脂質體法介導pIRES2-EGFP-hVEGF165轉染人胎盤源間充質干細胞

王博蔚，高 尚，朱振威，劉春麗,朱 鎮，劉志輝

(1.吉林大學第二醫院婦產科，吉林 長春 130041；2.吉林大學口腔醫院口腔修復科，吉林 長春 130021；

3.吉林大學口腔醫院口腔頜面外科，吉林 長春 130021；4.江蘇省鎮江市口腔醫院口腔修復科，江蘇 鎮江 212002)

血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是能誘導血管生成、增加血管通透性及維持血管功能的強效促血管形成因子，在創傷愈合過程中發揮重要作用[1-3]，將其運用于難愈性創傷的治療是目前研究的焦點，VEGF家族有5種亞型，其中VEGF165是最為重要的表型。因為VEGF半衰期較短，在正常組織中約為30～45 min，在缺血部位能延長至6～8 h，這就要求有一個緩釋系統以延長VEGF作用于創傷修復部位的時間。近年研究者[4-10]發現：骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)及脂肪源間充質干細胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)在創傷修復領域具有重要應用潛能，可以向創傷局部擴充歸巢，向創傷修復細胞—內皮細胞及成纖維細胞定向分化或通過創造增強修復的微環境促進組織內源性細胞的再生，從而加速創傷愈合；干細胞同時也是基因治療的良好載體細胞，可以攜帶目的基因到達靶區域發揮治療作用。人胎盤源間充質干細胞(human placenta -derived mesenchymal stem cells，HPMSCs)是近幾年逐漸受到關注的新的成體干細胞來源，本文作者前期研究[11-12]表明：HPMSCs在形態及生物學性狀方面與BMSCs基本一致，在特定誘導條件下可以向內皮細胞定向分化，提示HPMSCs可以作為創傷修復的種子細胞。本研究擬構建VEGF的真核表達質粒pIRES2-EGFP-hVEGF165，并通過脂質體法將其轉入HPMSCs中，探討hVEGF165對HPMSCs增殖的影響及攜帶目的基因的HPMSCs的多向分化潛能，旨在為進一步應用VEGF轉基因干細胞移植方法治療難愈性創傷的研究奠定實驗基礎。……