谷氨酰胺對(duì)肉雞小腸組織結(jié)構(gòu)和吸收能力的影響

路 靜 李文立 姜建陽(yáng) 李方正 任慧英

(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，青島 266109)

家禽是熱應(yīng)激(heat stress)敏感動(dòng)物，熱應(yīng)激是家禽生產(chǎn)中普遍存在的問(wèn)題，對(duì)家禽生產(chǎn)具有重要影響，隨著集約化、高密度飼養(yǎng)方式的發(fā)展和全球性氣候變暖，熱應(yīng)激對(duì)家禽的危害越來(lái)越嚴(yán)重。研究表明，高溫應(yīng)激使肉雞空腸絨毛高度、絨毛表面積和絨毛體積均顯著降低［1］。高溫應(yīng)激時(shí)家禽攝入的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能滿足需要，腸黏膜絨毛高度降低，而絨毛高度的下降則降低了小腸的吸收能力［2］。谷氨酰胺(glutamine，Gln)是動(dòng)物在應(yīng)激條件下所需要的一種重要調(diào)控因子，具有抗應(yīng)激、抗感染、抗氧化、增強(qiáng)免疫力等功能。一般情況下，Gln為非必需氨基酸，但當(dāng)動(dòng)物處于應(yīng)激或病理狀態(tài)時(shí)，內(nèi)源合成的Gln不能滿足需要，這時(shí)Gln就變成了必需氨基酸，必須從外界攝取才可防止機(jī)體代謝的失衡［3］。眾多研究表明，Gln是小腸黏膜代謝的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，Gln缺乏可導(dǎo)致小腸黏膜萎縮、絨毛變稀變矮，屏障功能下降。補(bǔ)充Gln能顯著增加大鼠和仔雞腸黏膜的重量、DNA和RNA含量，恢復(fù)絨毛高度、黏膜表面積和隱窩深度，加快腸上皮細(xì)胞更新速度等，從而恢復(fù)并維持黏膜形態(tài)和功能的完整性［4－5］。Gln是機(jī)體的一種重要原料來(lái)源，也是一些快速分裂細(xì)胞的主要能量來(lái)源，可以抵抗外來(lái)的毒害作用，特別在維持小腸和免疫系統(tǒng)的正常形態(tài)和功能方面有著重要的作用［6－7］。但關(guān)于Gln在家禽熱應(yīng)激時(shí)對(duì)小腸組織結(jié)構(gòu)和吸收能力影響的報(bào)道不多。為此，本試驗(yàn)以對(duì)熱應(yīng)激特別敏感的肉雞為研究對(duì)象，探討外源性Gln對(duì)熱應(yīng)激條件下肉雞的小腸組織結(jié)構(gòu)和吸收能力的影響，為Gln作為抗熱應(yīng)激添加劑在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供一定依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與基礎(chǔ)飼糧

試驗(yàn)用Gln購(gòu)自保齡寶生物股份有限公司，食品級(jí)，有效成分含量為99%。基礎(chǔ)飼糧采用玉米－豆粕型飼糧，參照美國(guó)NRC(1994)家禽營(yíng)養(yǎng)需要量中推薦的肉雞飼糧營(yíng)養(yǎng)水平設(shè)計(jì)配方，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì)

選擇1日齡科寶－500肉雞240只，按體重相近的原則分為6個(gè)處理，每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂玉米－豆粕型基礎(chǔ)飼糧，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組為試驗(yàn)組，分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0.4%、0.8%、1.2%、1.6%和2.0%Gln的試驗(yàn)飼糧，試驗(yàn)于2009年7月14日至2009年8月24日進(jìn)行，預(yù)試期2周(1～14日齡)，正試期4周(15～42日齡)。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采用籠養(yǎng)方式，自由采食和飲水，定期清理糞便，24 h光照。正試期的熱應(yīng)激模型［8］如下:每天07:00開(kāi)始升溫，到09:00升至35℃左右，09:00—17:00維持(35±2)℃ 8 h，17:00開(kāi)始降溫，到19:00降至30℃左右，直至次日07:00，溫度維持在(30±2)℃12 h。采用電熱管加熱的升溫方式，用溫控儀控制溫度。采用加濕器和噴水的方法控制雞舍濕度在70%～80%。用最高最低溫度表和干濕球溫度計(jì)記錄全天的溫度和濕度。

雞的免疫接種按常規(guī)進(jìn)行，其他管理按照《肉雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)》進(jìn)行。隨時(shí)觀察記錄試驗(yàn)雞的生長(zhǎng)狀況。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets(air－dry basis) %

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

分別于28、42日齡以重復(fù)為單位進(jìn)行空腹稱重，計(jì)算15～28日齡、29～42日齡、15～42日齡的平均日增重。按照“清箱底法”統(tǒng)計(jì)飼料消耗，并計(jì)算平均日采食量和料重比。

1.4.2 小腸組織結(jié)構(gòu)觀察

分別于28、42日齡清晨喂料前，每個(gè)重復(fù)按平均體重選3只雞，頸靜脈放血法處死。打開(kāi)腹腔，分別截取十二指腸、空腸、回腸各1段，迅速放入10%甲醛固定液中，待制作組織切片。組織切片的制作過(guò)程如下:按常規(guī)組織切片制作要求，將固定的標(biāo)本經(jīng)水洗、脫水、透明、浸蠟、包埋等處理后，在室溫下切成約10 μm厚的切片，用蘇木精－伊紅染色法染色后制成組織切片。在各組織切片中選出典型視野，采用熒光倒置顯微鏡及顯微圖像分析系統(tǒng)(日本Nikon TE－2000)，測(cè)量出各段小腸的絨毛高度、絨毛寬度、固有層厚度和隱窩深度。

1.4.3 小腸吸收能力——木糖吸收試驗(yàn)

分別在28和42日齡進(jìn)行試驗(yàn)，各組分別取4只雞禁食禁水2 h，準(zhǔn)確稱重，然后在5 min內(nèi)按每千克體重口服10%的D－木糖溶液1 mL，1 h后采血5 mL，肝素鈉抗凝。血樣3 000 r/min離心15 min，取血漿于－20℃保存，采用間苯三酚比色法測(cè)定血漿中D－木糖濃度。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0軟件中單因素方差分析(One－way ANOVA)進(jìn)行顯著性分析，LSD法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可見(jiàn)，15～28日齡，各試驗(yàn)組的平均日增重、平均日采食量、料重比均與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；29～42日齡，平均日增重各試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其中2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)；平均日采食量各試驗(yàn)組均在一定程度上高于對(duì)照組，其中2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，0.4%、0.8%、1.6%Gln組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；料重比各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，其中1.2%Gln組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。

在整個(gè)試驗(yàn)期(15～42日齡)，各試驗(yàn)組的平均日增重均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其中2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)；各試驗(yàn)組的平均日采食量均在一定程度上高于對(duì)照組，其中2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，0.4%、1.6%Gln組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；各試驗(yàn)組的料重比均在一定程度上低于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞小腸組織結(jié)構(gòu)的影響

2.2.1 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞十二指腸組織結(jié)構(gòu)的影響

由表3可見(jiàn)，28日齡時(shí)，絨毛高度各試驗(yàn)組均高于對(duì)照組，0.4%Gln組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，0.8%、1.2%、1.6%、2.0%Gln 組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，其中2.0%Gln組最高，比對(duì)照組提高了51.7%；絨毛寬度、固有層厚度、隱窩深度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)。

42日齡時(shí)，絨毛高度各試驗(yàn)組均在一定程度上高于對(duì)照組，但僅1.2%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，比對(duì)照組提高了24.7%，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；絨毛寬度各試驗(yàn)組均極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，其中1.6%Gln組最低，比對(duì)照組降低了21.6%，其次為0.4%、1.2%Gln組；固有層厚度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)；隱窩深度各試驗(yàn)組均低于對(duì)照組，其中0.8%、1.2%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，0.4%、1.6%、2.0%Gln組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。以上可知，42日齡時(shí)Gln以添加量為1.2%時(shí)效果較好，Ⅰ組(對(duì)照組)和Ⅳ組(1.2%Gln組)42日齡肉雞十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

2.2.2 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞空腸組織結(jié)構(gòu)的影響

由表4可見(jiàn)，28日齡時(shí)，絨毛高度各試驗(yàn)組均在一定程度上高于對(duì)照組，0.8%、1.2%、1.6%、2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，其中2.0%Gln組最高，比對(duì)照組提高了53.6%，但0.4%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；絨毛寬度和固有層厚度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)；隱窩深度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但僅有0.4%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，比對(duì)照組降低了33.3%，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。

42日齡時(shí)，絨毛高度各試驗(yàn)組均在一定程度上高于對(duì)照組，其中1.2%、1.6%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，2.0%Gln組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，但0.4%、0.8%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；絨毛寬度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，0.4%、1.2%、1.6%、2.0%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，其中1.2%Gln組最低，比對(duì)照組降低了19.6%，但0.8%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；固有層厚度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但僅0.4%、1.2%Gln組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；隱窩深度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但僅1.6%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，比對(duì)照組降低了27.6%，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。以上可知，42日齡時(shí)Gln以添加量為1.2%時(shí)效果較好，Ⅰ組和Ⅳ組42日齡肉雞空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖2。

表2 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of Gln on growth performance of broilers under heat stress

表3 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞十二指腸組織結(jié)構(gòu)的影響Table 3 Effects of Gln on duodenum morphological structure of broilers under heat stress μm

圖1 Ⅰ組和Ⅳ組42日齡肉雞十二指腸形態(tài)結(jié)構(gòu)Fig.1 Duodenum morphological structure of 42－day－old broilers in groupsⅠ and Ⅳ (40 ×)

表4 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞空腸組織結(jié)構(gòu)的影響Table 4 Effects of Gln on jejunum morphological structure of broilers under heat stress μm

圖2 Ⅰ組和Ⅳ組42日齡肉雞空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)Fig.2 Jejunum morphological structure of 42－day－old broilers in groupsⅠ and Ⅳ (40 ×)

2.2.3 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞回腸組織結(jié)構(gòu)的影響

由表5可見(jiàn)，28日齡時(shí)，絨毛高度各試驗(yàn)組均在一定程度上高于對(duì)照組，0.4%、1.2%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，其中1.2%Gln組最高，比對(duì)照組提高了56.3%，2.0%Gln組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，0.8%、1.6%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；絨毛寬度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，其中0.8%、1.2%、1.6%Gln組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，但0.4%、2.0%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；固有層厚度和隱窩深度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)。

42日齡時(shí)，絨毛高度各試驗(yàn)組均在一定程度上高于對(duì)照組，其中0.8%、1.2%、1.6%、2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，但0.4%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；絨毛寬度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，其中1.2%、1.6%、2.0%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，但0.4%、0.8%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；固有層厚度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，但僅有0.8%、1.2%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)；隱窩深度各試驗(yàn)組均在一定程度上低于對(duì)照組，0.8%、1.2%、1.6%、2.0%Gln組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，其中1.6%Gln組最低，比對(duì)照組降低了43.5%，但0.4%Gln組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。以上可知，42日齡時(shí)Gln以添加量為1.2%時(shí)效果較好，Ⅰ組和Ⅳ組42日齡肉雞回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖3。

表5 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞回腸組織結(jié)構(gòu)的影響Table 5 Effects of Gln on ileum morphological structure of broilers under heat stress μm

圖3 Ⅰ組和Ⅳ組42日齡肉雞回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)Fig.3 Ileum morphological structure of 42－day－old broilers in groupsⅠ and Ⅳ (40 ×)

2.3 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞小腸吸收能力的影響

由表6可見(jiàn)，28日齡時(shí)，各試驗(yàn)組血漿D－木糖濃度均在一定程度上高于對(duì)照組，但僅2.0%Gln組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。42日齡時(shí)，各試驗(yàn)組血漿D－木糖濃度均在一定程度上高于對(duì)照組，但僅1.2%Gln組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其余各試驗(yàn)組與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)。

表6 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞血漿D-木糖濃度的影響Table 6 Effects of Gln on plasma D－xylose concentration of broilers under heat stress mmol/L

3 討論

3.1 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞生長(zhǎng)性能的影響

在高溫環(huán)境中肉雞的采食量降低，飼料轉(zhuǎn)化率變差，生長(zhǎng)速度減慢［9］。諸多研究表明飼糧中添加Gln能提高熱應(yīng)激動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。黃冠慶等［10］研究表明，高溫下在黃羽肉雞飼糧中添加Gln能不同程度地提高其平均日增重。戴四發(fā)等［11］試驗(yàn)表明，飼糧中添加外源性Gln可以有效緩解熱應(yīng)激給肉雞生產(chǎn)帶來(lái)的對(duì)生長(zhǎng)性能、部分消化酶活性和小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的負(fù)面影響，并使絕大部分指標(biāo)接近無(wú)熱應(yīng)激環(huán)境下的對(duì)照組，且不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Gln能緩解熱應(yīng)激可能與其特殊的生理功能有關(guān)，肉雞在熱應(yīng)激狀態(tài)下對(duì)Gln的需要量可能增加，而機(jī)體合成量不能滿足其需要，這時(shí)補(bǔ)充外源Gln可滿足其需要，從而維持肉雞在高溫下的小腸功能和免疫機(jī)能的正常，使肉雞健康生長(zhǎng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，熱應(yīng)激條件下在飼糧中添加一定水平的Gln有利于提高肉雞后期(29～42日齡)的平均日采食量和平均日增重，降低料重比，且以1.2%Gln的添加效果最佳，但對(duì)前期(15～28日齡)的生長(zhǎng)性能影響不顯著；從整個(gè)試驗(yàn)期來(lái)看，飼糧中添加Gln提高了熱應(yīng)激肉雞平均日增重和平均日采食量。Gln在前期的促生長(zhǎng)作用不如后期的可能原因是，在試驗(yàn)前期，肉雞剛進(jìn)入熱應(yīng)激階段，對(duì)熱應(yīng)激比較敏感，機(jī)體的各種機(jī)能產(chǎn)生了較大的變化，尤其是小腸的結(jié)構(gòu)和功能。Mecormack等［12］研究表明由Gln代謝產(chǎn)生的鳥(niǎo)氨酸是多胺合成的重要前體，多胺在小腸細(xì)胞的增殖分化、受損腸上皮的修復(fù)等過(guò)程中都有重要的作用，這時(shí)大部分的外源性Gln被用于抵抗應(yīng)激作用和修復(fù)自身的損傷或用于補(bǔ)充一些快速分裂細(xì)胞的能量等，而不是用于促進(jìn)生長(zhǎng)性能，所以早期的促生長(zhǎng)效果不佳。本試驗(yàn)中由于前期的修復(fù)作用而使Gln在后期的促生長(zhǎng)效果較顯著。由整個(gè)試驗(yàn)期可以看出，當(dāng)Gln添加水平在0.4%、0.8%、1.2%、1.6%時(shí)各試驗(yàn)組的平均日增重和平均日采食量相差不大，但當(dāng)添加水平達(dá)到2.0%時(shí)平均日增重和平均日采食量急劇增加，可能是因?yàn)橐徊糠諫ln用于修復(fù)熱應(yīng)激造成的損傷，多余的Gln通過(guò)參加體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝而被轉(zhuǎn)化為機(jī)體的物質(zhì)組成部分，或參與機(jī)體的能量代謝，為機(jī)體生長(zhǎng)提供能量，使生長(zhǎng)性能顯著增加。

3.2 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞小腸組織結(jié)構(gòu)的影響

小腸結(jié)構(gòu)的正常與否是影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收和動(dòng)物生長(zhǎng)的重要因素。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收主要依靠小腸絨毛。絨毛寬度與絨毛密度成反比，絨毛越細(xì)越高，單位面積內(nèi)的絨毛數(shù)量越多，小腸的有效吸收面積越大，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收越有利。固有膜構(gòu)成絨毛的中軸，并填充在腸腺之間。當(dāng)小腸受到刺激時(shí)，小腸絨毛常發(fā)生萎縮、脫落，隱窩深度增加，固有膜變厚，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收受到影響。因此，小腸的絨毛高度、絨毛寬度、隱窩深度及絨毛表面積是衡量小腸吸收功能的重要指標(biāo)。在指狀絨毛中，絨毛的長(zhǎng)度與腸上皮細(xì)胞數(shù)量呈顯著正相關(guān)。絨毛變短時(shí)，腸上皮細(xì)胞數(shù)量減少，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力降低。李可洲等［13］研究表明，絨毛越長(zhǎng)，吸收面積越大；絨毛越短，吸收面積越小，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力越低。另外，受到高溫應(yīng)激的動(dòng)物十二指腸、空腸、回腸均有明顯的病理?yè)p傷性變化，主要表現(xiàn)為黏膜上皮細(xì)胞脫落、黏膜固有層水腫、腸絨毛斷裂等器質(zhì)性病變［14］。Mitchell等［1］研究發(fā)現(xiàn)，高溫應(yīng)激使小母雞空腸絨毛高度、絨毛表面積和絨毛體積(高度×表面積)均顯著降低。胡艷欣等［15］研究報(bào)道，熱應(yīng)激使豬十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度、絨毛寬度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度(V/C)均呈下降趨勢(shì)(其中絨毛寬度均顯著變窄)，導(dǎo)致試驗(yàn)豬小腸吸收面積減少、功能下降，以致豬增重率顯著下降。Gln是體內(nèi)含量最為豐富的氨基酸，是快速分裂細(xì)胞(如腸黏膜上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等)的主要能源物質(zhì)。動(dòng)物小腸是利用Gln最多的器官，Gln也是小腸黏膜上皮細(xì)胞的主要能源物質(zhì)［16－17］。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)病理狀態(tài)時(shí)，機(jī)體對(duì) Gln的需要量增加，超過(guò)了體內(nèi)的合成能力，此時(shí)，需要從外界補(bǔ)充Gln。有關(guān)仔豬氨基酸營(yíng)養(yǎng)的研究表明，仔豬在21～28日齡時(shí)，母乳中Gln的分泌達(dá)到高峰，若在此時(shí)斷奶極易造成Gln的嚴(yán)重匱乏，導(dǎo)致斷奶后小腸絨毛縮短和隱窩加深，小腸結(jié)構(gòu)的完整性受到破壞，直接影響其吸收功能，造成生長(zhǎng)性能下降［18－20］。戴四發(fā)等［11，21］研究表明，適宜水平的Gln可以有效增大肉雞空腸絨毛的表面積，以增加其與消化道內(nèi)容物的接觸面積，利于吸收；添加Gln能夠有效緩解熱應(yīng)激對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、部分消化酶活和小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的不利影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在熱應(yīng)激條件下，28日齡時(shí)，飼糧中添加0.8%～2.0%Gln極顯著提高了十二指腸和空腸絨毛高度；添加0.4%、1.2%、2.0%Gln顯著或極顯著提高了回腸絨毛高度。42日齡時(shí)，飼糧中添加Gln顯著或極顯著降低了十二指腸絨毛寬度和隱窩深度，但僅添加1.2%Gln極顯著提高了十二指腸絨毛高度；添加1.2% ～2.0%Gln顯著或極顯著提高了空腸和回腸絨毛高度、降低了絨毛寬度，且添加1.2%Gln顯著或極顯著降低了空腸和回腸固有層厚度。由此可見(jiàn)，熱應(yīng)激條件下飼糧中添加Gln可顯著改善小腸的組織結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)小腸的吸收能力，進(jìn)而緩解高溫應(yīng)激對(duì)肉雞的危害，而且對(duì)后期的影響明顯優(yōu)于前期。

3.3 Gln對(duì)熱應(yīng)激肉雞小腸吸收能力的影響

小腸是消化道內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主要部位，小腸結(jié)構(gòu)與功能的正常是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分消化與吸收的基本保證。小腸黏膜細(xì)胞間緊密連接的結(jié)構(gòu)能夠選擇性地讓某些水溶性物質(zhì)和大分子通過(guò)，而限制細(xì)菌、毒素等通過(guò)。在評(píng)價(jià)小腸吸收功能時(shí)，D－木糖吸收試驗(yàn)是較經(jīng)典的方法。研究發(fā)現(xiàn)小腸黏膜絨毛高度降低、隱窩深度增加及消化酶活性下降往往伴隨著斷奶仔豬對(duì)標(biāo)準(zhǔn)劑量D － 木糖吸收能力的下降［22］，潘俊福等［23］研究表明，飼糧中添加不同水平的Gln能在一定程度上改善肉雞小腸吸收功能。劉艷芬等［24］研究表明，飼糧中添加Gln能明顯改善肉雞小腸的吸收能力，其中添加0.2%Gln的作用效果最好。此外，肉雞的吸收功能隨著日齡的增加而加強(qiáng)，與其小腸發(fā)育規(guī)律是一致的。本試驗(yàn)研究表明，28日齡時(shí)，隨著飼糧中Gln添加水平的增加，應(yīng)激肉雞小腸的吸收能力增強(qiáng)，添加水平達(dá)到2.0%時(shí)小腸的吸收能力最佳，與對(duì)照組呈現(xiàn)顯著性差異。42日齡時(shí)，添加水平為1.2%時(shí)小腸吸收能力最佳，顯著高于對(duì)照組。小腸吸收能力的變化和上述小腸組織結(jié)構(gòu)的變化是基本一致的。由此可見(jiàn)，小腸組織結(jié)構(gòu)的好壞對(duì)小腸的吸收能力起著決定性的作用。

4 結(jié)論

在熱應(yīng)激條件下，飼糧中添加Gln有利于改善肉雞的生長(zhǎng)性能和小腸組織結(jié)構(gòu)，并提高小腸的吸收能力，緩解熱應(yīng)激對(duì)肉雞造成的危害，且對(duì)后期的影響優(yōu)于前期，綜合考慮可知前期添加2.0%較好，后期添加1.2%較好。

［1］MITCHELL M A，CARLISLE A J.The effects of chronic exposure to elevated environmental temperature on intestinal morphology and nutrient absorption in the domestic fowl(Gullus domestics)［J］.Comparative Biochemistry Physiology，1992，101:137－142.

［2］UNI Z，GAL－GARBER O，GEYRA A，et al.Change in growth and function of chick small intestine epithelium due to early thermal conditioning［J］.Poultry Science，2001，80:438－445.

［3］李建華，劉東文，高春生.谷氨酰胺的營(yíng)養(yǎng)作用及其在飼料中的應(yīng)用［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35(11):3282－3448.

［4］JIANG Z M，CAO J D，ZHU X G，et al.The impact of alany－glutamine on clinical safety，nitrogen balance，intestinal permeability，and clinical outcome in postoperative patients: a randomized，double blind，controlled study of 120 patients［J］.Journal of Parenter Enteral Nutrition，1999(6):S62.

［5］劉濤，彭健，周詩(shī)其，等.外源性谷氨酰胺和谷氨酸對(duì)早期斷奶仔豬腸黏膜形態(tài)、結(jié)構(gòu)和小腸吸收功能及骨骼肌中DNA、RNA濃度的影響［J］.中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2003(1):62－65.

［6］WU G.Intestinal mucosal amino acid catabolism［J］.The Journal of Nutrition，1998，128:1249 －1252.

［7］REEDS P J，DOUGLAS G B，BARBABAS G P，et al.Eternal glutamine is the preferential source for mucosal glutamine synthesis［J］. American Journal Physiology，1997，273:E408－E415.

［8］張彩虹，李文立，任慧英，等.酵母鉻對(duì)熱應(yīng)激肉雞生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2008，20(6):668 －673.

［9］高增兵，傅偉龍，蔣宗勇，等.高溫環(huán)境對(duì)肉雞生產(chǎn)性能和血漿甲狀腺素、胰島素水平的影響［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，20(1):26 －31.

［10］黃冠慶，林紅英，黃曉亮.谷氨酰胺對(duì)高溫下黃羽肉雞增重及血液生化指標(biāo)的影響［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2006，33(2):3 －5.

［11］戴四發(fā)，王立克，王立新，等.谷氨酰胺對(duì)熱應(yīng)激條件下肉雞生產(chǎn)性能、小腸消化酶活和形態(tài)結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用［J］.中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2009，24(4):103－107.

［12］MECORMACK S A，JONSON L R.Role of polyamines in gastrointestinal mucosal growth［J］.World Journal Gastroenterology，1991，260:795－806.

［13］李可洲，李寧，黎介壽，等.短鏈脂肪酸對(duì)大鼠移植小腸形態(tài)及功能的作用研究［J］.世界華人雜志，2002，10(6):720 －722.

［14］寧章勇，劉思當(dāng)，趙德明，等.熱應(yīng)激對(duì)肉仔雞呼吸、消化和內(nèi)分泌器官的形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的影響［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2003，34(6):558 －561.

［15］胡艷欣，肖沖，佘銳萍，等.熱應(yīng)激對(duì)豬小腸結(jié)構(gòu)及功能的影響［J］.科學(xué)技術(shù)與工程，2009，9(3):1671－1819.

［16］SOUBA W W，HERSKOWITZ K，AUSTQEN T R，et al.Glutamine nutrition:theoretical considerations and therapeutic impact［J］.The American Society for Parenteral and Enteral Nutrition，1990，14(5):237S－243S.

［17］WINDMUELLER H G.Glutamine utilization by the small intestine［J］.Advance Enzyme，1982，52:201.

［18］張軍民.谷氨酰胺對(duì)早期斷奶仔豬腸道的保護(hù)作用及其機(jī)理研究［D］.博士學(xué)位論文.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2000.

［19］KENWORTHY R.Observations on the effects of weaning in the young pig:clinical and to pathological studies of intestinal function and morphology［J］.Research in Veterinary Science，1976，21:69－75.

［20］LI D F，MELSSEN J L，REDDY P G，et al.Interrelationship between hypersensitivity to soybean proteins and growth performance in early weaned pigs［J］.Journal of Animal Science，1997，69:4062－4065.

［21］戴四發(fā)，李有志，李如蘭，等.外源性谷氨酰胺對(duì)肉仔雞空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響［J］.畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2005，36(1):100 －104.

［22］HAMPSON D J，SMITH W C.Influence of creep feeding and dietary intake after weaning on malabsorption and occurrence of diarrhea in the newly weaned pigs［J］.Research of Veterinary Science，1986，41(1):63－69.

［23］潘俊福，徐春厚，劉艷芬.谷氨酰胺對(duì)艾維茵肉仔雞空腸結(jié)構(gòu)和消化吸收能力的影響［J］.飼料工業(yè)，2006，27(17):24 －26.

［24］劉艷芬，馬建升，黃曉亮.谷氨酰胺對(duì)肉仔雞小腸發(fā)育及吸收功能的影響［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2006，22(8):39－43.