常見革蘭陰性菌耐藥性連續5年動態變化研究

李紅霞，陳慧玉，蔣文強，羅 軍，李 芬

（四川省綿陽市中心醫院檢驗科 621000）

常見革蘭陰性菌耐藥性連續5年動態變化研究

李紅霞，陳慧玉，蔣文強，羅 軍△，李 芬

（四川省綿陽市中心醫院檢驗科 621000）

目的分析該地區最常見革蘭陰性菌耐藥性的變化，為指導臨床合理使用抗菌藥物提供可靠依據。方法采用回顧性調查分析方法對該院從臨床標本中分離出的最常見革蘭陰性菌的藥敏試驗結果進行分析。結果最常見的革蘭陰性菌為:大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌等。4種細菌對常用抗菌藥物的耐藥率呈上升趨勢。結論該地區常見革蘭陰性菌對常用抗菌藥物耐藥率高，多重耐藥現象嚴重，值得關注。

革蘭陰性菌；大腸埃希菌；肺炎克雷伯菌；銅綠假單胞菌；鮑曼不動桿菌；抗菌藥；藥物耐受性

革蘭陰性菌是引起醫院感染的主要病原菌。近年來，隨著廣譜抗菌藥物的廣泛應用，多重耐藥菌株的檢出率明顯增高，抗菌藥物的耐藥性地區差異較大。本研究對本院近5年來分離的最常見革蘭陰性菌的耐藥性進行回顧性的動態變化分析，為指導臨床合理使用抗菌藥物提供可靠依據。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2006年1月至2010年12月，本院臨床標本中分離的革蘭陰性菌13 035株，全部按照《全國臨床檢驗操作規程》進行細菌分離鑒定和抗菌藥物敏感性試驗。質控菌株:大腸埃希菌ATCC 25922，銅綠假單胞菌ATCC 27853，購自衛生部臨檢中心。

1.2 儀器與試劑 采用Dade Behring公司 MicroScan Walk－AWay－40微生物鑒定藥敏分析儀，法國生物梅里埃公司Vitek－2compact 60微生物鑒定藥敏分析儀。Dade Behring公司配套產品陰性桿菌藥敏復合板NC31，法國生物梅里埃公司陰性桿菌鑒定藥敏板GN、GN13。

1.3 方法 細菌鑒定:嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》進行培養、分離、鑒定［1］，采用微生物鑒定藥敏分析儀鑒定到種。個別細菌輔以手工鑒定方法。藥敏試驗:采用微生物鑒定藥敏分析儀得出MIC，結果按照美國臨床實驗室標準化委員會（CLSI）標準對抗菌藥物進行耐藥 （R）、中介 （I）或敏感 （S）判讀。原始數據采用WHONET軟件進行分析。

2 結 果

2.1 分離的最常見革蘭陰性菌 共檢出革蘭陰性菌13 035株菌，每年檢出的革蘭陰性菌例數依次為:1 352株、1 921株、2 600株、3 547株以及3 615株，其中呼吸道標本占62%，泌尿道標本占9%，傷口標本占7%，血液占4%，膽汁占3%，各種膿液占3%。連續5年分離的最常見革蘭陰性菌排名前4位的分別為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌及鮑曼不動桿菌。

2.2 最常見的4種革蘭陰性菌連續5年的耐藥性變化

2.2.1 大腸埃希菌 亞胺培南對其敏感性最高（99.2%～99.8%），其次為阿米卡星（87.9%～96.0%）。大腸埃希菌對頭孢類抗菌藥物的體外敏感性下降明顯。青霉素類的氨芐西林及哌拉西林對大腸埃希菌活性很差，敏感性僅為10%左右。β－內酰胺類／β－內酰胺類抑制劑復合物:氨芐西林／舒巴坦的活性比單藥氨芐西林的活性只是略有增加；他唑巴坦明顯提高了哌拉西林的活性，使其敏感率由12.9%提高到90.0%；其他兩種酶抑制劑復合物的活性在50.2%～74.4%，阿莫西林／克拉維酸的活性逐年下降。喹諾酮類的環丙沙星與左氧氟沙星對大腸埃希菌的活性較差。

2.2.2 肺炎克雷伯菌 2010年對肺炎克雷伯菌的敏感性高于80%的藥物有亞胺培南、阿米卡星、妥布霉素、左氧氟沙星、環丙沙星及哌拉西林／他唑巴坦。頭孢類藥物頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟以及頭孢吡肟對肺炎克雷伯菌的敏感率近5年均高于60%（63.2%～74.7%）。喹諾酮類的環丙沙星與左氧氟沙星以及氨基糖苷類的慶大霉素與妥布霉素近5年活性最低為68.2%，最高為91.1%，相較于對大腸埃希菌的活性同樣有明顯增高。

2.2.3 銅綠假單胞菌 對銅綠假單胞菌保持最高活性的是妥布霉素與阿米卡星，敏感性分別為71.8%～93.2%、60.8%～88.0%，其次是哌拉西林／他唑巴坦64.5%～79.3%、亞胺培南47.8%～71.6%。環丙沙星與左氧氟沙星的敏感率為44.8%～60.9%。5年來，氨曲南與哌拉西林的敏感性下降明顯，氨曲南的敏感性由62.0%下降至44.2%，哌拉西林的敏感性由79.3%下降至59.6%。

2.2.4 鮑曼不動桿菌 2006年鮑曼不動桿菌對亞胺培南的敏感率最高，為88.7%，其次是阿米卡星、妥布霉素，敏感率分別為64.9%和52.6%，對氨芐西林／舒巴坦、頭孢他啶、頭孢曲松、環丙沙星、慶大霉素、頭孢吡肟、頭孢噻肟以及哌拉西林的敏感性均低于50%，5年來，所有藥物的耐藥性均有上升趨勢。2010年，亞胺培南和阿米卡星的敏感率分別為40.4%和42.4%，其他藥物的敏感率均低于40%。

3 討 論

本研究對2006年1月至2010年12月檢出的13 035株革蘭陰性菌進行了回顧性分析，與文獻報道的最常見革蘭陰性菌菌種相同，但排序略有差異［2－3］。

近年來大腸埃希菌對多種常用抗菌藥物產生了耐藥性，多重耐藥菌株的檢出率不斷增加［4－6］。大腸埃希菌對于β－內酰胺類抗菌藥物的耐藥性呈逐年持續增高趨勢；對廣譜青霉素類的氨芐西林、哌拉西林的耐藥率目前已達80%～90%或更高；對頭孢菌素類的敏感性逐年下降，頭孢他啶的敏感率由2006年的87.9%下降至2007年的46.4%，之后在50%左右波動；頭孢噻肟及頭孢曲松的敏感率略低于頭孢他啶，敏感率由68.8%下降為44.6%；5年來頭孢吡肟的敏感性由67.3%下降為50.4%，這與他們在抗菌藥物選擇性壓力下產ESBLs、產AmpC酶的細菌不斷增多有關，在國內CTX－M型ESBL普遍存在于肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌中［7］。本研究顯示，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南呈高度敏感性，敏感率接近100%，因此，碳青霉烯類抗菌藥物可作為治療大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等腸桿菌科感染的最可靠的藥物，同時也可作為危重患者的首選藥物。由于喹諾酮類的環丙沙星與左氧氟沙星近年在本院臨床上廣泛應用，部分甚至濫用，導致他們對大腸埃希菌的活性較差，為32.6%～46.7%。

銅綠假單胞菌能通過不同的機制產生耐藥性，其多重耐藥已成為醫院感染和患者反復感染、遷延不愈的主要原因之一。本研究中，氨基糖苷類的妥布霉素與阿米卡星對銅綠假單胞菌的敏感性最高，阿米卡星為60.8%～88.0%；妥布霉素為71.8%～93.2%，敏感性高于相關文獻報道［8－9］。亞胺培南的敏感性在2007年急劇下降至47.8%，近3年敏感性有所升高，2010年為65.8%。環丙沙星與左氧氟沙星的敏感率為44.8%～60.9%，敏感性略低于相關文獻報道［8－9］。這可能與不同地區、不同醫院抗菌藥物的使用情況有關。

不動桿菌屬是引起院內感染的主要病原菌，國內外資料顯示，不動桿菌屬在院內感染中占4位，成為僅次于銅綠假單胞菌的又一重要的非發酵糖菌。本組研究中，鮑曼不動桿菌多為多重耐藥菌，甚至是廣泛耐藥菌，耐藥性高于相關文獻報道［10］。本研究顯示，2006年鮑曼不動桿菌對亞胺培南的耐藥率為9.3%，2010年耐藥率已上升為58.9%，一旦亞胺培南耐藥，即意味著對目前常用的抗菌藥物均耐藥，常常無藥可選用，病死率高。因此，應加強對多重耐藥鮑曼不動桿菌的主動監測，及時隔離，徹底清潔，控制院內感染的發生及爆發流行。

［1］葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京:東南大學出版社，1997:474－548.

［2］王輝，陳民鈞，倪語星，等.2003～2004年中國十家教學醫院革蘭陰性桿菌的耐藥分析［J］.中華檢驗醫學雜志，2005，28（12）:1295－1303.

［3］鄒明祥，范學工，張艷亮，等.臨床分離革蘭陰性桿菌耐藥性分析及金屬β－內酰胺酶檢測［J］.中國感染控制雜志，2006，5（3）:239－243.

［4］Wang H，Chen MJ.Surveillance for antimicrobial resistance among clinical isolates of gram－negative bacteria from intensive care unit patients in China，1996to 2002［J］.Diagn Microbiol Infect Dis，2005，51（3）:201－208.

［5］馬越，李景云，張新妹，等.2002年臨床常見細菌耐藥性監測［J］.中華檢驗醫學雜志，2004，27（1）:38－45.

［6］朱德妹，汪復，張嬰元.2003年上海地區細菌耐藥性監測［J］.中國抗感染化療雜志，2005，5（1）:4－12.

［7］Xiong ZZ，Zhu DM，Wang F，et al.Investigation of extended－spectram β－lactamase in Klebsiellae pneumoniae and Escherichia coli from China［J］.Diagn Microbiol Infect Dis，2002，44（2）:195－200.

［8］申建維，孫秀琴，程冬娥.耐亞胺培南銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥性研究［J］.中華醫院感染學雜志，2007，17（8）:1005－1007.

［9］邱家洋，瞿秋明.銅綠假單胞菌臨床分離株醫院感染分布及耐藥性［J］.中華醫院感染學雜志，2007，17（1）:91－93.［10］王輝，陳民鈞.1994～2001年中國重癥監護病房非發酵糖細菌的耐藥變遷［J］.中華醫學雜志，2003，83（5）:385－390.

10.3969／j.issn.1671－8348.2012.34.035

B

1671－8348（2012）34－3653－03

△

，Tel:13981173171；E－mail:liuluojun90＠126.com。

2012－05－09

2012－07－12）