肇東苜蓿田海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG殘留高效液相色譜分析試驗研究

陳效杰 薛 勇孫 睿邵 紅 姜 成 朱德全

（1.黑龍江農業職業技術學院 黑龍江 佳木斯 154007；2.佳木斯大學生命科學學院 黑龍江 佳木斯 154007）

啶嘧磺隆屬磺酰脲類除草劑，主要抑制產生側鏈氨基酸、亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸的前驅物乙酰乳酸合成酶的反應。海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG為內吸性傳導型除草劑，可被雜草莖葉和根部吸收，并傳導至整株雜草發揮作用[1]。

1 試劑與儀器

甲醇：色譜純甲醇（HPLC級試劑）；蒸餾水：新蒸二次蒸餾水；磷酸、磷酸二氫鉀：分析純；啶嘧磺隆標準品:≥98.8%；過濾器:濾膜孔徑為0.45μm；微量進樣器:10μL；色譜工作站：N2000色譜工作站（浙江大學智達信息有限公司）；超聲波清洗器：超聲波清洗器（杭州賽智科技有限公司）；高效液相色譜儀：LC-10Tvp等度高效液相色譜儀（杭州賽智科技有限公司）；海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG。

2 LC-10Tvp等度高效液相色譜儀操作條件

流動相：甲醇-水(pH值4.0，用磷酸二氫鉀、磷酸調節)(體積比75：25)，流量：1.0mL/min，柱溫：室溫，檢測波長：228nm，進樣體積：20mL，保留時間：海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG 4.208min。

3 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG殘留高效液相色譜分析測定

3.1 高效液相色譜標樣溶液的配制

稱海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG0.07g(精確至0.0002g)，標樣置于100mL容量瓶中，加入適量甲醇溶解，置此容量瓶于超聲波浴槽中約10min，取出降至室溫用甲醇定容，搖勻，再用0.45μm濾膜過濾,濾液待測[2]。

3.2 高效液相色譜試樣溶液的配制

稱海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG0.02g(準確至0.0002g)試樣置于50mL容量瓶中,加入適量甲醇溶解,容量瓶置于超聲波浴槽中約10min，取出降至室溫用甲醇定容，搖勻，再用0.45μm濾膜過濾,濾液待測。

3.3 高效液相色譜試樣溶液的測定

LC-10Tvp等度高效液相色譜儀操作條件下，LC-10Tvp等度高效液相色譜儀待基線穩定后，連續注入數針標準溶液,計算各針相對響應值，直至相鄰兩針海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面積變化小于1.5%，按標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進行測定[3]。

3.4 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG計算

海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG殘留高效液相色譜分析測定，將測得的兩針試樣溶液和試樣溶液前后兩針標準溶液中的海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的峰面積分別進行平均。以質量分數表示的海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的含量(X)按下式計算:

X（%）=(A2×m1×P)/(A1×m2) 式中：

A1—標準溶液中海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG峰面積的平均值；

A2—試樣溶液中海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG峰面積的平均值；

m1—海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG標樣的質量（g）；

m2—海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG試樣的質量（g）；

P—標準品中海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的質量分數（%）[4]。

4 結果與討論

4.1 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG流動相的選擇

4.1.1 流動相的選擇原則

①由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。②三倍規則：每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察各個峰的分離情況。③粗調轉微調：當分離達到一定程度，應將有機溶劑10%的改變量調整為5%，并據此規則逐漸降低調整率，直至各組分的分離情況不再改變[5]。

4.1.2 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG流動相的選擇

海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG分析過程中，遵守流動相的選擇原則能得到好的峰形且簡便快捷，通過海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG多次配比試驗，最后發現甲醇：水=70：30(V/V)的體積比為流動相，流速為1.0mL/min時,海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG分析時間短，出峰尖銳對稱保留時間適合要求，樣品中加入磷酸二氫鉀、磷酸可使海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG有效成分及其雜質完全分開。

4.2 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG檢測波長的選擇

海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的判定，往往并不通過外標法或內標法測定，而采用面積歸一化法結合其它測定結果。

4.2.1 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品采用其它手段，確認主體是所需化學結構

4.2.2 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品很純條件下，用頂空色譜法測定殘留溶劑

4.2.3 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品中游離的水分，一般要求小于0.2%，在液相色譜中無法測定其含水量

4.2.4 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品中灼燒殘渣或灰分，在液相中無法測定無機鹽類

4.2.5 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品用離子色譜測定可能存在的一些小分子有機酸

4.2.6 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品用其它輔助手段，如熔點、折光率、元素分析等[6]

海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG經全波長掃描，發現在228nm處海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG有較強吸收峰，最終選定228 nm作為檢測波長。

4.3 海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG檢測方法的線性相關性測定

海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG在檢測波長228nm處，移取海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG樣品質量濃度0.750 g/L的標樣溶液5、10、15、20、30mL稀釋至50mL，然后分別進樣。測得海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的線性方程為y=668.22x+3408.8，相關系數為r=0.9998。

5 結論

海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的試驗分析方法，從試驗分析結果來看有定量準確與重復性好及非常好的線性關系和非常高的準確度及精密度，海正綠坊25%啶嘧磺隆WDG的試驗分析方法操作簡便及快速，是肇東苜蓿進行質量檢測理想的分析方法。

［1］http://www.yuanlin365.com/product/20621.shtml[OL].

［2］邵建果，楊俊柱.25%啶嘧磺隆水分散粒劑的反相高效液相色譜測定[J].安徽化工，2008，2:64-65.

［3］廖戎，吳軍.除草劑啶嘧磺隆原藥高效液相色譜分析[J].農藥,2008,9:659-660.

［4］閆好民，張云楓.氟嘧磺隆高效液相色譜分析方法的研究[J].浙江化工，2012，7:33-34.

［5］http://bbs.antpedia.com/thread-21408-1-1.html[OL].

［6］http://www.360doc.com/content/11/0317/09/2867540_101863160.shtml[OL].