幾種常見腸道致病菌多重PCR檢測的效果評價

劉金華，史艷宇，馬路遙，魏春艷，邵麗筠，王海龍

(1.吉林出入境檢驗檢疫局，吉林 長春 130062；2.吉林省產品質量監督檢驗院，吉林 長春 130022；3.吉林大學藥學院生物醫學工程教研室，吉林 長春 130021；4.內蒙古自治區錫林郭勒盟東烏珠穆沁旗公安局，內蒙古 烏里雅斯太 026300；5.吉林大學再生醫學科學研究所，吉林 長春 130021)

近年來全球有關食品安全的惡性事件頻發，食源性致病菌成為威脅食品安全的主要元兇。其中金黃色葡萄球菌、單核細胞增生李斯特菌、志賀氏菌、腸出血性大腸桿菌O157∶H7、空腸彎曲桿菌、副溶血弧菌、沙門氏菌(傷寒沙門菌、腸炎沙門菌)、產氣莢膜梭菌及變形桿菌等引起的食源性疾病居于世界前列[1]。傳統的致病菌檢測均采用生理生化、血清型水平的方法，試驗周期長，耗時費力，且靈敏度受限，因此有必要建立一種快速、簡便、靈敏度高的檢測手段[2-3]。多重PCR檢測方法因其能夠一次對多種致病菌同時檢測，而成為研究熱點[4-6]。本研究擬建立一種多重PCR檢測方法能夠同時檢測出單核細胞增生李斯特菌、大腸桿菌O157、副溶血性弧菌及普通變形桿菌4種腸道致病菌，旨在為臨床疾病診斷、食品安全檢測、流行病學調控等工作提供良好的有效檢測方法。

1 材料與方法

1.1 菌種及其來源

副溶血性弧菌(Vibiroparahaemolyticus，ATCC17802)、普通變形桿菌(Proteusbacillusvulgaris，ATCC33420)、蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus，ATCC11778)購于北京蘭博瑞公司。單核細胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes，ATCC19111)、傷寒沙門氏菌(Salmonellatyphi，ATCC13311)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(分離株)、腸炎沙門氏菌(Salmonellaenteritidis，ATCC13076)、志賀氏菌(Shigella)(分離株)、空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni，ATCC33291)及大腸桿菌O157(EscherichiacoliO157) 保存于吉林出入境檢驗檢疫局微生物檢測實驗室。……