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鋅對仔豬采食量、消化酶活性及抗氧化性能的影響研究

2012-10-16 09:16:38,,,
浙江畜牧獸醫 2012年1期
關鍵詞:血清影響

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(1.浙江欣欣飼料股份有限公司,浙江嘉興 314005;2.浙江維豐生物科技有限公司)

仔豬斷奶后受環境、營養、管理等因素的影響,容易發生“仔豬早期斷奶綜合征”,主要表現為食欲減退,采食量下降,進而導致生長受阻、疾病甚至死亡。

大量研究表明,高鋅日糧可顯著提高仔豬的采食量,緩解斷奶應激,促進生長[1]。因此,鋅作為一種有效的飼料添加劑已被廣泛應用于養豬業中。

本試驗通過采用硫酸鋅溶液活體注射技術,研究鋅對仔豬采食量、消化酶活性以及肝臟抗氧化性能的影響,為鋅在養豬業中的廣泛使用提供試驗和理論依據。

1 材料與方法

1.1試驗材料 ZnSO4·7H2O,純度≥99%,購自Sigma公司。

1.2試驗設計 隨機選擇平均體重9.57 kg的“杜×長×大”三元雜種健康斷奶仔豬18頭,按試驗要求分為3組(各組仔豬體重差異不顯著),對照組、試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組。

試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組按照單位體重分別耳靜脈注射鋅濃度為2 mg/kg和4 mg/kg的硫酸鋅溶液,對照組注射生理鹽水,試驗期為14 d。

1.3飼養管理 試驗期間按常規飼養管理,免疫消毒程序一致,按豬場常規方法進行。基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧配方及主要營養成分

1.4樣品采集 試驗結束后,供試豬全部屠宰取樣測定,屠宰前禁食24 h,禁水30 min。

1.5生理生化指標測定

1.5.1鋅含量測定 準確稱取組織樣品0.5~1.0 g,置電爐上低溫炭化,待炭化至無煙時轉移至馬福爐中500℃干法灰化6 h,在干燥器中冷卻后用6M鹽酸溶解,用去離子雙蒸水定容,在AA6501原子吸收儀上測定;血清中鋅含量的測定采用直接稀釋法,取血清1.0 mL加入10%硝酸10 mL,用去離子雙蒸水稀釋定容后在原子吸收儀上測定。

1.5.2消化酶活性測定 蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶測定按照試劑盒說明書操作,試劑盒購自南京某生物工程研究所。

1.5.3堿性磷酸酶和肝臟指標測定 堿性磷酸酶、Cu-Zn SOD、MDA和MT測定按相關試劑盒說明書操作,其中堿性磷酸酶、Cu-Zn SOD和MDA試劑盒購自南京某生物工程研究所,MT試劑盒購自美國某公司。

1.6數據處理與分析 試驗數據采用SPSS 16.0軟件中的單因素方差分析,采用LSD法進行多重比較,以P<0.05為差異性顯著。

2 試驗結果

2.1鋅對仔豬采食量的影響 詳見圖1。

注:柱型圖上方標有不同小寫字母者表示差異顯著(P<0.05)。

由圖1可見,不同水平的鋅處理對仔豬采食量有明顯影響。與對照組相比,試驗Ⅰ組仔豬的采食量提高36.67%(P<0.05),試驗Ⅱ組仔豬的采食量降低26.93%(P<0.05);試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組之間差異顯著(P<0.05)。

2.2鋅對仔豬體內鋅水平的影響 詳見表2。

表2 鋅對仔豬血清和組織鋅水平的影響

由表2可見,鋅對仔豬不同組織鋅和血清鋅水平的影響存在明顯差異。與對照組相比,試驗Ⅱ組血清鋅含量提高134.6%(P<0.05),試驗Ⅰ組與對照組之間差異不顯著(P>0.05);試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組肝臟鋅含量分別比對照組提高22.87%(P<0.05)和46.30%(P<0.05);腎臟鋅含量分別比對照組提高25.01%(P<0.05)和43.37%(P<0.05);空腸鋅含量分別比對照組提高28.1%(P<0.05)和30.99%(P<0.05)。脾臟、股骨和肌肉中鋅含量各組差異不明顯(P>0.05)。

2.3鋅對仔豬消化酶的影響 詳見表3。

表3 鋅對仔豬胃、十二指腸、胰腺組織中酶活的影響

由表3可見,與對照組相比,試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的胃蛋白酶分別提高18.78%(P<0.05),13.39%(P<0.05);試驗Ⅰ組十二指腸淀粉酶比對照組提高33.91%(P<0.05),而試驗Ⅱ組與試驗Ⅰ組及對照組相比,差異不顯著(P>0.05);試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組十二指腸脂肪酶則分別比對照組提高26.93%(P<0.05)和16.02%(P<0.05);試驗Ⅰ組的胰腺淀粉酶比對照組提高36.66%(P<0.05),試驗Ⅱ組則差異不顯著(P>0.05);十二指腸總蛋白水解酶、胰脂肪酶和胰蛋白酶各組之間差異不顯著(P>0.05)。

2.4鋅對仔豬血清和肝臟生理生化指標的影響 詳見表4。

表4 鋅對仔豬血清和肝臟生理生化指標的影響

由表4可見,與對照組相比,試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組血清ALP活性分別提高19.29%(P<0.05)和52.18%(P<0.05);而試驗Ⅱ組的Cu-Zn SOD活性則比對照組降低9.93%(P<0.05),試驗Ⅰ組與對照組之間差異不明顯(P>0.05);試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的MT含量分別比對照組提高13.83%(P<0.05)和12.39%(P<0.05),而MDA含量分別比對照組降低25.30%(P<0.05)和25.92%(P<0.05)。

3 小結與討論

3.1鋅對仔豬采食量的影響 鋅是仔豬體內多種酶組成成分,參與味覺素的組成,促進味蕾的生長發育。本試驗結果表明,注射2 mg/kg鋅可顯著促進仔豬采食,注射4 mg/kg鋅則可顯著抑制仔豬的采食。

Hahn等(1993)[2]報道,在早期斷奶仔豬日糧中添加高鋅,能明顯提高仔豬的采食量和日增重,且發現在血漿鋅濃度為1.5 mg/L左右時能促進仔豬的隨意采食量,在此范圍之外就可引起營養不足或中毒。本試驗4 mg/kg體重鋅的注射劑量可能超出了仔豬的生理耐受力,導致仔豬應激反應,造成采食量下降。

由此可見,給仔豬注射適量的硫酸鋅有提高采食量的明顯作用,超過一定范圍則可引起采食量下降、營養不足,甚至中毒。

3.2鋅對仔豬血清鋅和組織鋅含量的影響 目前,血漿鋅是評價動物機體鋅營養狀況最常用的指標之一,血漿鋅含量降低是鋅營養性缺乏的一個早期和持續征候。本試驗結果表明,注射硫酸鋅能顯著提高仔豬血清鋅和肝、腎、空腸中的鋅水平,對脾臟和股骨鋅水平則無顯著影響。

張彩英等(2010)[3]報道,高劑量(3 000 mg/kg)氧化鋅可明顯提高仔豬肝、腎和十二指腸的鋅含量。冷靜等(2003)[4]報道,添加高鋅可明顯提高肝、腎、趾骨、血清、毛發和糞便中的鋅含量,而脾臟鋅含量則隨高鋅添加量的變化差異不顯著。

3.3鋅對仔豬消化酶的影響 動物采食不僅受飼料成分、氣味、性質和飼養管理制度等的影響,而且還受胃腸道的消化能力,如胃腸運動和消化酶活性等因素以及機體代謝狀態的影響。腸道中的消化酶主要來自小腸液和胰液,其中淀粉酶、脂肪酶和蛋白水解酶是3類重要的消化水解酶。

本研究結果表明,試驗Ⅰ組(2 mg/kg)與對照組相比顯著提高了胃蛋白、十二指腸淀粉酶、脂肪酶以及胰淀粉酶的活性,而十二指腸總蛋白水解酶、胰脂肪酶和胰蛋白酶的活性則無顯著影響。

3.4鋅對仔豬血清ALP和肝臟生理生化指標的影響 據資料報道,鋅參與動物體內200多種酶的組成,與300多種酶的活性有關。其中堿性磷酸酶(ALP)是機體內一個重要的鋅依賴酶,其活性的發揮與血液鋅含量密切相關。ALP在骨骼和營養物質代謝中發揮著重要作用,當ALP活性升高時,可提高成骨細胞的活性,促進鈣、磷沉積。缺鋅時可使ALP活性降低,導致骨鈣化代謝障礙,進而抑制骨骼的生長發育。

本試驗結果表明,注射硫酸鋅可顯著提高ALP的活性。銅鋅超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)是機體內一類重要的抗氧化劑,能清除體內的超氧陰離子自由基,保護細胞免受損傷,在機體的氧化和抗氧化平衡中發揮著重要作用。本研究結果還表明,注射4 mg/kg硫酸鋅可使Cu-Zn SOD活性下降,而注射2 mg/kg硫酸鋅則無明顯影響。

據Carlson等(1999)[5]報道,早期斷奶仔豬飼喂高鋅日糧1~2周后對Cu-Zn SOD活性無顯著性影響,推測Cu-Zn SOD可能對高鋅不敏感。在本試驗中,4 mg/kg鋅使Cu-Zn SOD活性下降可能是導致仔豬采食量下降的重要原因之一。

金屬硫蛋白(MT)的主要作用是參與微量元素的儲存、運輸和代謝,清除自由基,重金屬解毒、增強機體的免疫力和抗應激能力,參與DNA的轉錄、翻譯等基因表達過程。本試驗結果表明,注射硫酸鋅可顯著提高肝臟MT的含量。

另外,機體通過酶系統和非酶系統產生氧自由基,后者能攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸,引發脂質過氧化作用,形成丙二醛(MDA)等脂質過氧化物,因而測試MDA水平常常可反映機體內脂質過氧化的程度,間接反映出細胞損傷程度。本試驗結果表明,注射鋅組可顯著降低MDA含量。

[1]許梓榮,王敏奇.高劑量鋅促進豬生長的機理探討[J].畜牧獸醫學報,2001,32(1):11-17.

[2]Hahn J D, Baker D H. Growth and plasma zinc responses of young pigs fed pharmacologic level of zinc[J]. Journal Animal Science, 1993,71:3020-3024.

[3]張彩英,曹華斌,胡國良等.日糧鋅源和添加鋅水平對斷奶仔豬組織鋅及糞便排泄鋅含量的影響[J].飼料工業,2010,31(22):1-4.

[4]冷靜,朱仁俊,馬黎.新添加水平對斷奶仔豬不同組織中鋅沉積的影響[J].河南農業科學,2003,11:48-50.

[5]Carlson MS, Hill GM, Link JE. Early and traditionally weaned nursery pigs benefit from phase-feeding pharmacological concentrations of zinc oxide: effect on metallothionein and mineral concentrations[J]. J. Anim. Sci,1999,77(5):1199-1207.

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