黃連解毒湯對動脈粥樣硬化兔血脂水平及血清、斑塊組織hs-CRP含量的影響

符春生，潘江慧 ，張古老，謝家和

（1.韶關市職業病防治醫院康復科，廣東 韶關 512026；2.贛南醫學院第一附屬醫院心內科，江西 贛州341000；3.南昌大學研究生院醫學部2010級，南昌330006）

冠狀動脈粥樣硬化心臟病已成為危害人類健康最重要疾病之一，其主要病因是動脈粥樣硬化（AS）的形成。目前研究認為，AS形成的機制比較復雜，高脂血癥是其發生的重要原因，慢性炎癥貫穿其發展的全過程[1]。黃連解毒湯是中醫解毒清熱的名方，具有調脂﹑抗炎﹑抗免疫作用。本研究旨在探討黃連解毒湯抗AS的作用及其機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1）動物：健康日本雄性大耳白兔24只，體質量（2.0±0.2）kg，年齡 6 個月左右，由贛州畜牧研究所提供。

2）藥品與試劑：黃連、黃柏、黃芩、梔子購于贛州醫藥公司，膽固醇購于湖南衡陽同仁化工廠，蛋黃粉購于安徽合肥康德食品化工廠，豬油購于贛州市農貿市場。高敏C反應蛋白（hs－CRP）ELISA試劑盒購自上海天呈生物制品有限公司，羊抗兔IgG購于武漢博士德生物工程有限公司。

3）主要儀器：日本OLYMPUS公司生產的全自動生化分析儀。

1.2 實驗方法

1）黃連解毒湯的制備：將黃連、黃柏、黃芩、梔子以 3∶2∶2∶3 的比例煎煮，分 2 次煎煮，第 1 次 60min（并過濾），第2次30min（并過濾），合并2次濾液，濃縮至1 g·mL-1，保存4℃冰箱備用。

2）分組與造模：將24只大耳白兔在適應性喂養7 d后，按隨機數字表法分為3組，即正常對照組、模型對照組、黃連解毒湯組，每組8只。正常對照組飼普通標準飼料，模型對照組、黃連解毒湯組先導管球囊損傷兔左側頸總動脈并喂飼高脂飼料（15%蛋黃粉、5%豬油、1%膽固醇、80%基礎飼），每日每只予100 g[1-2]；黃連解毒湯組同時每天灌胃黃連解毒湯液3mL·kg-1，而正常對照組、模型對照組給予等量生理水灌胃。

3）觀察指標與檢測方法：喂養12周后停藥禁食12 h，耳緣靜脈取血10mL，5mL用于做血脂檢測，檢測指標主要為 TC、TG、LDL-C、HDL-C；5 mL 用ELISA測定血清hs-CRP含量。同時用10%烏拉坦耳緣靜脈注射麻醉，分離左頸總動脈斑塊組織，采用免疫組織化學法測定組織hs-CRP含量，并肉眼觀察頸動脈病理學改變情況。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 血脂水平檢測結果

3組間血脂水平比較差異均有統計學意義（P<0.01）。模型對照組﹑黃連解毒湯組血脂水平均顯著高于正常對照組（P<0.01），黃連解毒湯組血脂水平顯著低于模型對照組（P<0.01）。 見表 1。

表 1 3 組血脂水平比較 ±s，c/（mmol·L-1）

表 1 3 組血脂水平比較 ±s，c/（mmol·L-1）

*P<0.01與正常對照組比較；△P<0.01與模型對照組比較。

組別 n TC TG LDL-C HDL-C正常對照組 8 1.72±0.86 1.16±0.56 1.06±0.50 0.46±0.21模型對照組 8 22.08±7.56* 5.67±1.78* 17.01±2.25* 3.12±1.20*黃連解毒湯組 8 8.26±1.89*△ 2.28±0.98*△ 4.05±0.91*△ 5.21±2.09*△

2.2 血清及斑塊組織hs-CRP含量檢測結果

3組間血清及斑塊組織hs-CRP含量比較差異均有統計學意義（P<0.01）。模型對照組﹑黃連解毒湯組血清及斑塊組織hs-CRP含量顯著高于正常對照組（P<0.01），黃連解毒湯組血清及斑塊組織hs-CRP含量顯著低于模型對照組（P<0.01）。見表2。

表2 3組血清及斑塊組織hs-CRP含量比較 ±s

表2 3組血清及斑塊組織hs-CRP含量比較 ±s

*P<0.01與正常對照組比較；△P<0.01與模型對照組比較。

Hs-CRP含量血清 ρ∕(mg·L-1） 斑塊組織∕%正常對照組 8 0.96±0.42 1.08±0.56模型對照組 8 21.91±5.02* 45.21±11.12*黃連解毒湯組 8 7.23±4.02*△ 20.06±5.06*△組別 n

2.3 頸動脈病理學改變情況

肉眼可見正常對照組內膜光滑，無斑塊形成；模型對照組血管表面粗糙，內膜面散在不規則隆突斑塊，顏色為瓷白色；黃連解毒湯組血管內膜隆突斑塊減少，顏色淺黃。

3 討論

目前認為多種機制參與冠狀AS的發病，如脂質浸潤、炎癥反應、損傷應答等。高脂血癥是其發生的重要原因，尤其是高LDL-C，它可以激活內皮細胞和單核細胞，并使單核細胞吞噬脂質形成泡沫細胞，導致斑塊的形成[3]。同時A S的發生是一個非常復雜的過程，慢性炎癥反應貫穿A S發生發展全過程。炎癥會刺激單核細胞的遷移，平滑肌細胞的增殖，最終導致動脈粥樣硬化的形成和發展[4-5]。hs-CRP作為一種急時相蛋白，不僅可以由肝臟產生，而且可以由AS血管壁中的巨噬細胞，平滑肌樣細胞以及脂肪組織產生[6]。目前認為hs-CRP不僅是AS的標記物，而且是AS的一個獨立危險因素[7]。hs-CRP水平能夠有助于預測冠心病患者發生心肌梗死危險性以及其預后情況[8]。黃連解毒湯是中醫清熱解毒的名方。有報道稱其有調脂、抗炎、抗免疫作用，降低動脈粥樣硬化大鼠血sICAM-1，sVCAM-1水平，抑制炎癥反應，延緩動脈粥樣硬化發展[9]。相似的研究表明，黃連解毒湯能下調MCP-1/CCR2mRNA在主動脈的表達，減少局部炎癥反應，進而減輕對血管的損害[10]。同樣也有報道，黃連解毒湯有調脂功能，其高劑量能有效調節高脂血癥大鼠血脂代謝，降低 TC、TG、LDL-C，升高 HDL-C，提高機體抗氧化能力，抑制動脈粥樣硬化形成[11]。

本研究通過兔頸總動脈導管球囊損傷加高脂飲食建立兔AS模型，觀察黃連解毒湯對AS兔的血脂及血清、斑塊組織炎癥的影響。結果表明，黃連解毒湯具有降低AS兔的血清總膽固醇、甘油三酯、低密度膽固醇，升高高密度膽固醇的作用；可以減輕血清及斑塊組織的炎癥反應，使血清及斑塊組織中的hs-CRP水平表達下降，減少內膜面隆突斑塊形成。綜合上述，黃連解毒湯對高脂血癥兔具有調脂，抑制炎癥的進程，抗AS發展的作用。目前臨床上主要用他汀類、貝特類降脂治療冠心病；但這些藥物長期服用有較多的不良反應；黃連解毒湯作為天然來源的中藥材有多靶點抗AS且作用緩和、不良反應小等優勢。因此，黃連解毒湯對防治高脂血癥及其相關疾病具有良好的現實意義。

[1]Chekanov Hatak V S，Mortada M E，Tchekanov G V，et al.Pathologic and histoiogic resuits of eiectricai impuises in a rabbitmodeI of atheroscierosis：24-hour versus 8-hour regimen[J].JVasc Surg，2002，35（3）：554-562.

[2]于麗娜，徐延敏，趙輝.氯沙坦對兔動脈粥樣硬化炎癥因子的影響[J].中國動脈硬化雜志，2010，18（6）：377-378.

[3]藥立波.醫學分子生物學[M].北京：人民衛生出版社，2008：177-180.

[4]Ross H.Athemsclemsis： an intlammation disease[J]，N EnglMed,1999，340（2）：115-126.

[5]Libby P，Ridker PM，Maseri A.Inflammation and atherosclemsis[J].Circulation，2002，105（9）：l135-1143.

[6]Yasojima K，Sehwab C，Mc Geer EG，et a1.Generation of C-reactive protein and components in athemsclemtic plaques[J].Am JPathol，2001，158（3）：1039-1051.

[7]de Mast M P,Trlon A.C-reactive protein as a risk factor versus risk marker[J].Curr Opin Lipidol，2004，15（6）：651-657.

[8]SpeidlW S，Graf S，Homykewycz S，et a1.High-sensitivity C-reactive protein in the prediction of coronary events in patientswith premature coronary heartdisease[J].Am Heart J,2002,144（3）：449-455.

[9]李國強，黃萍，程穗茗，等.黃連解毒湯對動脈粥樣硬化大鼠血sICAM-1和sVCAM-1的影響[J].廣東醫學，2009，30（11）：1604-1606.

[10]郭重儀.黃連解毒湯對動脈粥樣硬化大鼠 MCP-1／CCR2通路 mRNA表達的干預作用[J].海峽藥學，2010，22（2）：30-32.

[11]張揚，金瑾，張蓮珠，等.黃連解毒湯對高脂血癥大鼠血脂及氧自由基代謝的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（2）：169-172.