知母藥理作用的文獻再評價

趙子劍， 胡曉娟， 張恩戶， 陳迪釗

(1．懷化學院化學系，湖南懷化418008;2．民族藥用植物資源研究與利用湖南省重點實驗室，湖南懷化418008;3．陜西中醫學院藥理教研室，陜西咸陽712046)

知母Anemarrhena asphodeloides Bge．含有知母皂苷A1、A2、A3、A4、B1、B2，膽堿及大量的黏液質、煙酸等。味苦，性寒，功效清熱瀉火、滋陰潤燥，主治熱病高燒，口渴煩躁、肺熱咳嗽、結核病發熱、糖尿病、大便干燥等［1］。文獻報道其具抗病原微生物、解熱、抗炎、治療糖尿病、延緩衰老、改善癡呆、抗癲癇、抗甲亢的藥理作用。本研究依據中藥藥理學和現代藥理學的實驗方法和觀察指標，對知母藥效學文獻進行了再評價，以判定其確切的藥理作用。

1 資料

資料收集范圍為中國學術會議論文全文數據庫 (1983年1月—2011年5月)，中國學術會議論文文摘數據庫(1984年1月—2011年5月)，中國學術期刊全文數據庫(1994年1月—2011年5月)，中國學位論文全文數據庫(1999年1月—2011年5月)，中國學位論文文摘數據庫(1984年1月—2011年5月)，中文科技期刊數據庫 (1989年1月—2011年5月)，中國專利數據庫 (1990年1月—2011年5月)等數據庫為主，其他如中國學術會議在線(2005年1月—2011年5月)，中國科技論文在線 (2003年1月—2011年5月)，www.baidu.com，www.google.com等為輔［2］，以知母為檢索詞檢索、查閱知母藥理作用的研究文獻。

2 方法與結果

2.1 與知母功效、應用有關的藥理學評價方法

2.1.1 抗菌 常用抗菌活性的藥效學實驗方法有:①體外實驗，如體外抗菌實驗、體外最小殺菌濃度試驗等。②體內實驗，如腹腔感染模型、呼吸系統感染模型等。

2.1.2 抗病毒 常用的抗病毒的實驗方法有:①細胞病變法;②染色法;③病毒繁殖量的測定法;④pH轉變法等。

2.1.3 抗炎 常用的抗炎實驗方法包括體內和體外二大類:體外抗炎實驗方法有:①3H-緩激肽受體結合試驗。②3H-P物質結合實驗。③體外多型核白細胞趨化實驗等。體內抗炎實驗方法有:①急性炎癥，如紫外照射豚鼠引起紅斑實驗等。②亞急性和慢性炎癥，如血管滲透實驗、大鼠足腫脹實驗等。③過敏性炎癥，如遲發型超敏反應實驗等。

2.1.4 治療糖尿病 常用的治療糖尿作用的評價方法有:①糖尿病及并發癥動物模型，如類似Ⅰ、Ⅱ型糖尿病的動物模型。②離體實驗，如糖代謝、胰島細胞培養等。③生化測定和病理檢查，如血糖血脂測定、糖基化蛋白測定等。

2.1.5 延緩衰老 目前常用的延緩衰老的實驗方法有血清總抗氧化活性測定、過氧化脂測定、單胺氧化酶活性測定、全血膽堿酯酶活性測定等。

2.1.6 改善癡呆 現在常用的實驗模型有兩種:①AD模型;②動物模型。

2.1.7 抗癲癇 目前常用的抗癲癇實驗方法有:①體外實驗法，如GABAA、GABAB受體結合試驗、甘氨酸與大鼠大腦皮層結合試驗等10余種;②體內實驗法，如小鼠電休克、小鼠士的寧驚厥法等等。

2.1.8 抗甲亢 目前常用的抗甲亢實驗方法有①抑制大鼠甲狀腺吸收碘實驗;②T4CPBA測定法;③小時耗氧量測定法等等。

2.1.9 臨床試驗評價 臨床試驗的評價方法以國家食品藥品監督管理局令第3號《藥物臨床試驗質量管理規范》中臨床試驗評價的相關內容為標準。

2.2 知母藥效學文獻的再評價方法

2.2.1 文獻整理 制作知母藥效學文獻再評價匯總表，內容包括藥效評價方法、各主要藥理作用的研究文獻數、供試藥制備方法、給藥途徑與劑量、動物品系、與陰、陽性對照藥比較結果、實驗結論、發表年代、刊物與作者及作者單位等信息。閱讀文獻摘要，摘錄藥效學信息填入表格，分析并納入文獻。文獻納入標準為:以知母單味藥和知母為君藥的復方實驗和臨床研究依據隨機、盲法、對照設計的文獻為有效文獻納入研究，其它為無效文獻排除。

2.2.2 知母文獻質量的評價方法 以文獻發表刊物、實驗設計和臨床研究是否依據隨機、對照、盲法及他引率等為標準來評價文獻質量。

2.2.3 知母藥理作用的評定標準 評價藥物藥效的實驗方法較多，如評價抗炎作用的常用體外實驗方法就有3H-緩激肽受體結合試驗、3H-P物質結合實驗、體外誘導人白細胞釋放細胞因子實驗等等，某一實驗方法只能反映藥理作用的某一方面。中藥成分復雜，對機體所起的作用常常是多途徑的，所以中藥藥理作用的評價應與其對機體所起的作用相符，符合重復性和綜合評價原則［3］。依據此原則，確定知母具有某一藥理作用的評定標準為:藥理作用采用3種或3種以上 (藥理實驗方法不足3種的以實際數計)不同實驗方法，由不同實驗者進行2次以上 (含2次)的重復性實驗，且實驗結論均為有效［4-5］。實驗方法主要參照《藥理學實驗指南—新藥發現和藥理學評價》和《現代藥理實驗方法》;臨床試驗的評定標準為:臨床有效率大于等于陽性對照藥或臨床總有效率在75%以上［6］。

2.3 結果

以知母為檢索詞共檢出文獻1 902篇，其中中國學術期刊全文數據庫1 746篇，中國學位論文全文數據庫73篇，中國學術會議論文全文數據庫83篇，利用二次檢索除去與藥效學無關的文獻1 678篇，得到與藥效學有關文獻224篇，占檢索總文獻數的11.77%。研讀摘要去除主題非藥理作用文獻和知母非君藥文獻及不符合2.2.3項評定標準的文獻，得到與藥理有關有效文獻94篇，占藥效學文獻數的41.96%。在有效的94篇文獻中，有他人引用的文獻有39篇，占有效文獻數的41.48%;核心期刊論文32篇，占有效文獻數的34.04%;碩士論文11篇，占有效文獻數的11.70%;博士論文4篇，占有效文獻數的4.25%。

3 討論

從藥效文獻 (表1)分析，知母的藥效學研究涉及治療糖尿病、抗炎、抗病毒、延緩衰老和改善老年癡呆、抗心血管疾病、抗癲癇、抗甲亢、抗腦缺血等。其中與知母治療糖尿病有關的實驗文獻數有27篇，3種體內治療糖尿病實驗的文獻數分別為6、6、5篇［7-15］，另有8篇是用知母或知母和其他藥物聯合應用治療胰島細胞缺乏的糖尿病，文獻發表年份從1991年至今，發表刊物分布于中西醫結合雜志等10余種刊物，發表單位有中國藥科大學、中國醫科大學、北京聯合大學、山東大學等十余個單位，各實驗結論效果均顯著。說明知母治療糖尿病的作用明確。知母延緩衰老實驗中全血膽堿酯酶活性測定有10篇，其他5種實驗方法分別有2、2、1、1和1篇，其他療效顯著的文獻6篇［16-24］，改 善 癡 呆 的 文 獻 15 篇［25-29］， 其 中 Aβ25-35、CHOm2細胞株等AD模型重復了14次，各實驗結論效果均顯著。文獻來自不同的年份、不同的刊物及不同的作者單位，說明知母此藥理作用在不同的實驗單位、不同的實驗者及不同的年份重復性好，表明知母改善癡呆和衰老作用明確。知母抗病毒研究文獻有9篇［30-34］，各實驗方法的重復數為2、3、2、2，文獻使用單純胞疹病毒4次，乙肝病毒2次，甲型流感病毒3次，表明知母抗病毒作用明確。知母抗癲癇作用的研究文獻有16篇［35-37］，PTZ模型實驗方法由不同的實驗者、不同的實驗中心在不同的年份重復了16次。表明知母抗癲癇作用尤其是抗PTZ模型的癲癇病作用明確。抗炎有關文獻有60篇，大鼠佐劑型方法重復了9次，大鼠棉球肉芽腫等實驗方法各有1次，還有48篇文獻是關于臨床上用知母或含知母制劑與它藥合用治療炎性疾病的［38-45］，大鼠佐劑型炎癥及其他實驗方法所得結果均為抗炎效果與陰性組相比有極顯著效果，但其他抗炎實驗方法沒有重復，故依2.2.3項評定標準評定其抗炎作用較明確。抗甲亢作用的研究文獻5篇［46］，全部為甲高模型，作者單位多來自上海第二醫科大學或其關聯單位，故依2.2.3項評定標準評定知母抗甲亢作用較明確。抗菌作用的研究文獻有5篇，有2篇采用試管稀釋法模型這一實驗方法，1篇為擴散法，1篇為臨床觀察，1篇為其他方法，故依2.2.3項評定標準評定知母抗菌作用實驗依據不足。有少量文獻介紹了知母一些其他藥理作用［47-51］，如抗心血管疾病、抗腦缺血等，但依2.2.3項評定標準評定，知母其他藥理實驗依據均不足。

表1 知母藥理作用研究文獻一覽

藥效文獻中對知母延緩衰老作用的研究，實驗者大多采用了幾種實驗方法;但有些藥理作用如抗菌作用等的研究，有很多文獻實驗者僅采用了一兩種實驗方法就下結論，實驗方法不全面，缺乏重復實驗和藥理作用機制研究。

知母藥理作用據本科教材［52-53］主要有:抗菌、解熱、降血糖、抗腫瘤等;但按藥物藥理作用的評定原則和標準，參照《現代藥理實驗方法》和《藥理學實驗指南—新藥發現和藥理學評價》對知母藥理作用進行文獻再評價的結果表明知母治療糖尿病、抗病毒、延緩衰老、抗炎、改善癡呆、抗癲癇、抗甲亢的藥理作用明確，抗菌、解熱、抗腦缺血、抗腫瘤等藥理作用實驗依據不足。

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