成型影響最大的4個因素即藥液溫度(A)、冷卻劑溫度(B)、滴速(C)及滴距(D)為考察因素，以丸重變異系數、溶散時限及用10分制對包括滴丸成型性、外形、圓整度、硬度和光澤度在內的外觀質量作為考察指標，采用L9(34)正交表進行試驗。根據各指標對制備工藝影響的重要程度，分別給予相應的權重，進行綜合評分來確定最佳制備工藝。綜合評分=丸重變異系數評分×0.3+溶散時限評分×0.3+外觀質量評分×0.4。正交設計及結果見表3、表4、表5。

表3 因素水平

表4 L9(34)正交試驗設計及結果

表5 方差分析

由表4、表5可知，影響滴丸成型的主次因素為B＞A＞C＞D，因素B、A、C即冷卻劑的溫度、藥液溫度和滴速對試驗結果均有顯著性影響。根據正交試驗結果，選取顯著因素的最好水平，得到最佳滴制條件為A2B2C1D3，即:藥液的溫度為85℃保溫滴制，冷卻劑的溫度為5～10℃，滴速為35滴/min，滴口距冷卻液面6 cm。

2.8 驗證試驗因為A2B2C1D3不是正交試驗設計表中的組合，因此按照最佳滴制工藝條件重復制備3批滴丸樣品，對樣品丸重變異系數、溶散時限及外觀質量進行檢查，結果見表6。

表6 燈盞生脈滴丸驗證試驗結果

驗證試驗結果表明，用正交試驗優選燈盞生脈滴丸制備工藝穩定可行。

3 體外溶出度試驗

3.1 色譜條件Hypersil-C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，檢測波長335 nm，流動相甲醇-四氫呋喃-0.2%磷酸水(15∶15∶70)，體積流量1.0 mL/min，柱溫為室溫。

3.2 標準曲線的制備精密稱取野黃芩苷對照品適量，加甲醇溶解并稀釋至每1 mL含野黃芩苷0.064 mg的對照品溶液。分別精密吸取此對照品溶液1、5、10、15、20 mL置25 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。按照3.1項下色譜條件進行測定，記錄峰面積。以野黃芩苷對照品進樣量X為橫坐標，峰面積Y為縱坐標進行線性回歸，得標準曲線方程為:Y=3.62×106X+2.14×104，r=0.999 7，結果表明野黃芩苷在7.00～160.0 μg/mL范圍內進樣量與峰面積呈良好線性關系。

3.3 回收率采用標準添加法，用3個不同質量濃度測定回收率，加入量為規定量的80%、100%、120%，平均回收率為94.78%(n=9)，RSD為0.94%。

3.4 精密度制備含野黃芩苷高、中、低3種質量濃度的溶液，每個質量濃度測定5次，記錄峰面積，結果表明，3種質量濃度的RSD均小于0.83%(n=5)。

3.5 體外溶出度測定按照《中國藥典》2010年版規定釋放度測定法中的測定法(漿法)［8］，分別取實驗室自制燈盞生脈滴丸3批和燈盞生脈膠囊，以0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液900 mL作為溶出介質，維持溫度37℃，轉速100 r/min，分別于5、8、10、15、20、30、45、60 min取樣5 mL(同時補加預溫好的同體積的空白介質)，經0.45 μm的微孔濾膜過濾后，取續濾液2 mL，在3.1項色譜條件下進樣，記錄峰面積，按標準曲線求得質量濃度。計算溶出度。結果見圖1。

圖1 燈盞生脈滴丸與膠囊的溶出度曲線

由圖1可見:與燈盞生脈膠囊比較，滴丸體外溶出度有所增加，30 min內滴丸累積釋放量達到91.07%，而燈盞生脈膠囊累積釋放量為80.23%。

4 討論

4.1 PEG4000和PEG6000均是常用的滴丸劑基質，在試驗中發現單用PEG6000與藥粉混合后黏稠度較大，滴制困難，易拖尾。而單用PEG4000滴丸硬度又不夠，而采用PEG4000∶PEG6000(2∶3)為混合基質，藥液黏度適中，可以順利滴制成丸，且外觀質量評分最高。

4.2 試驗中選用的冷卻劑二甲基硅油的表面張力比較小［7］，由試驗結果可見:其種類、密度、黏度會影響滴丸的沉降速度和圓整度。二甲基硅油的密度、黏度越大，滴丸沉降越慢，滴丸易變成扁圓形。由于二甲基硅油DY-201-100黏度適中，滴丸下沉速度合適且成型圓整，因此適合于燈盞生脈滴丸的制備。

4.3 滴丸的成型和質量受各種因素的影響，因此在用正交試驗法優選制備工藝時，難于用一個指標來衡量。本研究采用丸重變異系數、溶散時限及外觀質量作為評價工藝優劣的指標，結果更合理可靠。

［1］毛德軍，宮相聰，唐詠春，等.燈盞生脈膠囊干預急性進展性腦梗死的前瞻性研究［J］.中國新藥雜志，2010，19(11):959-962.

［2］程曉昱，葛嵐，張秀環.燈盞生脈膠囊對冠心病患者血脂水平的影響［J］.廣東醫學，2010，31(15):2030-2031.

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［5］孫漢董，趙勤實.防治心腦血管疾病的藥物—燈盞細辛酚的研究與開發［J］.化學進展，2009，21(1):77-83.

［6］李莉，蘇華，張玉紅.燈盞生脈軟膠囊質量標準研究［J］.中國新藥與臨床雜志，2010，29(3):213-216.

［7］曾德惠.滴丸劑的生產與理論［M］.北京:中國醫藥科技出版社，1994:102.

［8］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版二部［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄73-74.