對人結腸癌細胞株HT-29轉染shRNA重組質粒后Survivin基因變化的研究

袁禧先 張爽 徐宗云 王鳳榮 董慧慧

[摘要] 目的 通過對人結腸癌細胞株HT-29轉染shRNA重組質粒后觀察Survivin基因的變化。 方法 設計兩條針對Survivin基因CDS區不同位點的siRNA片段并構建shRNA表達載體，重組質粒使用陽離子脂質體法轉染結腸癌細胞株HT-29。RT-PCR，Western-blot檢測轉染后mRNA及蛋白表達。 結果 轉染shRNA重組質粒可有效抑制HT-29細胞Survivin的表達，Survivin mRNA和蛋白表達下調，表明Survivin基因沉默效果較高；兩個轉染組之間相比pshRNA1組Survivin基因的表達量低于pshRNA2組。 結論 人結腸癌細胞株中的Survivin基因表達率可通過shRNA重組質粒轉染而發生變化；siRNA1和siRNA2序列中Survivin基因表達量存在統計學意義，提示我們在今后有關Survivin基因靶向治療研究中是否需要考慮到序列的選擇以提高作用效果。

[關鍵詞] Survivin；結腸癌HT-29；SiRNA；RT-PCR；Western-blot

[中圖分類號] R730.2[文獻標識碼] A[文章編號] 1673-9701（2012）15-0001-03