高羽亭,劉林華,黃明元,梁海榮,范洪學,唐煥文
(1.吉林大學公共衛生學院衛生毒理學教研室,吉林 長春 130021;2.廣東醫學院公共衛生學院勞動衛生與環境衛生教研室,廣東 東莞 523808;3.廣東醫學院公共衛生學院實驗中心,廣東 東莞 523808)
苯雖被列為確定的人類致癌物已近30年,但其仍是工業生產中重要的化工原料和溶劑。氫醌(HQ)是苯在生物體內重要的中間代謝產物,流行病學及動物實驗發現:HQ慢性毒性作用靶器官為骨髓,而骨髓分為造血和基質兩大系統[1]。骨髓間充質干細胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作為多種骨髓基質細胞的前體細胞是造血微環境的重要組成部分,是維持造血干細胞特性及歸巢到骨髓所必需的[2]。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]是DNA損傷引起的細胞早期應激反應的重要因子,參與許多重要的生命活動,如凋亡、轉錄、DNA修復、細胞死亡、染色體功能、基因組完整性和DNA甲基化等[3]。以往對HQ毒性效應的體外研究多選用肝細胞或動物的單核細胞,這些細胞與人骨髓中細胞的生物學特性有較大差異,不能反映HQ對靶器官的毒性作用,且主要研究高劑量HQ的毒效應[4-5]。本研究采用大鼠BMSCs為研究模型,探討低劑量HQ對BMSCs生物學性狀及PARP-1基因表達的影響,旨在闡明實際接觸水平下HQ對骨髓的毒效應,目前國內外無相關報道。
1.1 主要試劑
低糖DMEM培養基(Gibco,美國);胎牛血清(四季青,杭州);HQ(Sigma,美國);Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒(凱基,南京);Trizol Reagent(Invitrogen,美國);逆轉錄試劑盒(Fementas,立陶宛);熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)試劑盒(Roche,德國);Cell Counting Kit-8試劑盒(Dojindo,日本)。……