奇異變形桿菌蛋白質雙向電泳條件的優化及評價

謝 靜，賈庶捷，林 於

（重慶醫科大學中醫藥學院生藥學教研室，重慶400016）

奇異變形桿菌蛋白質雙向電泳條件的優化及評價

謝 靜，賈庶捷，林 於

（重慶醫科大學中醫藥學院生藥學教研室，重慶400016）

目的：優化針對奇異變形桿菌蛋白質組學研究的雙向電泳 （2－DE）條件及其相關技術體系，闡明樣品處理過程中超聲功率、振搖時間和上樣量對2－DE圖譜的影響。方法：選取1株奇異變形桿菌，分別采用超聲功率為130W和80W超聲法裂解菌體提取總蛋白，將2種方法提取的蛋白在同一條件下進行等電聚焦和聚丙烯酰胺凝膠電泳 （SDS－PAGE）；超聲功率為80W提取的奇異變形桿菌總蛋白，分別取上樣量1和2mg，在同一條件下17cm膠條上進行雙向電泳。結果：超聲功率為130W處理的樣本得到的2－DE圖譜中蛋白斑點較少，而超聲功率為80W處理的樣本蛋白點多、清晰且重復性好。上樣量為2mg得到的圖譜中橫縱條紋明顯，蛋白斑點分離度較差，而上樣量為1mg時橫縱條紋較少，蛋白斑點分離度較好。結論：采用低功率超聲且較少上樣量處理樣品能得到較好的2－DE圖譜。

奇異變形桿菌；蛋白質組學；雙向電泳

奇異變形桿菌 （Proteusmirabilis，PM）作為腸桿菌科的一員，是復雜性尿路感染的主要病因［1］。奇異變形桿菌和普通變形桿菌可引起人的原發性和繼發性感染。近年來關于奇異變形桿菌基因組研究發展迅猛，國內外相繼發表了許多關于其基因組學研究成果。蛋白質不僅是基因的表達產物而且作為基因功能的最終體現者，蛋白質組學已成為功能基因組學的主要研究內容之一［2］。……