針刺對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠腦組織bFGF表達(dá)的影響

李丹，鄒偉，王瓏，孫曉偉，滕偉

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，北京 100029;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

腦出血是常見病、多發(fā)病，是嚴(yán)重威脅著人類的生活質(zhì)量和健康的一類疾病。本實(shí)驗(yàn)的研究從針刺調(diào)控內(nèi)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子表達(dá)，探討針刺促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)的腦保護(hù)作用機(jī)制。本研究探討針刺對(duì)腦出血大鼠腦內(nèi)bFGF蛋白表達(dá)的影響，將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)試劑

bFGF兔抗大鼠多克隆抗體(美國(guó)Santa Cruz公司);BCA蛋白定量試劑盒(碧云天);茴拉西坦(憶立福，山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)有限公司，50mg/片)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)備及方法參考本課題組前期研究成果［1］。

2 結(jié)果

由表1可見，各組大鼠腦內(nèi)bFGF蛋白表達(dá)的Western印跡結(jié)果:空白組有少量表達(dá)。模型組在腦出血后6h表達(dá)量開始明顯增加，蛋白陽性信號(hào)持續(xù)增強(qiáng)，于3天達(dá)高峰，7天時(shí)仍有表達(dá)，與空白組比較，P＜0.01;針刺組各個(gè)時(shí)相點(diǎn)與模型組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);針刺組與西藥組比較，各個(gè)時(shí)相點(diǎn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 各組大鼠不同時(shí)相點(diǎn)血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達(dá)相對(duì)含量比較(s)

表1 各組大鼠不同時(shí)相點(diǎn)血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達(dá)相對(duì)含量比較(s)

注:針刺組與模型組比較，▲P＜0.01;針刺組與西藥組比較，●P＜0.05;西藥組與模型組比較，#P＜0.05;模型組與空白組比較，★P＜0.01。

組別 n 6h 1天 2天 3天 7天空白組 6 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02模型組 30 0.27 ±0.02★ 0.31 ±0.02★ 0.38 ±0.02★ 0.48 ±0.02★ 0.33 ±0.02★西藥組 30 0.29 ±0.02 0.32 ±0.02 0.39 ±0.01 0.49 ±0.03 0.36 ±0.02#針刺組 30 0.31±0.02▲● 0.35 ±0.02▲● 0.46±0.04▲● 0.55±0.02▲● 0.39 ±0.02▲●

3 討論

bFGF是一種廣譜的有絲分裂原，具有廣泛的細(xì)胞增殖效應(yīng)，它對(duì)廣泛的來源于中胚層和神經(jīng)外胚層的細(xì)胞具有明顯的促增殖作用，其靶細(xì)胞有成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞等。bFGF是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，可促進(jìn)神經(jīng)元的存活及突起生長(zhǎng)，對(duì)神經(jīng)起保護(hù)作用［2－3］。bFGF是一種具有多種生物活性的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，它的基本生物學(xué)作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂增殖，可增強(qiáng)有絲分裂活性。bFGF可促進(jìn)的神經(jīng)元的存活及突起生長(zhǎng)，對(duì)神經(jīng)保護(hù)的作用。其與相關(guān)聯(lián)的受體結(jié)合導(dǎo)致廣泛的細(xì)胞反應(yīng)，包括細(xì)胞增殖和分化、血管形成和抑制凋亡等。研究表明，bFGF在體內(nèi)、外對(duì)多種神經(jīng)元有維持生存和促進(jìn)生長(zhǎng)的作用，并能促進(jìn)受損神經(jīng)元的修復(fù)和再生。在培養(yǎng)的胎鼠海馬神經(jīng)元中加入bFGF可使神經(jīng)元成活時(shí)間增加和軸突延長(zhǎng)［4］，bFGF及其受體FGFR濃度的變化調(diào)節(jié)著膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的生長(zhǎng)［5］。正常腦組織中bFGF表達(dá)很少，腦組織缺血損傷后bFGF表達(dá)明顯增強(qiáng)。bFGF能改善血供，對(duì)抗缺血缺氧，減少腦水腫，促進(jìn)成纖維細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的分裂和增殖，促進(jìn)新生血管和突觸形成，改善新生神經(jīng)元突起的生長(zhǎng)，有助于神經(jīng)元抵御缺血性損傷;外源性給予bFGF可降低腦缺血后的腦梗死體積［6］。bFGF對(duì)早期神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育分化的影響主要表現(xiàn)在促使神經(jīng)干細(xì)胞存活、增殖并分化［7］。

通過本實(shí)驗(yàn)的研究發(fā)現(xiàn)，各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達(dá)的Western blot檢測(cè)結(jié)果:在腦出血后6h模型組表達(dá)量顯著增加，蛋白陽性信號(hào)增強(qiáng)，于3天達(dá)高峰，7天時(shí)仍有表達(dá);針刺可上調(diào)腦出血后bFGF的水平，針刺組與模型組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);針刺組與西藥組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們可以看到，在腦出血的過程中，針刺可能通過bFGF表達(dá)的增強(qiáng)，進(jìn)而保護(hù)神經(jīng)元，營(yíng)養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)了其促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)的腦保護(hù)作用。而且bFGF與腦出血后的缺血性損傷、神經(jīng)元的修復(fù)有密切關(guān)系［8］。綜上所述，“百會(huì)”透“曲鬢”針刺法可能通過促進(jìn)腦出血后bFGF蛋白表水平，從而減輕神經(jīng)元損傷并促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)與再生。

［1］李丹，鄒偉，王瓏，等.針刺對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血急性期大鼠腦組織Nestin表達(dá)的影響［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2010，38(2):60－62.

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［8］鄒偉，王瓏，孫曉偉，等.頭針透刺對(duì)腦出血大鼠腦組織IL－6表達(dá)影響的研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2012，40(1):81 －83.