組蛋白乙酰化酶hMOF在腎透明細胞癌組織中的表達及其臨床意義

遲長亮，蘆志華，管旌旌，王 勇，唐宇哲，蔡 勇，金景姬，王春喜

(1.吉林大學第一醫(yī)院泌尿外科，吉林 長春 130021；2.吉林省人民醫(yī)院泌尿外科，吉林 長春 130021；

3.吉林大學生命科學學院表觀遺傳學實驗室，吉林 長春 130012)

組蛋白乙酰化修飾在基因轉錄調控、DNA損傷修復及細胞周期調控等生物學過程中發(fā)揮重要作用，是近年來表觀遺傳學、腫瘤學領域的研究熱點。組蛋白乙酰轉移酶(histone acetyl-transferases，HATs)和組蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase，HDACs)是調控組蛋白乙酰化修飾的2種重要的酶。組蛋白乙酰化酶hMOF是組蛋白乙酰轉移酶家族的成員之一，負責組蛋白H4的第16位賴氨酸(H4K16)的乙酰化。其表達量的減少將導致整個基因組組蛋白H4K16乙酰化水平的下降，引起基因組的蛋白表達發(fā)生改變[1]。目前研究[2]表明：hMOF表達量的異常與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及惡性程度相關。腎細胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是泌尿系統(tǒng)常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病機制一直是研究的熱點。目前有關hMOF蛋白與腎癌發(fā)病機制的研究國內外尚無相關報道，本文作者通過研究hMOF蛋白在腎癌組織中的表達情況，探討其在腎癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 實時熒光定量聚合酶鏈反應

1.1.1 標本及主要試劑 收集近期本院行腎癌根治術的癌組織標本9例，其中Fuhrman分級Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級各3例，并留取癌旁正常腎組織作為對照。主要試劑及儀器：superRT cDNA 試劑盒(CWbio公司)。Tiozol RNA 試劑盒(Biomiga公司)。hMOF及β-actin基因PCR引物，hMOF基因上游引物5′-GAAGTCACGGTGGAGATCGGA-3′，下游引物5′-CTTGGCCAGCAGACACAGGTT-3′；β-actin基因上游引物5′-ATGGGTCAGAAGGATTCCTATGT-3′，下游引物5′-AGCCACACGCAGCTCATT-3′(上海生工生物技術公司合成)。熒光定量PCR儀(ABI PRISM 7300)。

1.1.2 方法 組織樣本留取后迅速用液氮冷凍保存。……