現(xiàn)場DNA物證證據(jù)的提取、保存及檢驗應(yīng)用進展

王基鋒，楊衛(wèi)紅

現(xiàn)場DNA物證證據(jù)的提取、保存及檢驗應(yīng)用進展

Advances on App lication of Abstraction，Storage and Test from Scene DNA Evidences

王基鋒1，楊衛(wèi)紅2

目的為了給刑事案件訴訟提供準(zhǔn)確可靠的證據(jù)，在辦理兇殺、強奸等多種刑事案件時，經(jīng)常需要對各種來源于人體的生物檢材進行個人同一認(rèn)定檢驗。方法 利用法醫(yī)DNA技術(shù)對現(xiàn)場提取的血液（斑）、精液（斑）、唾液（斑）、人體組織、骨骼等檢材進行檢驗，為案件偵破提供科學(xué)依據(jù)或線索；利用DNA數(shù)據(jù)庫技術(shù)更大的發(fā)揮法醫(yī)DNA技術(shù)在許多案件偵破中的應(yīng)用，還可以利用法醫(yī)DNA技術(shù)對災(zāi)難性事件（案件）中確定死亡人數(shù)、對受害者的身源進行鑒別。結(jié)果結(jié)論 利用DNA物證可以為案件偵查和訴訟提供更多證據(jù)

DNA物證；DNA提取；DNA保存；DNA檢驗

為了給刑事案件訴訟提供準(zhǔn)確可靠的證據(jù)，在辦理兇殺、強奸等多種刑事案件時，經(jīng)常需要對各種來源于人體的生物檢材進行個人同一認(rèn)定檢驗。現(xiàn)在把與案件有關(guān)并能為偵查提供線索、為審判提供證據(jù)，并可進行法醫(yī)遺傳學(xué)檢驗的生物樣品，或含有、承載可進行法醫(yī)遺傳學(xué)檢驗的生物樣品的物品都稱為生物物證檢材（以下簡稱檢材）。利用法醫(yī)DNA技術(shù)對現(xiàn)場提取的血液（斑）、精液（斑）、唾液（斑）、人體組織、骨骼等檢材進行檢驗，為案件偵破提供科學(xué)依據(jù)或線索；利用DNA數(shù)據(jù)庫技術(shù)更大的發(fā)揮法醫(yī)DNA技術(shù)在許多案件偵破中的應(yīng)用，還可以利用法醫(yī)DNA技術(shù)對災(zāi)難性事件（案件）中確定死亡人數(shù)、對受害者的身源進行鑒別。

1 DNA技術(shù)的提取

（1）現(xiàn)場檢材提取。及時、正確提取和保存；新鮮尸體可提取血、肌肉、腦組織、心臟等；腐敗尸體可依次提取深層肌肉組織、肋軟骨、指（趾）甲、長骨等；對于特殊的現(xiàn)場，為確定死亡人數(shù)，需檢驗所有提取的尸塊。

（2）親屬樣品提取，如果要通過親子鑒定確定身源的案件，優(yōu)先提取直系親屬的樣品，如父母、配偶和子女；根據(jù)具體情況選擇其他親屬。

（3）生前樣品提取，如果要通過同一比對確定身源，可以提取死者生前的牙刷、剃須刀、口紅、所穿的衣物（未洗過）、使用過的物品等。

2 現(xiàn)場檢材的提取和保存

2.1 一些基本原則

2.1.1 基本規(guī)則 ①檢材均應(yīng)直接提取，易攜帶物品整體提取；不易攜帶物品提取附著檢材的部位；②根據(jù)檢材附著的不同載體，應(yīng)采取擦拭、剪切、刮削、吸附、浸泡、鑿鋸、挖取等方法提取；③在提取檢材前后應(yīng)進行照相或錄像；④不同部位的檢材應(yīng)分別提取，單獨包裝；⑤提取用具要潔凈；⑥使用適當(dāng)?shù)姆庋b材料，做好檢材提取記錄；⑦提取檢材時，注意要提取對照樣品；⑧提取的各種新鮮液體物證應(yīng)盡快檢驗，剩余部分應(yīng)制成紗布斑跡干燥保存；人體組織應(yīng)冷凍保存；⑨提取的各種體液性的檢材應(yīng)在陰涼通風(fēng)、可防止污染處自然干燥成紗布斑跡，禁止暴曬或加熱烘干；⑩提取的檢材在包裝和攜帶運送過程中應(yīng)避免互相摩擦、沖撞以及失落，易碎檢材防止擠壓和震動，易散失檢材嚴(yán)密包裝，易腐敗檢材低溫保存送檢。

2.1.2 防止污染原則 ①提取檢材時必須使用一次性用具，每提取完一份檢材應(yīng)及時更換，禁止重復(fù)使用和赤手觸摸檢材；②提取檢材時必須使用無菌的提取試劑和轉(zhuǎn)移用載體；③提取檢材時不得說話、打噴嚏等，以免造成污染；④提取檢材時一次只能提取一件檢材；⑤禁止多件檢材混合包裝，禁止重復(fù)使用封裝材料。

2.1.3 個人防護原則 ①所有的檢材應(yīng)都視同為可能的傳染源，提取檢材時應(yīng)穿戴好防護用品；②檢材提取人員手上的任何切口和擦傷都要用防水織物包扎；③在提取開始和結(jié)束后對手部進行消毒。

2.2 檢材的提取和保存

2.2.1 常見檢材 常見的檢材一般包括血液（斑）、唾液（斑）、精液（斑）、毛發(fā)、骨骼、陰道分泌物（斑）、各種組織、分泌物、排泄物，以及煙頭、果核、口杯、口香糖等。①法醫(yī)物證檢材包括血液（痕）、精液（斑）、唾液（斑）、毛發(fā)、組織、骨骼等各種含有人體細(xì)胞的生物檢材。由于載體的不同，現(xiàn)場提取時需注意去發(fā)現(xiàn)和提取各種形式的生物物證檢材。②提取檢材前注意記錄檢材的大小、形態(tài)等特征提取的檢材必須分別包裝，在包裝袋上注明檢材名稱、來源、數(shù)量、采集日期等，并有采集人及采集見證人的簽名。

③對于活體檢材，一般用醫(yī)用消毒紗布或中速濾紙采集指血或耳垂血（2cm2以上），自然晾干。可以用口腔拭子提取口腔黏膜細(xì)胞，提取前須清水漱口，檢材自然晾干；或取毛發(fā)3根～5根。以上檢材均用紙袋包裝后常溫保存。④對于血痕，類似衣褲、地毯、床單上的血痕，可以剪下一部分紙袋包裝后常溫保存；類似衣柜、墻壁、地面、刀、斧上的血跡可以刮取，或用生理鹽水浸濕的紗線提取，自然晾干后紙袋包裝常溫保存。⑤涉嫌性侵害的，應(yīng)用棉簽分別提取陰道外端、中部和后穹窿部，必要時還應(yīng)注意會陰、下腹、口腔、肛門等部位有無精液（斑），以及現(xiàn)場懷疑有精斑的其他檢材，如床單、被褥、衛(wèi)生紙、避孕套、內(nèi)褲、衣物等。所有檢材應(yīng)該分別提取、標(biāo)明記號、自然晾干、紙袋包裝后常溫保存。⑥現(xiàn)場的可疑毛發(fā)用鑷子提取，用紙折疊后置紙袋內(nèi)常溫保存。⑦含有唾液斑的檢材如煙頭、果核、香口膠等用鑷子提取，紙袋包裝后常溫保存。⑧人流刮宮組織，取5g以上確認(rèn)為絨毛的組織；引產(chǎn)胎兒，取5g以上的組織；羊水，取2m l以上的液體。提取的檢材潔凈容器包裝、冰凍保存、冷藏送檢。⑨新鮮尸體，可用醫(yī)用消毒紗布或中速濾紙?zhí)崛⊙海?cm2以上），自然晾干，紙袋包裝后常溫保存。新鮮尸體也可取肌肉組織（50g以上）；腐敗尸體，盡量提取相對新鮮的組織，包括指甲（2枚以上）、肋軟骨（5cm以上）或者其他軟骨（5g以上）、深部肌肉組織（5g以上）、毛發(fā)（10根以上）；白骨化的尸體盡可能提取指甲、長骨、牙齒、毛發(fā)。以上檢材潔凈容器包裝、冰凍保存、冷藏送檢。⑩根據(jù)案件情況，注意提取對照樣本。

2.2.2 容易忽略的生物物證 目前，STR復(fù)合擴增技術(shù)已成為各個DNA檢驗實驗室的主要手段，提高了對微量DNA進行檢驗的能力，拓寬了DNA檢驗的范圍，使得許多潛在的DNA檢材在偵查破案中能夠發(fā)揮應(yīng)有的價值。它可以是面罩、果核等上遺留的唾液中口腔脫落細(xì)胞DNA，也可以是通過皮膚接觸遺留的上皮細(xì)胞DNA。所有這些都是潛在的DNA證據(jù)來源，能夠為偵查破案提供科學(xué)依據(jù)。微量DNA的檢驗是法醫(yī)DNA檢驗的難點之一。對于以上提到的各種潛在生物物證，進行DNA檢驗時不能保證其成功率，但是，一旦成功地獲得了現(xiàn)場物證的DNA分型，就能夠成為破案的直接證據(jù)。

對于潛在的DNA物證，檢材的提取往往是關(guān)鍵。只要現(xiàn)場勘查人員掌握各種檢材存在的形式，強化物證提取的意識，發(fā)現(xiàn)這些物證并不難。在提取過程中，首要的問題是注意防止污染，必須戴口罩和手套操作；由于這類檢材中DNA含量少，細(xì)胞與載體表面結(jié)合松散，即使戴著手套，也要盡量少處理和觸摸所要擦拭的區(qū)域。對于現(xiàn)場物證，不同的區(qū)域可能有不同的接觸者，為了最大程度地獲得現(xiàn)場物證的證據(jù)價值，還需要分區(qū)域進行檢材的提取。

建議現(xiàn)場勘查人員采用兩步擦拭法對檢材進行提取，即先用浸濕的棉簽反復(fù)擦拭后，再用干棉簽擦拭至載體表面干燥。擦拭時盡量使用棉簽底部，所用區(qū)域越集中越好。所有棉簽干燥后保存?zhèn)溆谩?/p>

3 DNA檢驗結(jié)論的應(yīng)用

3.1 技術(shù)方法的選擇

目前，利用法醫(yī)DNA技術(shù)對生物物證進行檢驗主要采用兩種方法：STR分析和線粒體DNA測序，其中STR分析中包括常染色體的STR分析和Y染色體的STR分析。

常染色體的STR分析檢驗對象一般包括血液（痕）、唾液（斑）、精液（斑）、毛發(fā)（有毛根）、骨骼、陰道分泌物（斑）、器官、肌肉、分泌物、排泄物等生物樣品，以及含有或承載上述生物樣品的各種物品，如煙頭、果核、口杯、口香糖等。該方法個體識別率較高，能夠達(dá)到同一認(rèn)定的水平，但該方法對一些特殊的生物檢材，如陳舊骨骼、毛發(fā)、牙齒等角質(zhì)化或含有DNA量極少或降解的樣品，往往無能為力，只能利用線粒體DNA測序技術(shù)進行檢驗。

線粒體DNA測序方法的個體識別率較低，不能達(dá)到同一認(rèn)定水平，一般作為STR分型技術(shù)的補充手段，當(dāng)利用STR分型技術(shù)無能為力時，才采用線粒體DNA測序技術(shù)。由于缺乏詳細(xì)的統(tǒng)計學(xué)資料，目前還不能給出一個確切的統(tǒng)計學(xué)概率；另外線粒體DNA測序檢驗無法應(yīng)用于父系遺傳關(guān)系的檢驗。

對于一些特殊的案件，可以應(yīng)用Y-STR分析，確定男性的單倍型。

3.2 DNA檢驗的局限

DNA檢驗技術(shù)并不是萬能的，有時對某些檢材的檢驗無能為力，有時對某些案件的檢驗達(dá)不到同一認(rèn)定的水平，一定要認(rèn)識到這些情況的存在，才不至于錯誤的理解和應(yīng)用DNA檢驗結(jié)論。一般地，DNA檢驗結(jié)果做出排除的結(jié)論，能夠說明所檢驗的檢材與要比對的樣本來源于不同的個體，但當(dāng)DNA檢驗，分型一致時，不一定能夠達(dá)到同一認(rèn)定的水平。例如，線粒體DNA測序檢驗的結(jié)果，Y染色體STR檢驗結(jié)果，混合樣品的檢驗結(jié)果，親子鑒定時遇到變異的情況，單親親子鑒定，微量DNA的核DNA檢驗獲得的STR分型不完全等情況下，DNA檢驗往往達(dá)不到認(rèn)定的水平，必須與其他相關(guān)的證據(jù)一起綜合考慮。

DF795.2

B

1672－688X（2012）04－0305－03

2012－09－28

1.河南省公安廳刑科所，河南鄭州450003

2.鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)教研室，河南鄭州450007

王基鋒（1976－），男，河南扶溝人，主檢法醫(yī)師，從事法醫(yī)現(xiàn)場斟查實務(wù)及法醫(yī)病理學(xué)的研究。