廣泛耐藥結核病快速檢測方法的探討

江西省武寧縣人民醫院（332300）余勤慧 蘭蘭

肺結核是嚴重危害人類健康的傳染病，是全球關注的公共衛生和社會問題。隨著卡介苗和抗結核病化療藥物的發明，結核病發病率有所減少，但由于大量耐藥菌株的出現和結核分枝桿菌與HIV的合并感染，結核病又有上升趨勢。廣泛耐藥結核病（XDR-TB）是指患者所感染的結核分支桿菌除同時對異煙肼、利福平耐受外，還對二線抗結核注射藥物（卷曲霉素、卡拉霉素、阿米卡星）中的至少一種耐受。近年來開發出多種耐藥結核病的快速診斷方法，指導臨床用藥和流行病調查有重要意義。

1 臨床資料與方法

1.1 臨床資料 本院2005年3月～2006年5月住院肺結核患者100例，多為復治病人，痰菌涂片陽性。

1.2 實驗方法 將受檢者痰標本轉移到無菌玻璃瓶中，根據痰標本粘稠度加入2～5倍標本體積的2%NaOH溶液，用小玻璃棒仔細攪拌，處理20min后各取0.15mL處理液，分別接種對照斜面、PNB瓊脂培養斜面和各含藥斜面，置36℃溫箱培養。

2 結果分析

2.1 痰結核菌分離培養與菌型鑒定 100例痰涂片陽性標本，抗酸桿菌培養陽性63例。痰結核菌經匡氏PNB瓊脂培養基直接分型鑒定，并結合其生長物菌落形態與特征，判定為結核菌分支桿菌生長物56例，結核分支桿菌與非結核分支桿菌混合生長物5例；非結核分支桿菌生長物3例。

2.2 匡氏雙相瓊脂培基痰菌直接藥敏試驗臨床痰結核生長物對二線抗癆藥物氧氟沙星的耐藥率高達90%，且顯著高于其余3種二線抗癆藥物的耐藥率（P＜0.01）。

2.3 臨床XDR-TB快速檢測 55例結核生長物中共檢到9例XDR-TB，XDR-TB發生率為16.4%。報告藥敏實驗結果時間分別為：直接試驗第16天4例，第21天4例，第28天1例；匡氏雙相瓊脂痰菌直接藥敏試驗法臨床XDR-TB平均檢出時間為19.6天。

3 討論

因結核分支桿菌生長十分緩慢，分離培養平均需要3周以上，藥物敏感試驗需要3～4周，MDR-TB的鑒定時間將在2個月以上。本實驗室采用匡氏PNB瓊脂直接分型鑒定技術，臨床檢出XDR-TB平均檢出時間為19.6天。MDR-TB為16.6天。由于該技術不需要結核菌純培養物，這快于目前已見于報道的其他快速藥敏試驗方法[1]，且不存在假陽性和假陰性，為XDR-TB傳染源的快速鑒定提供了可靠手段。

總之，XDR-TB的控制是一件長期的艱苦工作，需要全球范圍的合作與支持[2]，因此，要不斷更新診斷工具和診斷方法，及臨床應用新藥新疫苗。