潘慶珍
(廣州市荔灣區(qū)婦幼保健院,廣東 廣州 510375)
又稱為血常規(guī)檢驗,主要是指對血液中的紅細(xì)胞(RBC)、白細(xì)胞(WBC)、血小板(PLT)以及血紅蛋白(HGB)及相關(guān)的數(shù)據(jù)進行技術(shù)檢測并分析。血液細(xì)胞檢驗是當(dāng)前各大醫(yī)院檢驗科室中最為多見的檢驗內(nèi)容,也是臨床醫(yī)療診斷最為常用的檢驗方法。傳統(tǒng)的血液檢驗方法主要是采用人工顯微鏡對血細(xì)胞進行檢驗,現(xiàn)代的檢驗方法主要是采用自動血液分析儀對血液細(xì)胞進行檢驗,檢驗自動化、智能化程度不斷提高。然而,無論是傳統(tǒng)的鏡檢還是現(xiàn)代的血液分析儀,要獲取可靠、準(zhǔn)確的血液分析實驗結(jié)果,都需要充分考慮實驗室血液檢驗中的各種影響因素,并采取相應(yīng)的質(zhì)量控制措施。
在進行標(biāo)本制備的過程中必須要保證血液標(biāo)本的各種細(xì)胞的形態(tài)保持完整,細(xì)胞的形態(tài)一旦遭到破壞,相關(guān)的測量治療會出現(xiàn)差錯,影響檢驗結(jié)果。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量檢驗結(jié)果的前提條件。
臨床上,主要是采集末梢毛細(xì)血管血液以及靜脈血作為血液細(xì)胞檢驗的標(biāo)本。靜脈血的血樣能最準(zhǔn)確地反映人體的病變情況,是最為可靠的血液標(biāo)本。與手指血相比,靜脈血的準(zhǔn)確性以及可重復(fù)性都較高,白細(xì)胞計數(shù)以及血小板計數(shù)準(zhǔn)確率都較高。基于此,在采集血液檢驗的標(biāo)本時盡量采用靜脈血作為標(biāo)本。此外,不允許從病人輸液的滯留針處或者是輸液靜脈同側(cè)血管中采集到的血液作為檢驗標(biāo)本,防止上述所采的血液稀釋,影響血液檢驗的準(zhǔn)確率。同時,用止血帶壓迫止血的時間不宜超過1分鐘,防止患者淤血以及血液濃縮的發(fā)生,導(dǎo)致血液檢驗結(jié)果不準(zhǔn)確。
在采集到血液標(biāo)本后,必須要對標(biāo)本進行抗凝劑抗凝處理,EDTA(EDTA- Na2,EDTA- K2,EDTA-K3)是目前使用較為普遍的抗凝劑,其對血小板以及白細(xì)胞形態(tài)的影響較小,適合用于血液細(xì)胞的檢驗。除了血液生理性因素以及采取部位等采血因素的影響外,血液標(biāo)本的質(zhì)量主要取決于抗凝劑與血液之間的比例。當(dāng)抗凝劑的量不足時血,血漿中會出現(xiàn)微凝血塊,使用血細(xì)胞分析儀對具有微凝血塊的標(biāo)本進行檢驗時,微凝血塊很可能會導(dǎo)致儀器阻塞,同時也會影響到實驗指標(biāo)的真確性。當(dāng)血液得比例過低,而抗凝劑的劑量過多,白細(xì)胞的形態(tài)會發(fā)生改變,其改變的程度與抗凝劑的使用時間及濃度有關(guān),白細(xì)胞形態(tài)改變的程度越高對檢驗指標(biāo)的準(zhǔn)確性的影響越嚴(yán)重。抗凝劑的最佳濃度應(yīng)控制在1.5mg/ml。
血液主要是由血漿以及血細(xì)胞組成的紅色粘稠混懸液。在對白細(xì)胞進行計數(shù)檢驗時,直接對白細(xì)胞進行血液計數(shù)是非常困難的,因而要在計數(shù)檢驗前要對血液進行合理的稀釋處理。根據(jù)血細(xì)胞分析儀的基本原理,在對血細(xì)胞分析儀進行設(shè)計時,要將血液的計數(shù)容量及血液的稀釋倍數(shù)充分考慮進去,作為重要的設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)。在對血液進行稀釋時,應(yīng)按照稀釋比例(1∶N),將血液放入到稀釋液中形成血液細(xì)胞稀釋標(biāo)本,以流動檢測的方法測出一定量(V)的稀釋標(biāo)本中的血細(xì)胞數(shù)(T),經(jīng)換算后得出血液中的血細(xì)胞濃度 L(L=T×N/V)。當(dāng)稀釋的倍數(shù)過高時,會導(dǎo)致一定測量容量中血細(xì)胞的數(shù)量過少,這樣會對血液細(xì)胞檢驗的測量精度造成嚴(yán)重影響。當(dāng)稀釋的倍數(shù)過低時,會導(dǎo)致血液細(xì)胞排隊經(jīng)過傳感器,造成血液細(xì)胞的重合缺損。基于此,適宜的稀釋倍數(shù)是提高血液細(xì)胞檢測質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。從目前情況來看,HGB以及WBC的稀釋倍數(shù)最宜控制在1∶250左右,PLT 以及RBC的稀釋倍數(shù)應(yīng)盡量控制在1∶10000~1∶30000。
抗凝劑因使用濃度以及使用時間的不同,會對血細(xì)胞的形態(tài)造成嚴(yán)重影響。國內(nèi)外研究顯示,用EDTA抗凝劑對靜脈血液標(biāo)本進行抗凝時,在血液標(biāo)本采集后的5min內(nèi)或者是30min以后,在室溫下保存8h內(nèi)對其進行檢測,可以獲得最佳的檢驗結(jié)果。如果不需要對白細(xì)胞或者血小板進行分類的確切數(shù)據(jù),血液細(xì)胞標(biāo)本在2~8℃的環(huán)境下能保存24h。預(yù)稀釋的血液細(xì)胞標(biāo)本應(yīng)盡可能在制備之后的10min內(nèi)進行檢測。如果在血液細(xì)胞稀釋液中添加有細(xì)胞穩(wěn)定劑,預(yù)稀釋血液標(biāo)本在常溫下保存的時間也不可以超過4h。
為了更好地提高血液細(xì)胞檢驗的質(zhì)量,現(xiàn)代化的醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)以先進的質(zhì)量控制以及管理理念為指導(dǎo),建立健全實驗室檢驗質(zhì)量控制機制,明確各工作崗位的檢驗人員的職責(zé)權(quán)限以及合理的獎懲制度。此外,還要制定嚴(yán)格的實驗室操作標(biāo)準(zhǔn),以規(guī)范實驗人員的檢驗操作,使血液細(xì)胞檢驗工作的質(zhì)量控制有據(jù)可循,為血液細(xì)胞檢驗的質(zhì)量控制提供技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。
優(yōu)化血液細(xì)胞檢驗工作的流程,可以有效提高血液細(xì)胞檢驗的質(zhì)量,為血液細(xì)胞檢驗的質(zhì)量控制奠定基礎(chǔ)。醫(yī)院在對血液細(xì)胞檢驗結(jié)果進行質(zhì)量控制時,應(yīng)充分認(rèn)識到檢驗工作流程對檢驗質(zhì)量的提高以及質(zhì)量控制的重要性。醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)根據(jù)本院的血液細(xì)胞檢驗設(shè)備為基礎(chǔ),優(yōu)化檢驗工作流程,促進醫(yī)院對血液細(xì)胞檢驗質(zhì)量控制的順利開展。
血液細(xì)胞檢驗工作主要包括血液細(xì)胞標(biāo)本采集工作、血液細(xì)胞標(biāo)本的稀釋工作、血液細(xì)胞標(biāo)本儲存工作等。醫(yī)療機構(gòu)必須要針對設(shè)備的具體情況對血液細(xì)胞各個工作內(nèi)容進行質(zhì)量控制,確保血液細(xì)胞檢驗工作的質(zhì)量。
血液細(xì)胞檢驗過程的質(zhì)量控制對血液細(xì)胞的檢驗質(zhì)量有著重要的決定作用,在進行細(xì)胞檢驗前,應(yīng)對儀器進行科學(xué)、準(zhǔn)確地校驗,并嚴(yán)格按照操作規(guī)程要求進行操作,以此使檢驗質(zhì)量滿足臨床診斷的要求,保證血液檢驗結(jié)果的精確度。
①血液分析儀細(xì)胞計數(shù)的最合適溫度應(yīng)保持在18~22℃之間,當(dāng)溫度過高或者過低時,都可能會對測量結(jié)果有嚴(yán)重影響。②在打開血液分析儀后,首先要做實驗室的質(zhì)控,并參與實驗室間的質(zhì)評。實驗室內(nèi)的質(zhì)量控制是血液細(xì)胞檢驗質(zhì)量控制的最重要的環(huán)節(jié),其能確保血液分析儀測量值的穩(wěn)定性及準(zhǔn)確性。實驗室間的質(zhì)量測評能有效解決實驗室之間的協(xié)調(diào)以及檢驗準(zhǔn)確性的問題,保證成批血液標(biāo)本測量記過不會產(chǎn)生明顯誤差的重要環(huán)節(jié)。③嚴(yán)格依照實驗室操作程序?qū)x器進行操作,并采取相應(yīng)的保養(yǎng)措施對儀器進行定期保養(yǎng)、清洗及濃縮沖洗,避免儀器發(fā)生堵塞現(xiàn)象。④根據(jù)參數(shù)變化以及直方圖確定細(xì)胞計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性,所分析的準(zhǔn)確性不高時,必須要用顯微鏡進行復(fù)查。⑤分析參數(shù)與實驗結(jié)果之間的關(guān)系,將實驗結(jié)果與臨床分析相比較,判斷二者是否相符,如果出現(xiàn)異常結(jié)果,應(yīng)主動與臨床實踐相聯(lián)系,以做出正確的判斷。
要定期對血液細(xì)胞的檢驗結(jié)果進行評價。臨床的醫(yī)護人員一般對患者的病情變化以及病程最為了解,因而必須要征求臨床醫(yī)護人員的意見,判斷檢驗結(jié)果的正確性,并針對醫(yī)護人員提出的要求不斷改進檢驗工作,以提高血液細(xì)胞檢驗結(jié)果的整體質(zhì)量,確保檢驗結(jié)果對臨床診斷、治療提供準(zhǔn)確、科學(xué)的數(shù)據(jù)。
影響臨床血液細(xì)胞檢驗結(jié)果的原因較多,要想取得科學(xué)、準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果,對實驗過程中的每個步驟都應(yīng)進行嚴(yán)格的監(jiān)督及管理,確保實驗室檢驗操作規(guī)范化。加大對實驗室血液細(xì)胞檢驗注意事項的重視,提高對檢驗結(jié)果質(zhì)量控制方面的分析、判斷、計算以及表達能力,要建立健全完整的質(zhì)量控制機制,建立實驗室檢驗人員獎懲制度,明確其職責(zé)權(quán)限,保證實驗結(jié)果的科學(xué)性以及準(zhǔn)確性,為臨床診斷、治療以及療效評價提供可靠、有效、準(zhǔn)確的信息[1-5]。
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