巴斯德畢赤酵母表達的人抑瘤素M發酵條件及發酵產物分析

孔 寧，高海成，劉國民，陳 月，周余來，顏煒群

（1.吉林大學藥學院醫用生物材料學教研室，吉林 長春 130021；2.吉林大學藥學院臨床藥學與藥事管理學教研室，吉林 長春 130021；3.吉林大學第二醫院骨科，吉林 長春 130041）

巴斯德畢赤酵母表達的人抑瘤素M發酵條件及發酵產物分析

孔 寧1，高海成2，劉國民3，陳 月1，周余來1，顏煒群1

（1.吉林大學藥學院醫用生物材料學教研室，吉林 長春 130021；2.吉林大學藥學院臨床藥學與藥事管理學教研室，吉林 長春 130021；3.吉林大學第二醫院骨科，吉林 長春 130041）

目的：研究巴斯德畢赤酵母表達的人抑瘤素M（hOSM）大規模發酵條件。方法：利用hOSM畢赤酵母高表達菌株，于試管水平進行發酵pH條件的摸索，以補料分批培養方式在80L發酵罐中對hOSM工程菌進行3個批次的高密度發酵，控制和優化各種發酵條件，通過SDS－PAGE對發酵產物進行分析。結果：最終確定在pH 5.0的FM21培養基中擴增菌體，待菌體密度達190g·L－1時添加甲醇誘導，在發酵液pH 5.5的條件下，發酵溫度穩定在28℃，通入空氣的流量為2vvm，轉速為650r·min－1，罐內壓力為10P，溶解氧保持在25%左右，甲醇流加速度在9.3mL·h－1·L－1初始發酵液體積，誘導36h時結束發酵，hOSM占分泌總蛋白的28%，產量達到280mg·L－1。結論：應用hOSM工程菌能夠進行穩定的發酵，為進行下一步生物學功能測定提供充足的物質基礎。

抑瘤素M；畢赤酵母；發酵

抑瘤素 M（oncostatin M，OSM）是一種相對分子質量約為28 000的細胞生長調節因子，屬于白細胞介素6（IL－6）家族中的一員，該家族成員之間顯示出相似的生物學功能，并均通過受體gp130亞單位進行信號傳遞［1］。OSM具有廣泛的生物學活性，包括參與炎癥反應、神經元再生、造血作用、重塑細胞外基質及抑制多種腫瘤細胞的增殖等［2］?！?br>