嚴 珂 ,周細根 ,羅 勇 ,梁生林
(1.吉安市婦幼保健院藥劑室;2.井岡山大學醫學院藥理學教研室;3.井岡山大學醫學院2009級藥學本科班,江西 吉安 343000)
龍葵為茄科屬植物龍葵的全草,性寒﹑味苦﹑有小毒,具有清熱解毒﹑利水消腫等功效[1]。現代藥理研究表明,龍葵全草含多種甾體生物堿,包括澳洲茄邊堿、澳洲茄堿等[2],具有抗腫瘤[3-4]、抗菌[5-6]、保腎[7]、保肝[8]、提高免疫功能[9]、祛痰止咳[10]等作用。但龍葵的鎮痛作用少有報道。本研究探討龍葵水煎劑腹腔注射對小鼠熱板法致痛的鎮痛作用,旨在為進一步開發利用龍葵提供實驗依據。
1)動物:昆明種小鼠,體質量(22±2)g,雌性,由井岡山大學醫學實驗動物中心提供。
2)藥品與試劑:哌替啶注射液(宜昌人福藥業有限責任公司,規格:2 mL:100 mg,批號:021003),龍葵(2010年11月采于江西吉安,經井岡山大學醫學院藥學系彭才圣副教授鑒定為茄科屬植物龍葵),生理鹽水。
3)主要儀器:HSS-1B型恒溫浴槽(成都儀器廠生產),天平,秒表,注射器等。
1)龍葵水煎劑的制備:取切成小段的干燥龍葵50 g,用蒸餾水浸泡30 min,加10倍量蒸餾水(第一次多加2倍量)用文火煎煮3次,每次0.5 h,合并3次煎出液,靜置過濾去渣,濃縮為50 mL備用(即生藥質量濃度為1 g·mL-1,并以此作為高劑量組的給藥濃度,再用蒸餾水配制中劑量組的給藥濃度0.75 g·mL-1和低劑量組的給藥濃度 0.5 g·mL-1)。
2)哌替啶溶液的制備:用蒸餾水將哌替啶注射液配成 0.002 5 g·mL-1。
3)實驗儀器的設定:將HSS-1B型恒溫浴槽中的水槽蓋取掉,往水槽中加水至以放入鎮痛槽后水不溢出為準;鎮痛槽放入恒溫浴槽后用支承板上左右兩側的螺套和壓緊板壓住鎮痛槽;將水槽的出水及回水口用一根橡膠管連通;開啟電源開關;在電源接通的狀態下,將設定鈕子開關置于“設定”后,調節溫度調節旋鈕,直到顯示器顯示出所需要的55℃,設定完成后將設定鈕子開關置于“液溫”,儀器顯示溫度逐漸達到設定值,直至穩定顯示槽內實際液溫(55±0.1)℃[11-12]。
4)實驗動物的篩選與分組:將小鼠置于(55±0.1)℃鎮痛槽內,以舔后爪出現時間作為痛閾的指標。當出現舔后爪時,立即記錄時間(即痛閾值),然后取出小鼠。用此法篩選出痛閾值在5~30 s的雌性小鼠60只供實驗用。將篩選好的60只小鼠,按隨機數字表法分為5組,每組12只,即生理鹽水對照組,哌替啶溶液組,高、中、低劑量龍葵水煎劑組。
5)給藥與痛閾測定方法:生理鹽水對照組給予生理鹽水,哌替啶溶液組給予0.002 5 g·mL-1的哌替啶溶液,龍葵水煎劑高、中、低劑量組分別給予1﹑0.75﹑0.5 g·mL-1的龍葵水煎劑,均腹腔注射給藥,給藥量均為 0.1 mL·(10 g)-1。 于給藥前及用藥后 15、30、60 min測量各組小鼠痛閾值,如果用藥后放入鎮痛槽內60 s仍無反應,即將小鼠取出,其痛閾值按60 s計算。
應用SPSS 11.0統計軟件進行統計學處理。計量資料用±s表示,組間﹑組內比較采用t檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。
各組給藥前痛閾值比較差異均無統計學意義(P>0.05),哌替啶溶液組及高、中、低劑量龍葵水煎劑組給藥后15、30、60 min與生理鹽水對照組相同時點比較差異均有統計學意義(P<0.01)。給藥后15、30、60 min與自身給藥前比較:生理鹽水對照組差異無統計學意義(P>0.05),其余各組差異均有統計學意義(P<0.01)。見表1。
表1 各組給藥前后痛閾值比較 ±s,t/s

表1 各組給藥前后痛閾值比較 ±s,t/s
*P<0.01與生理鹽水對照組比較;△P<0.01與自身給藥前比較。
給藥后15 min 30 min 60 min生理鹽水對照組 12 17.48±3.57 17.44±5.97 17.12±4.30 17.88±4.38哌替啶溶液組 12 17.64±3.54 46.75±7.15*△ 38.62±6.64*△ 33.42±4.63*△龍葵水煎劑高劑量組 12 17.67±3.30 52.18±8.17*△ 52.74±7.56*△ 48.36±6.36*△龍葵水煎劑中劑量組 12 17.53±2.36 35.67±5.01*△ 43.68±4.45*△ 47.12±6.88*△龍葵水煎劑低劑量組 12 17.60±3.00 28.11±6.32*△ 30.33±4.41*△ 29.30±5.58*△組 別 n 給藥前
龍葵具有清熱解毒,利水消腫等功效?,F代藥理研究[3-10]表明,龍葵具有抗腫瘤、抗菌、保腎、保肝、提高免疫功能、祛痰止咳等作用。龍葵目前以民間應用為主,主要用于治療感冒發熱,牙痛,痢疾,泌尿系感染,乳腺炎,白帶,癌癥;外用治癰癤疔瘡,蛇咬傷等。
為探討龍葵是否具有鎮痛作用,本實驗采用熱板法疼痛模型對龍葵水煎劑進行了鎮痛作用的初步研究,實驗結果顯示,各劑量龍葵水煎劑明顯提高熱板法所致小鼠的痛閾值,與生理鹽水對照組比較和自身給藥前比較差異均有統計學意義,表明龍葵水煎劑具有明顯的鎮痛作用,為其進一步研究提供了初步的實驗依據。其鎮痛有效成份及作用機制有待于進一步研究。
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