糜蛋白酶對改善精液不液化的體外實驗及恢復生育的臨床觀察

陳宗平，邱兆雨，楊 麗，梁國標，趙法亮，苗向陽，張發(fā)明，簡 毓，羅 旭，吳 濤

（遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院泌尿外科，貴州遵義563099）

糜蛋白酶對改善精液不液化的體外實驗及恢復生育的臨床觀察

陳宗平，邱兆雨，楊 麗，梁國標，趙法亮，苗向陽，張發(fā)明，簡 毓，羅 旭，吳 濤

（遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院泌尿外科，貴州遵義563099）

目的探討糜蛋白酶改善精液不液化及性生活時陰道內使用的方法及恢復生育的效果。方法選取精液不液化致不育的門診患者76例，3～7d后重新檢查其精液，并在其內加入糜蛋白酶4 000U，通過精液質量分析，了解其對精液不液化的改善情況。并將糜蛋白酶能改善精液的患者，采用糜蛋白酶4 000U用生理鹽水3mL稀釋后，于夫妻性生活過程中自行陰道內注射，了解受孕情況。另選用精液質量正常的健康志愿者15例及液化正常的異常精液志愿者17例，同樣在3～7d后重新檢查其精液，并在其內加入糜蛋白酶4 000U，通過精液質量分析，了解糜蛋白酶對正常精液及液化正常的異常精液有無影響。結果76例患者加入糜蛋白酶后30min內精液完全液化，并能改善精子的活率與活力。76例患者均采用糜蛋白酶于夫妻性生活過程中自行陰道內注射治療，其配偶受孕37例，受孕率48.7%；未受孕7例，未受孕率9.2%；24例因夫妻雙方嫌操作麻煩，試用1～4次后放棄，放棄率31.6%；8例失訪，失訪率10.5%。糜蛋白酶對正常精液及液化正常的異常精液無明顯影響。結論糜蛋白酶能有效改善精液不液化和精子的活率與活力。通過夫妻性生活過程中自行注射糜蛋白酶可恢復生育，但陰道內用藥方式有待改進。

精液不液化癥；糜蛋白酶；不育，男（雄）性；陰道注射

精液不液化是導致男性不育的常見原因之一，據報道其發(fā)生率國外為11.8%［1］，國內為9.8%［2－3］。引起精液不液化的原因目前并不完全清楚，臨床對其治療方法較多，但總體效果均不理想。糜蛋白酶為其中的一種治療方法之一，有選擇肌肉注射、用于輔助生殖技術篩選精子或制成栓劑陰道內使用［4－6］。采用蛋白水解酶進行體外替代治療是目前國內外發(fā)展趨勢，但替代方法有待探討。筆者于2003年9月至2011年3月對76例精液不液化致不育患者采用糜蛋白酶在體外能改善精液不液化，并用其通過夫妻性生活過程中自行陰道內注射，探討其治療效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集精液不液化致不育患者76例（治療組），年齡22～45歲，3～7d后重新檢查其精液，并在其內加入糜蛋白酶（長春天誠藥業(yè)有限公司生產，批號:H22022843）4 000 U，通過精液質量分析（監(jiān)測精液的pH值、黏稠度、液化狀態(tài)、液化時間、精子密度、精子活率、精子活力、正常形態(tài)精子及異常形態(tài)精子），了解其對精液不液化的改善情況。并將糜蛋白酶能改善精液的患者，采用糜蛋白酶陰道內注射（具體方法:糜蛋白酶4 000U用生理鹽水3mL稀釋后，于夫妻每次性生活時，男方射精后用注射器陰道內注射，再將陰莖插入陰道反復抽動數次使得糜蛋白酶能很好地與射入陰道的精液混合。了解受孕情況。另選用精液質量正常的健康志愿者15例（正常對照組，年齡22～26歲）及液化正常的異常精液志愿者17例（異常對照組，年齡20～39歲），同樣在3～7d后重新檢查其精液，并在其內加入糜蛋白酶4 000U，通過精液質量分析，了解糜蛋白酶對正常精液及液化正常的異常精液有無影響。

表1 不液化精液、液化正常的異常精液及正常精液對糜蛋白酶治療前／后的質量分析±s）

表1 不液化精液、液化正常的異常精液及正常精液對糜蛋白酶治療前／后的質量分析±s）

檢驗參數 不液化精液 液化正常的異常精液 正常精液pH 值 7.4±0.2／7.5±0.1 7.3±0.1／7.3±0.2 7.4±0.2／7.5±0.2黏稠度 黏稠／適中 適中／適中 適中／適中液化狀態(tài) 不全液化／液化 液化／液化 液化／液化液化時間（min） ＞60／23±2a 21±4／22±4 20±5／20±4精子密度（×106／mL） 46±28／48±22 26±19／24±20 52±31／57±32精子活率（%） 32±24／64±18b 30±24／31±23 71±10／69±11精子活力（%） a級23±12／26±14 b級26±19／9±5 a級20±11／21±14 b級24±15／24±16 a級36±9／35±9 b級30±12／29±14正常形態(tài)精子數（%） 27±14／26±15 13±11／12±11 28±6／29±6異常形態(tài)精子數（%） 72±11／75±10 87±13／89±9 70±11／70±10例數（n）76 17 15

1.2 精液不液化致不育的診斷標準 76例患者夫婦同居1年以上，有正常的性生活，未采用任何避孕措施，經夫婦雙方于本院門診檢查，多次精液檢查（2～6次，平均3.5次）證實男方存在精液不液化而排除其他疾患導致女方不孕。其中7例患者女方存在宮頸炎（3例）、輸卵管不通（1例）或欠通暢（2例）及子宮內膜異位癥（1例）。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SP13.0軟件處理數據，數據計量資料以±s表示，組間采用t檢驗，計數資料以百分比表示，組間采用χ2分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 糜蛋白酶對不液化精液、正常精液及液化正常的異常精液的質量分析 76例患者加入糜蛋白酶后30min內精液完全液化（治療前＞60min，治療后23±2min，P＜0.05），并能改善不液化精液的精子活率［治療前（32±24）%，治療后（64±18）%，P＜0.05］及活力［治療前a級（23±12）%、治療后a級（26±14）%，P＜0.05；治療前b級（26±19）%、治療后b級（29±15）%，P＜0.05］，而對精液的pH 值、精子密度、正常形態(tài)精子及異常形態(tài)精子比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。且對正常精液及液化正常的異常精液比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表2 糜蛋白酶對不液化精液患者性生活過程中配偶陰道內注射治療不育療效觀察

2.2 隨訪情況 76例患者均采用糜蛋白酶于夫妻性生活過程中自行陰道內注射治療，隨訪3～15個月，其配偶受孕37例，受孕率48.7%；未受孕7例，未受孕率9.2%；24例因夫妻雙方嫌操作麻煩，試用1～4次后放棄，放棄率31.6%；8例失訪，失訪率10.5%，見表2。

3 討 論

目前，已研究表明糜蛋白酶對改善精液不液化的體外實驗是肯定的［4－10］，本研究同樣證實了這一點。而對不液化精液中的質量分析參數國內外學者存在一定的爭議，有的學者認為糜蛋白酶對精液中的其他參數如pH值、精子密度、精子活率、精子活力、正常形態(tài)精子及異常形態(tài)精子無明顯影響［9－10］，有的學者則認為糜蛋白酶還能改善不液化精液精子的存活率及活力。筆者支持后者，原因在于糜蛋白酶改善精液的黏稠度，使精液處于液化狀態(tài)，從而解除了束縛精子游動的障礙。

精液的液化主要依靠前列腺腺泡和腺管上皮細胞分泌的蛋白水解酶完成，各種原因導致前列腺疾病使得其分泌的蛋白水解酶缺乏或異常，導致精液中缺乏蛋白水解酶而致液化異常。臨床上采用中醫(yī)中藥口服，抗菌藥物治療前列腺炎，以及某種水解酶進行肌肉注射，來改善精液不液化，但是往往因為復雜代謝機制而不能達到滿意的效果，筆者也曾用上述方法進行過治療，效果并不理想。既然通過全身用藥很難達到理想的效果，采用局部使用蛋白水解酶類就成為一種替代方法，并且通過體外替代治療已成為目前國內外的發(fā)展趨勢［4－10］。有學者使用α－糜蛋白酶陰道栓劑治療取得一定的效果［6］，而筆者采用糜蛋白酶于每次夫妻性生活時射精后自行陰道內注射治療，結果顯示:76例中其配偶受孕37例，受孕率48.7%；7例其配偶未受孕，未受孕率9.2%；24例因夫妻雙方嫌操作麻煩，試用1～4次后放棄，放棄率31.6%；8例失訪，失訪率10.5%。約有50%的患者恢復生育；僅有9.2%未恢復生育，通過對其配偶進行婦檢，發(fā)現(xiàn)存在宮頸炎、輸卵管不通或欠通暢及子宮內膜異位癥，是因夫婦雙方共同存在不育、不孕因素造成。治療過程中，因夫妻雙方不愿意接受或堅持放棄治療的占31.6%，說明該方法還有待改進。筆者試圖設計發(fā)明一種“佩戴藥物的陰莖套”裝置，通過性交過程中與射精同步注射糜蛋白酶以達到改善精液不液化，使不育患者在性生活的同時，達到生育的目的。該裝置初步命名為“促孕套”，已申請并獲得國家專利，可望得到市場開發(fā)。

值得提出的是，部分精液不液化的患者精液中加入糜蛋白酶后發(fā)現(xiàn)存在弱精癥或少精癥，經加用十一酸睪丸酮40mg口服2次／日及氯米芬50mg口服1次／日，2～3個月后，弱精癥或少精癥改善，配偶獲得受孕。說明針對此類患者在改善精液不液化的同時追加生精及強精治療是必不可少的。

［1］Wilson VB，Bunge RG.Infertility and semen nonliquefaction［J］.J Urol，1975，113（4）:509.

［2］梁善榮，王曉霞，席慶蘭，等.精化膠囊治療精液不液化癥臨床觀察［J］.中華男科學雜志，2006，12（7）:658－659.

［3］羅日有.81例精液不液化癥原因分析［J］.廣西醫(yī)學，2004，26（8）:1195.

［4］范勇，孫洪福，甘兆紅，等.血府逐瘀膠囊加α－糜蛋白酶治療精液不液化癥40例［J］.中國中西醫(yī)結合外科雜志，2007，13（4）:380－381.

［5］應俊，王忠，姚德鴻.蛋白酶對降低異常精液黏稠度的實驗對比研究［J］.中國男科學雜志，2006，20（11）:14－16，21.

［6］陳士祥，李金華，張先覺，等.α－糜蛋白酶陰道栓劑治療精液不液化的實驗與臨床研究［J］.男性學雜志，1995，9（4）:204－206.

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［9］Chen F，Lu JC，Xu HR，et al.Preliminary investigations on the standardisation and quality control for the determination of gamma－glutamyltranspeptidase activity in seminal plasma［J］.Andrologia，2007，39（1）:1－6.

［10］Lu JC，Chen F，Xu HR，et al.Preliminary investigations on the standardization and quality control for the determination of acid phosphatase activity in seminal plasma［J］.Clin Chim Acta，2007，375（1／2）:76－81.

Clinical observation of chymotrypsin to improve nonliquefaction of semen in vitro and to recover fertility through endovaginal medication

Chen Zongping，Qiu Zhaoyu，Yang Li，Liang Guobiao，Zhao Faliang，Miao Xiangyang，Zhang Faming，Jian Yu，Luo Xu，Wu Tao
（Department of Urology，The Affiliated Hospital of Zunyi Medical College，Zunyi，Guizhou563099，China）

ObjectiveTo investigate the effect of improving nonliquefaction with chymotrypsin and recovering fertility through endovaginal medication.Methods76infertility sufferers of nonliquefaction of semen who come from clinic service were selected to recheck their semen with chymotrypsin for 4 000international unit in 3－7days，then through semen quality analysis we got the message about the improvement of nonliquefaction of semen.Choosing the patients whose semen could be improved by chymotrypsin to use 4 000international unit of chymotrypsin with physiological saline for 3milliliter to inject vagina in sexual activity to know the conceive situation.At the same time，15health volunteers and 17volunteers of abnormity semen with normal liquefaction were selected and their semens were rechecked after 3－7days.We put 4 000international unit of chymotrypsin in them to know the effects of chymotrypsin on health semens and abnormity semens with normal liquefaction to act as control.ResultsAll of 76nonliquefaction of semen sufferers got improve to their semen when added chymotrypsin in vitro and it could improve the motility rate and vitality of spermatozoa.And all of them got treated by chymotrypsin through inject vagina in sexual activity.37patients＇spouses got pregnant；the conception rate was 48.7%.7did not got pregnant，the rate was 9.2% .24gave up under the treatment because of the failure to insist，and the rate was 31.6%.8lost follow，the rate was 10.5%.It was no significant effect to normal semen and abnormity semen with normal liquefaction.ConclusionChymotrypsin could improve nonliquefaction of semen and the motility rate and vitality of spermatozoa effectively.And it could recover fertility through inject vagina in sexual activity，while endovaginal medication is to be improved.

semen unliquefaction；chymotrypsin；infertility，male；vaginal injection

10.3969／j.issn.1671－8348.2012.34.015

A

1671－8348（2012）34－3612－02

2012－06－09

2012－08－30）