orexin-B細胞及其神經纖維在癲癇模型大鼠癲癇發作不同時間點的變化及其意義

陳福順，王 卓，王湘慶，郎森陽

(解放軍總醫院神經內科，北京 100853)

癲癇是由大腦神經元異常放電導致的中樞神經系統功能失常的腦部疾病，具有突然發生、反復發作的特點。目前的抗癲癇藥物大多通過降低神經元興奮性或增加抑制性神經遞質起作用。γ-氨基丁酸(GABA)是中樞內重要的抑制性神經遞質，多年來癲癇的發生被認為是中樞內GABA抑制作用減弱或缺乏的結果。orexin又稱hypocretin，因其首先于1998年在下丘腦發現，并與食欲有關，故命名為食欲素，包括orexin-A和orexin-B(又稱為食欲素A型和食欲素B型)，均為orexin前體的分解產物[1-2]，其受體共有2種亞型—orexin1R及orexin2R，廣泛分布于整個中樞神經系統[1-5]，此后又發現其與交感神經活動[6]以及睡眠和覺醒狀態的調控有關[7-8]，而對于其與癲癇的有關研究，有實驗[9]證實orexin能增強GABA電流，也有報道[10]認為反復癲癇發作患者腰穿腦脊液中orexin-A濃度少于非癲癇患者，但有關orexin-B的研究尚未見報道。因此，orexin可能與癲癇的發生或控制有關。目前對于orexin-B在癲癇發作后多時間點變化的研究國內外均未見報道，因此本研究采用海人酸(kainic acid，KA)腹腔注射誘發大鼠癲癇發作，用免疫組化方法檢測orexin-B及其神經纖維在不同時間點的變化情況，以闡明orexin-B在癲癇發生中的變化，深化癲癇的發病機制，且為癲癇治療開拓一個新的領域。

1 材料與方法

1.1 實驗動物、主要儀器和試劑成年雄性Wistar大鼠30只，體質量250～300 g，由解放軍總醫院動物中心提供。冰凍切片機為Lei CA CM1900，Olympus BX53顯微鏡，KA(編號KA0250)購自Sigma公司，羊抗orexin-B多克隆抗體(編號SC-8071)為Santa Cruz公司產品，超敏即用型二步法(非生物素)檢測試劑盒(編號PV-9003)購自北京中杉金橋生物技術有限公司。……