煙霧凝聚物對人正常支氣管上皮細胞中p16轉錄的抑制作用及其機制

趙艷紅，施新革，吳軍兵，王春仁

（1.中國食品藥品檢定研究院醫療器械檢定所生物材料和組織工程室，北京 100050；2.國家食品藥品監督管理局醫療器械技術審評中心，北京 100044；3.新鄉醫學院第一附屬醫院骨科，河南 衛輝 453100；4.中國科學院生物物理學研究所，北京 100101）

煙霧凝聚物對人正常支氣管上皮細胞中p16轉錄的抑制作用及其機制

趙艷紅1，2，施新革3，吳軍兵4，王春仁1

（1.中國食品藥品檢定研究院醫療器械檢定所生物材料和組織工程室，北京 100050；2.國家食品藥品監督管理局醫療器械技術審評中心，北京 100044；3.新鄉醫學院第一附屬醫院骨科，河南 衛輝 453100；4.中國科學院生物物理學研究所，北京 100101）

目的：通過體外模擬吸煙過程來檢測抑癌基因p16表達的變化，探討p16基因在吸煙導致肺癌發生過程中的作用。方法：常規正常支氣管上皮細胞（HBE）分為實驗組和對照組，分別接受煙霧凝聚物和DMSO處理。利用免疫印跡和Realtime RT－PCR分別檢測P16蛋白表達和mRNA的轉錄水平。構建p16的基因組啟動子載體，利用熒光素酶分析煙霧凝聚物對其轉錄活性的影響。結果：不同濃度（0，10，25，50，100mg·L－1）的煙霧凝聚物處理HBE后，其p16的mRNA和P16蛋白表達水平明顯降低，并且表現出劑量依賴性。大于25mg·L－1的煙霧凝聚物能明顯抑制P16蛋白表達和mRNA的轉錄水平，與對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05），其中100mg·L－1煙霧凝聚物表現出最大的抑制效應。煙霧凝聚物也能以劑量依賴方式抑制p16啟動子的轉錄活性，大于25mg·L－1的煙霧凝聚物能顯著抑制p16啟動子的熒光素酶活性，與對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05），其中100mg·L－1的煙霧凝聚物表現出最大的抑制效應?！?br>