淫羊藿總黃酮的藥理作用研究進展

張玉萱,徐玲玲

(上海中醫藥大學岳陽中西醫結合醫院藥劑科,上海,200437)

淫羊藿性味辛、甘、溫,歸肝、腎經,具有補腎陽、強筋骨、祛風濕之功效。淫羊藿來源于小檗科植物心葉淫羊藿、箭葉淫羊藿等的干燥葉,藥用價值較高,藥用歷史悠久。早在《本草綱目》中已有記載,稱其“益精氣、堅筋骨、補腰膝、強心力”。現代藥理學研究顯示,淫羊藿的有效成分主要為淫羊藿總黃酮(TFE)和淫羊藿多糖(EPS),可增強機體免疫、增加心腦血管血流量,促進內分泌功能、造血功能、骨髓細胞DNA合成,還可祛痰、鎮咳、平喘,具有抗衰老、抗腫瘤之功效。已有大量研究發現,TFE是淫羊藿發揮以上作用的主要有效成分,本文就近年來TFE藥理作用相關的研究報道綜述如下。

1 對免疫系統的影響

許蘭芝等[1]選取健康成年雄性Wistar大鼠,隨機分為生理鹽水組、模型組、淫羊藿總黃酮100、200 mg/(kg·d)組 ,每組 10 只 。生理鹽水組給予生理鹽水連用30 d;模型組大鼠后肢肌肉注射醋酸潑尼松龍注射液10 mg/(kg·d)造模;用藥治療第30 d取血,分離血清,測定各組大鼠血清的促甲狀腺激素、甲狀腺激素 T3、T4含量,以及下丘腦、垂體、甲狀腺組織中鈣調蛋白基因的表達。結果表明,TFE可以促進腎陽虛大鼠甲狀腺激素的分泌,較大劑量的TFE能明顯抑制其促甲狀腺激素的分泌,且對腎陽虛大鼠下丘腦、甲狀腺組織中鈣調蛋白基因的表達有顯著的抑制作用。

劉小雨等[2]采用Th1、Th2、Th3 cDNA 芯片,分別檢測正常青年(YC)組、老齡大鼠(OM)組、TFE組、NF-KB阻斷劑(PDTC)組、PDTC組+TFE組的Th1、Th2、Th3各類細胞因子信號差異表達。最終,老齡大鼠脾淋巴細胞過度凋亡,Th1、Th2、Th3類細胞因子分泌增高,Th2、Th3類細胞因子優勢應答;TFE可以抑制淋巴細胞過度凋亡,校正老齡大鼠 Th1、Th2、Th3類細胞因子之間的比例失衡,重塑Th1-Th2-Th3細胞免疫調節網絡的良性平衡。Liu等[3]還進行了TEF經由核因子-κ B(NF-κ B)家族相關信號轉導途徑進行調控免疫衰老的有效機制,結果證實,TEF可抑制老年大鼠脾淋巴細胞過度凋亡,激活老年大鼠Rel/NF-κ B/IB/IKK及其相關信號轉導途徑,最終經由 I Bε、I Bα的調節,使NF-κ B在適度范圍上調。

沈自尹等[4]采用基因芯片技術,比較老年大鼠和青年大鼠在TFE干預后的淋巴細胞基因表達。結果表明,TFE在上調老年大鼠淋巴細胞抗凋亡基因表達的同時,下調抗增殖基因的表達;上調促增殖基因表達的同時,下調抗增殖基因的表達,重塑基因表達良性平衡;還協同調節 TCR/CD3、CD28、CT LA4、TGFβ/IL-2R 等介導的信號轉導通路,發揮抗凋亡效應。

孫奕等[5]采用TFE325、650和1300mg/(kg·d)與羥基脲 320 mg/(kg·d)ig小鼠,同時以正常和模型小鼠作對照實驗,第11 d用3H-TdR摻入法和同位素釋放法檢測各組小鼠IL-2和NK細胞活性,并計算脾臟指數。結果顯示,TFE可拮抗羥基脲抑制模型小鼠IL-2和NK細胞活性,尤以650 mg/(kg·d)劑量組效果最為顯著,模型組小鼠體重、脾臟指數下降程度明顯大于正常組和治療組。因此,TFE對免疫功能低下的小鼠具有良好的免疫促進作用。

2 對骨骼系統的影響

雷光華等[6]選用2月齡SD大鼠,結果發現TFE干預可明顯改善被動吸煙大鼠的骨密度和骨形態學指標,且骨密度與骨形態學指標之間存在明顯的相關性。

Chen等[7]將60只4月齡雌性SD大鼠隨機分為3對照組(假手術)、去卵巢組、淫羊藿組。當骨密度(BMD)下降>20%,骨質疏松模型建立,TEF組予TFE灌胃4周。結果TEF組大鼠腰椎BMD顯著改善,且骨組織護骨素(OPG)mRNA的表達較去卵巢組明顯增強,但對護骨素配體(OPGL)mRNA表達的促進作用不明顯。本實驗結果說明,TEF可促進骨組織中OPG mRNA的表達來抑制破骨細胞的分化與成熟,從而治療骨質疏松。

許碧連等[8]選取4～5月齡雌性SD大鼠40只,隨機分為假手術組、去卵巢組、己烯雌酚組和淫羊藿總黃酮組。己烯雌酚組和淫羊藿總黃酮組大鼠行雙側卵巢去除術后,分別灌胃DES 22.5 μ g/(mg·d)、TFE 300 μ g/(mg·d),持續 90 d 。用骨組織形態計量學等方法測量脛骨上段和第5腰椎松質骨及脛骨中段皮質骨的動態參數和靜態參數,同時測量股骨鈣、磷及羥脯氨酸含量,測量子宮濕重及子宮內膜厚度。由此可知,TFE能有效預防去卵巢大鼠的股骨丟失,但不能有效預防脛骨上段和腰椎松質骨的丟失,對子宮沒有刺激作用。

Wu等[9]將48例骨質疏松大鼠分為對照組、卵巢切除組(雙側卵巢切除)、TEF組及17β-雌二醇組共4組,應用RT-PCR檢測大鼠下丘腦及海馬 ERα、ERβ mRNA 的表達。結果顯示,骨質疏松大鼠的血清雌二醇、骨密度、子宮重量、下丘腦及海馬ERα、ERβ mRNA的表達明顯下降;經17β-雌二醇治療后,除了 ERβ mRNA表達水平以外,其他指標均得到顯著改善;TFR治療后,除了子宮重量外,其余指標均得到顯著改善。本實驗說明TFE可提高骨質疏松大鼠的骨密度,而對子宮無副作用,其機制可能和提高下丘腦及海馬ERα、ERβ mRNA 的表達水平相關。

Xu等[10]進行體外分離培養去勢雌性大鼠來源骨髓間充質干細胞,分別在成骨誘導液和脂肪誘導液條件下連續培養15 d,并添加10 μ g/mL的TFE。結果顯示,TFE可顯著上調ALP,以及Runx2(成骨早期分化因子)mRNA的表達,并下調PPARγ-2(脂肪形成關鍵基因)mBNA的表達。在成骨誘導條件下,EFs呈時間依賴性下調DKK1的表達;在脂肪誘導條件下,EFs呈時間依賴性抑制DKK1蛋白的上調。因此,TFE可能通過抑制DKK1蛋白的表達調控去勢雌性大鼠BMSCs成骨和成脂分化平衡,來治療絕經后骨質疏松癥。

曲萍等[11]予維甲酸14 d灌胃,造成大鼠骨質疏松癥。以TFE連續給藥28 d,檢測血清鈣、血清磷、ALP水平的變化,并取股骨進行骨鈣含量測定及股骨病理組織學檢查,結果顯示,各劑量的TFE對血清鈣、血清磷、ALP正常生理水平均無顯著影響,但均可增加股骨骨鈣含量、骨皮質厚度及骨小梁數量。因此可知,TFE對骨質疏松癥具有明顯的預防和治療作用。

3 對心血管系統的影響

尹曉飛等[12]采用常壓缺氧條件下分別觀察小鼠平均存活時間和心肌耗氧量;采用夾閉氣管法觀察小鼠平均心電消失時間。結果淫羊藿總黃酮高、低劑量組均能延長小鼠平均存活時間,降低心肌耗氧量。由此可知,淫羊藿總黃酮能明顯降低小鼠心肌氧耗,保護缺氧心肌,延長小鼠存活時間。

Huang等[13]將大鼠分為假手術組、模型組、陽性藥組以及受試藥小、中、大劑量組共6組,麻醉開胸后結扎冠狀動脈左前降支,復制急性心肌梗死模型。受試藥小、中、大劑量組分別靜脈注射TFE 10、20 、40 mg/kg,結果小 、中、大劑量組可不同程度地縮小心肌梗死面積,降低血清肌酸磷酸激酶、乳酸脫氫酶活性和丙二醛水平,并升高血清超氧化物歧化酶活性;給藥后5 min,心電圖ST-T段抬高程度開始降低,3 h后仍有降低。由此可知,TFE可保護冠脈結扎致大鼠心肌缺血,且起效較快。

4 對血液系統的影響

黃曉瑾等[14]對TFE灌胃給藥對家兔血黏度和血小板聚集的影響進行了研究。結果顯示,TFE灌胃30～120 mg/kg可顯著降低家兔全血黏度、紅細胞壓積和紅細胞聚集指數;抑制腺苷二磷酸誘導的家兔血小板聚集。最后得出結論:TFE具有改善家兔血液流變性、血小板聚集的作用。

黃秀蘭等[15]研究了TFE注射液對正常麻醉開胸術血流動力學的影響。結果顯示,TFE具有如下作用:減慢心率(15 mg/kg組持續時間較長)、升高收縮壓、短暫降低舒張壓;降低左室內壓最大變化速,升高心臟做功指數率;增加心輸出量、冠脈流量、心臟指數;降低總外周阻力、冠脈阻力及心肌耗氧指數。總之,TFE注射液可通過增加冠脈流量,增加氧的供應,降低心肌耗氧量,改善心臟血流動力學。

5 對生殖系統的影響

佘白蓉等[16]通過測定TFE灌胃給藥7 d后,未成年大鼠腺垂體、附睪及精囊腺的重量,來觀察TFE對生殖器官重量的影響;并檢測不同年齡大鼠應用相同劑量的TFE灌胃給藥7 d后,體內睪酮、雌二醇、黃體生成素水平的變化。結果顯示,TFE可增加未成年大鼠生殖器官重量,提高性激素分泌水平,并能顯著促進離體大鼠間質細胞睪酮基礎分泌。因此,TFE可促進雄性生殖系統和生殖內分泌功能。

6 抗炎作用

張逸凡等[17]通過實驗證明了200、400 mg/kg的TFE對巴豆油所致小鼠耳腫脹、醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增加有顯著抑制作用,而70、140 mg/kg的TFE可顯著抑制角叉菜膠所致大鼠足腫脹,140、280 mg/kg的TFE對巴豆油所致肉芽組織增生具有顯著抑制作用,并可抑制慢性炎癥發生。另外,280 mg/kg的TFE對佐劑關節炎大鼠的原發性和繼發性足腫脹均有顯著抑制作用。

7 抗腫瘤作用

張玲等[18]應用 MTT法,NBT、Giemsa染色法,TRAP-PCR檢測法,流式細胞術以及RTPCR檢測法檢測淫羊藿甙(ICA)抑制腫瘤HL-60細胞端粒酶活性及作用機制,結果顯示,ICA對于HL-60細胞端粒酶火星的抑制作用可能是通過基因-蛋白-細胞的級聯調節作用完成的。

8 總結與展望

Wu等[19]研究了老化對小鼠尿代謝物的影響以及 TFE的抗衰老作用。研究中分別對4、10、18、24個月以及應用TFE治療的小鼠進行質子核磁共振分析,結果顯示大多數共振態與小鼠年齡高度相關;應用TFE治療的24個月小鼠的代謝情況與18個月小鼠相似;另外,大多數共振態結果顯示應用TFE治療的小鼠更加年輕。本研究說明TFE治療可顯著影響老化進程,顯示出抗衰老作用。

9 抗衰老作用

淫羊藿的多種藥理活性使得其具有較高的藥用價值,但目前對于淫羊藿各種化學成分的研究尚不十分深入[20-21]。因此,針對當前發病率較高的疾病,如腫瘤、心腦血管疾病、腫瘤等,對淫羊藿開展更深入、更全面的研究具有深遠的意義和廣闊的前景,可以為臨床帶來更多獲益。

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