脫氧胞苷激酶對(duì)HeLa細(xì)胞放化療敏感性的影響

梁 冰，劉曉冬，徐慧英，信 瑞，孔德娟，賀夢(mèng)子，賈立立，徐 波，馬淑梅

(吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 衛(wèi)生部放射生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 長(zhǎng)春 130021)

子宮頸癌是僅次于乳腺癌的全球第二種最常見的婦科惡性腫瘤，而且發(fā)展中國(guó)家所占發(fā)病比例極高(> 80%)[1]，嚴(yán)重危害婦女的健康與生命。目前，放療作為宮頸癌治療的常規(guī)手段，廣泛地應(yīng)用于臨床，而化療因其作用效果存在爭(zhēng)議，應(yīng)用范圍較小。據(jù)統(tǒng)計(jì)約有80%的宮頸癌患者需要以放射治療作為單獨(dú)治療或綜合治療，雖然早期患者放射治療效果較好，但是中、晚期患者的治療效果仍較差，主要原因是輻射敏感性不理想等問題。因此，如何提高腫瘤的放射敏感性，成為當(dāng)前宮頸癌治療的關(guān)鍵問題之一。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)某些基因的表達(dá)在分子水平上影響著腫瘤細(xì)胞的放射敏感性。脫氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,DCK)是脫氧核苷酸生物合成補(bǔ)救途徑中的關(guān)鍵酶，在維持正常的脫氧核苷庫(kù)方面起著重要的生理學(xué)作用。大量研究[2-3]發(fā)現(xiàn)：電離輻射和其他基因毒性因子刺激可引起細(xì)胞DCK激酶活性增高而促進(jìn)DNA損傷的修復(fù)。目前，有關(guān)RNA干擾技術(shù)沉默HeLa細(xì)胞DCK基因改變其放化療敏感性的研究尚未見報(bào)道。本研究利用干擾技術(shù)特異性地阻斷DCK 基因在宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)，觀察其對(duì)人宮頸癌細(xì)胞藥物敏感性及輻射敏感性的影響，為宮頸癌的基因治療提供新的靶點(diǎn)和思路。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器實(shí)時(shí)定量PCR所需引物及RNAiso plus、SYBR Premix Ex Taq試劑盒(熒光為SYBR Green Ⅰ)等均購(gòu)自大連寶生物公司。D……