大瀧六線魚人工繁殖及育苗技術初步研究

潘 雷, 胡發文, 高鳳祥, 菅玉霞, 張少春, 王 雪, 郭 文

(山東省海水養殖研究所, 山東 青島 266002)

大瀧六線魚(Hexagrammos otakii)又名歐氏六線魚、六線魚, 俗稱黃魚, 屬鲉形目(Scorpaeniformes)、六線魚科(Hexagrammidate)、六線魚屬(Hexagrammos), 為冷溫性近海底層巖礁魚類。主要分布于中國黃海和渤海, 也見于朝鮮、日本和俄羅斯遠東諸海[1]。此魚耐低溫, 生存溫度 2～26℃, 生長于中國山東、遼寧和江蘇等地的近海多巖礁海區。其肉質細嫩、味道鮮美, 素有“北方石斑”之稱, 經濟價值較高, 深受廣大消費者和養殖者青睞。大瀧六線魚是中國北方網箱養殖的理想種類, 也是開展漁業增殖放流和發展游釣漁業的理想品種, 作為北方特有名貴海水魚類具有廣闊的推廣前景。

國內外關于大瀧六線魚的研究多集中于基礎生物學方面[2-5], 日本于20世紀70年代開始對大瀧六線魚進行人工繁育, 目前尚處于試驗階段, 未突破形成規模[6]。中國有關大瀧六線魚苗種繁育的研究始于20世紀90年代中后期, 吳立新等[7]在實驗室內采用海區自然受精卵塊培育出1.5 cm魚苗244尾, 孵化率22.9%, 成活率2.4%; 莊虔增等[8]采用海區自然受精卵塊和人工授精獲得的受精卵共計培育出 3.5 cm魚苗1.83萬尾, 孵化率56%, 成活率23.4%。大瀧六線魚的人工繁殖和大規格苗種的培育迄今沒有突破, 是由于大瀧六線魚自身的繁殖特性決定了其人工繁殖的難度較大。

大瀧六線魚是地方性魚種, 隨著近海經濟魚類種類和數量的減少, 沿海漁民對大瀧六線魚的捕撈量逐漸加大, 漁獲個體也逐年減小, 其漁業資源承受的壓力越來越大, 資源衰退的趨勢日趨嚴重[9]。為了保護和恢復大瀧六線魚的自然資源, 滿足養殖產業對大瀧六線魚苗種的大量需求, 使大瀧六線魚養殖業健康持續發展, 開展大瀧六線魚苗種人工繁育技術研究具有重大意義。2008年以來, 山東省海水養殖研究所開展了大瀧六線魚人工繁育技術研究,取得了理想結果, 作者總結了有關大瀧六線魚人工苗種繁育技術的研究結果, 以期為大瀧六線魚規模化人工繁育提供參考。

1 材料與方法

1.1 親魚的來源與培育

2009～2010年在山東省海水養殖研究所青島即墨鰲山衛中試基地進行了大瀧六線魚人工繁育試驗,使用的親魚選自大連黑石礁海區海上網箱養殖的2～3齡大瀧六線魚。大瀧六線魚屬于秋季產卵型魚類[10], 從 9月份海水水溫下降便開始親魚的營養強化培育。強化培育期間, 投喂優質新鮮的玉筋魚、小蝦等, 投喂量為魚體質量的 2%～3%, 日投喂 1～2次。

10月下旬, 水溫降至16～18℃時經營養強化培育的親魚已經發育成熟, 這時可以選擇體表無傷、光澤鮮亮, 腹部膨大、松軟的雌魚到室內水泥池內暫養。

親魚暫養池使用圓形水泥池, 面積25 m2, 池深1.0 m, 排水口設置于池底部中央, 排水口末端設閥門及活動搖臂器, 控制水位高度0.6～0.8 m。親魚暫養池配有進排水、充氣、控溫、控光設施等, 池內布有水泥制遮蔽物供親魚棲息。

親魚培育密度為3～5尾/m3, 雌、雄比例為2∶1。培育用水為沙濾自然海水, 溫度 16～18℃, 換水量為 3～5個量程/d, 連續充氣, 鹽度 29～31, pH 7.8～8.1, 溶解氧保持在5 mg/L以上, 光照強度控制在500～1 000 lx, 光照時間為6: 00～22:00。

1.2 人工催產和平面授精

對于發育不成熟的雌魚可進行人工催產, 催產激素采用促黃體素釋放激素A2(LHRH-A2, 寧波第二激素廠), 背部肌肉注射, 注射劑量 30～50 μg/kg體質量, 分2～3次注射完畢, 每次間隔24 h。雄魚一般自然成熟, 無需注射激素即可人工擠出精液。

人工授精采用半干法授精, 首先鏡檢精子和魚卵的成熟情況, 如果成熟良好, 即可開始授精。將2～3尾雄魚的精液擠入盛有 80～100 mL海水的燒杯中, 選擇腹部膨大松軟、生殖孔紅腫、性腺發育良好的雌魚, 直接將魚卵擠入臉盆、解剖盤等容器內,迅速將燒杯內的精液淋到魚卵上, 混合均勻后將魚卵整形成平面薄片狀, 厚度為 2～3層魚卵, 每片大小為10～15 cm左右的方形, 2 min后加入海水, 此即為人工平面授精。15 min后受精卵片凝固變硬, 經過3～5次洗卵, 放入孵化網箱中孵化。

1.3 網箱吊式孵化

1.3.1 孵化設施

孵化池長條形(5 m×1.5 m×1 m), 進水口、出水口分別兩頭, 池內依次排放網目為60目的方形孵化網箱3個(規格為1 m×1 m×1.2 m), 網箱底部放置氣石1～2個。

1.3.2 孵化條件

孵化用水為沙濾海水, 水溫 16～17℃, 鹽度29～31, pH 7.8～8.1, 溶解氧保持在5 mg/L以上, 光照強度500～1000 lx, 光照時間6:00～22:00。24小時長流水, 日流水量為8～10個全量。連續充氣, 充氣量控制在0.2～0.4 L/min。在上述條件下受精卵經過20～23 d的孵化仔魚可以全部孵出, 仔魚孵化出后已經開口。

1.3.3 孵化方式

孵化方式采用網箱吊式孵化(圖 1), 將人工授精后的平面受精卵片用棉繩或聚乙烯繩穿成串, 每串3片受精卵, 卵片間隔15～20 cm, 加墜石吊掛于網箱內孵化, 孵化密度為3片×3串/m3網箱, 約1.0×105～1.5×105粒/m3。在上述條件下受精卵經 20～23 d仔魚全部孵出。

圖1 網箱孵化示意圖Fig. 1 Sketch map of the hatching cage

1.4 苗種培育

1.4.1 設施條件

配套設施設備有: 高位水池、砂濾池、水泵房、羅茨鼓風機、蒸汽鍋爐、車間保暖設施、照明設施、池底清潔器、潛水泵、常規水質檢測儀、顯微鏡、解剖鏡、發電機組等。室內苗種培育池為長方形抹角水泥池(4 m×3 m×1 m)。另有配套的餌料培養車間,單胞藻培養池和輪蟲培養池若干個(容積10～15 m3),0.5、1 m3的玻璃鋼水槽若干個。

1.4.2 培育密度

初孵仔魚多集中于網箱邊緣和底部, 當仔魚逐漸活躍并上浮到水體中上層時, 輕輕收集仔魚至培育池培育, 仔魚的布池密度為 0.5萬～0.8萬尾/m3,隨著苗種的生長及時分池稀疏密度。

1.4.3 水質管理

每天晝夜兩次監測培育水體的水質情況, 保證水質指標穩定: 水溫 16～17℃, 鹽度 29～31,pH=7.8～8.1, 溶解氧5 mg/L以上, NH4+-N含量≤0.1 mg/L。培育初始水量為培育池體積的3/5, 前5 d采取逐漸加水至滿, 以后至采取網箱排水換水方式,每天換水2次, 隨著魚苗的生長逐漸增大換水量, 20日齡前換水量為60%, 40日齡前為100%, 60日齡前為150%, 60日齡后采取流水培育方式, 隨著魚苗的生長和攝食量的增加, 流水量逐漸增大到 200%～400%。魚苗培育期間每天使用清底器吸底 1次, 保證培育池底清潔無死魚、殘餌; 并在水面設置集污器,清除水面的污物, 避免水面的通透性降低而造成氣體交換的不暢。

1.4.4 光照與充氣

光照強度控制在500～1 000 lx, 陰天和夜晚可以使用人工光源。氣石密度為 0.5個/m2, 充氣量隨著魚苗的生長逐漸加大, 每只氣石的出氣量由調節閥控制, 由剛一開始的 0.2～0.4 L/min逐漸增大到6～8 L/min。

1.4.5 微藻添加與餌料投喂

魚苗培育期間每天向培育池添加新鮮的處于指數生長期海水小球藻(Chlorellaspp.), 保持培育池中密度在30萬～50萬個/mL, 直至25 d停止添加。餌料系列為輪蟲(Brachionus plicatilis)、鹵蟲(Artemia salina)無節幼體、配合飼料。投喂時期: 輪蟲5～25日齡, 鹵蟲無節幼體10～60日齡, 配合餌料在50日齡后開始投喂(圖2)。輪蟲投喂前用富含DHA和EPA的營養強化劑(裂壺藻(Schizochytrium limacinum)粉DHA∶EPA=2∶1, 青島越洋進出口有限公司)強化10～12 h, 每天投喂2次, 使培育池內的輪蟲密度保持在6～8個/mL。鹵蟲無節幼體孵化前需脫殼處理,投喂前需要用富含 DHA和 EPA的強化劑裂壺藻粉強化 6～8 h, 每天投喂 2～3次, 投喂密度開始為0.3～0.5個/mL, 并逐漸增大到1～2個/mL。輪蟲和鹵蟲在營養強化收集后投喂前, 需要用清潔海水反復沖洗干凈, 降低攜帶污物和病原。從50日齡開始投喂市售日升全價配合飼料, 配合餌料的粒徑由開始的200 μm逐步增大, 遵循勤投少投的原則, 一般情況下馴化 10～15 d左右, 魚苗開始攝食餌料, 每天投喂8～10次。

圖2 大瀧六線魚苗種培育的餌料系列Fig. 2 Food serials during seedling production of Hexagrammos otakii

2 結果

2.1 親魚培育

表1為2009～2010年大瀧六線魚親魚培育情況,完全可以利用人工養殖方法培育獲得成熟親魚進行人工授精, 不需要采集自然海域的魚卵進行苗種繁育, 對于不能達到自然成熟的親魚可以采取人工催產促熟的辦法。

表1 2009～2010年大瀧六線魚親魚培育情況Tab. 1 Culture condition of H. otakii parent fish during 2009-2010

2.2 受精率和孵化率

表2為2009～2010年大瀧六線魚采卵、人工授精和孵化情況。采用人工平面授精方法, 受精率93%;采用網箱吊式孵化方法, 孵化率81%。

表2 2009-2010年大瀧六線魚采卵情況Tab. 2 Condition of H. otakii eggs production during 2009-2010

2.3 苗種培育

初孵仔魚在水溫16～17℃, 鹽度29～31的條件下, 經90～100 d培育, 平均全長可達5.0～6.0 cm。表 3為 2009～2010年苗種培育情況, 成活率可達40%以上, 超過以往大瀧六線魚育苗成活率。表4為大瀧六線魚苗種生長狀況。

表3 2009～2010年苗種培育情況Tab. 3 Seedling production during 2009～2010

表4 大瀧六線魚生長情況(16～17℃, n=60)Tab. 4 Growth of young H. otakii (16～17℃, n=60)

3 討論

3.1 魚卵來源

大瀧六線魚為一次性產卵魚類, 產黏性卵, 卵塊多數附著于水深 2～5 m海底的扁江籬(Gracilaria txetorii)、松藻(Codium fragile)上, 少數產于礁石上[11]。雖然可以通過采集海邊的天然受精卵獲得孵化仔魚進行培育, 這樣對本來就日漸枯萎的自然資源人為地進行了破壞, 難以此法進行規模化的人工苗種繁育,存在局限性和不穩定性。本試驗通過親魚營養強化培育可以在每年的 10月下旬至11月下旬獲得成熟的雌雄親魚, 并開展了未成熟雌魚人工注射催產試驗。這為大瀧六線魚苗種規模化人工繁育尋找了一條可靠途徑, 避免了對自然資源的毀壞以及增加了人為可控性。對于人工激素催產與自然成熟的親魚在受精卵、孵化率和苗種成活率方面有無差別, 還需進一步研究。

本試驗受精卵均來自人工擠卵授精, 親魚自然產卵操作簡便, 對親魚無損傷, 卵子質量好, 它的技術要領在于培育高質量的親魚和親魚的溫光調控產卵技術[12]; 另外目前尚無對人工培育子一代苗種進行工廠化養殖培育親魚的研究報道, 這些可以作為下一步研究方向, 為開展全人工苗種繁育進行探討研究。

3.2 人工授精和孵化

大瀧六線魚魚卵較大, 卵徑1.6～2.3 mm, 親魚懷卵量低, 屬黏性卵, 自然狀態下受精后的卵粒互相黏著成團, 卵塊內部的卵則因缺氧而不同程度受到影響, 導致人工條件下采集到的自然受精卵塊孵化率僅有20%左右。在自然海區, 大瀧六線魚產卵于松藻和扁江蘺上, 魚卵成松散排列的球塊狀, 隨著水流的沖擊不斷搖曳, 如此可以獲得充足的溶氧,自然海區的受精卵塊孵化率達95%以上[8]。

大瀧六線魚人工擠卵授精時遇到海水后會在 10 min內迅速凝結成塊, 這樣不利于精子與卵子的充分結合, 導致受精率不高。此外大瀧六線魚的孵化時間比較長, 作者的試驗證明 16～17℃的水溫下需要孵化 20～23 d, 如此長時間的孵化, 對于塊狀魚卵來說非常不利。適當提高水溫可以縮短孵化時間, 但是否會影響到孵化率這有待下一步試驗證明。由于卵塊相互重疊、擠壓, 卵塊上的死卵、卵殼等污物覆蓋于好卵之上, 使內層卵因長期缺氧而腐敗死亡,導致孵化率較低。

研究表明, 充足的氧氣對于胚胎的正常發育是必需的, 水產動物在胚胎發育階段最容易受到水體溶解氧的影響, 當水體溶解氧過低時, 胚胎將出現發育遲緩、代謝紊亂、仔魚提前脫膜等現象, 最終導致較高的苗種畸形率和死亡率[13]。本研究采取了人工平面授精、網箱吊式孵化的方法[14], 取得了比較理想的結果, 受精率達到 93%以上, 孵化率達到81%以上。通過整形將魚卵攤成平面, 一般厚度為 2～3層魚卵, 這樣授精時精子可以充分的與成熟的魚卵結合, 不會由于大瀧六線魚魚卵中大量的黏液遇到海水迅速凝結成卵塊而導致受精率低。另外結合網箱吊式孵化, 可以充分利用孵化水體空間, 使每個受精卵都可以和海水接觸, 使受精卵孵化時能夠獲得充足的溶氧, 不會因為塊狀卵而只有外層魚卵與海水接觸, 導致內層魚卵因缺氧而逐漸死亡。

3.3 苗種培育

試驗過程中發現, 大瀧六線魚苗種培育過程中主要有 3個死亡期。第一個出現在仔魚孵出后開口前 3～5日齡, 這一階段的死亡率會在 30%左右, 死亡的仔魚多數為畸形、瘦弱、卵黃較小, 這主要和卵質有關, 強化親魚的營養所需, 提高親魚成熟度對保證卵質至關重要[15]。第二個死亡期出現在仔稚魚變態期間, 約 15～20日齡, 這一階段的死亡率會在20%左右, 這期間正處于仔魚階段向稚魚階段過渡,生理變化劇烈, 各鰭相繼發生, 對外界環境和營養要求很高, 死亡仔魚多為營養不良、發育遲緩難以完成變態之魚, 除了在營養需求上滿足仔魚對DHA和EPA的需求外, 在培育水體中適當添加有益菌(益生素、復合細菌EM、光合細菌), 通過改善水質, 穩定環境也可以提高仔魚的成活率[16]。第三個死亡期出現在 40～60日齡, 死亡率一般在 10%以內, 這階段主要是稚魚向幼魚過渡, 從稚魚頭部向體后開始逐漸褪去翠綠色出現淺黃色, 期間需要注意水質環境的調節和配合餌料的轉換。

3.4 幼魚生活環境

經過90～100 d的培育, 大瀧六線魚苗種達5 cm以上, 體色基本由綠色完全變為黃褐色, 進入幼魚期, 幼魚的體態和生活習性基本和成魚相似。大瀧六線魚主要分布于中國的山東和遼寧等地的近海多巖礁海區[17], 同時大瀧六線魚及其幼魚的食性分析的結果表明, 大瀧六線魚的幼魚主要攝食餌料中以端足類、等足類和幼蟹等為主, 成魚主要攝食小型魚蝦蟹, 攝食的生物餌料均屬底棲動物[18], 說明大瀧六線魚的幼魚和成魚均營底棲生活。這就為作者提供了理論依據, 大瀧六線魚屬于底棲性巖礁魚類, 而不屬于中上層魚類。

幼魚期后, 魚苗已經不同于仔魚和稚魚期生活在水體中上層, 而是底棲于池底, 只有攝食時候才會游動到水面上層。作者在魚苗培育過程中在幼魚期根據其生活習性, 模仿大瀧六線魚的自然生活環境, 在池底設置了水泥制的空心磚作為其棲息場所,取得了不錯的效果。大瀧六線魚平時聚集在空心磚內, 生活狀態良好, 攝食強烈, 幾乎無死亡, 大大提高了苗種成活率和生長速度。

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