俞 星,韓春姬,樸惠善,李 琚
(1.延邊大學基礎醫學院生理學教研部,吉林 延吉 133002;2.延邊大學基礎醫學院預防醫學教研部,吉林 延吉 133002;3.延邊大學藥學院藥物化學教研部,吉林 延吉 133002)
原發性肝癌由于發病隱匿、惡性度高、生長快等特點,其臨床治療效果并不理想,因而探索高效低毒的抗肝癌藥物一直是熱點問題。近年來研究[1-3]發現:輪葉黨參(Codonopsislanceolata)中含有皂苷、黃酮類、生物堿類、三萜類化合物、植物甾醇類及揮發油類等藥用成分。輪葉黨參藥理學研究[4-5]表明:其具有抗突變、抗疲勞、抗氧化作用。本文作者前期研究[6-7]結果表明:輪葉黨參總皂苷能明顯誘導人肝癌細胞HepG-2的凋亡,發酵輪葉黨參乙醇提取物明顯提高清除自由基的能力。為了明確輪葉黨參抑制肝癌細胞生長并促進癌細胞凋亡的活性成分及其作用機制,本研究從輪葉黨參中分離出黨參皂苷D(lancemaside D),探討其對HepG-2細胞增殖的時間效應和細胞周期的影響。關于黨參皂苷D體外抑制肝癌細胞增殖及其作用機制方面的研究國內外尚未見報道。
1.1 材料、試劑及儀器輪葉黨參采集自吉林省安圖縣。采用溶劑萃取和柱色譜方法分離純化黨參皂苷D,根據理化性質和波譜學數據鑒定其結構,見圖1。DMEM培養基(Gibco公司),特級胎牛血清(北京華美生科生物技術有限公司),MTT粉劑(Sigma公司),細胞周期檢測試劑盒(碧云天生物技術研究所)。所用儀器有CO2培養箱(Sanyo公司)、流式細胞儀(美國BD公司)及酶聯免疫檢測儀(南京華東電子集團醫療裝備有限責任公司)。……