抑癌基因PTEN和基質金屬蛋白酶-2在腎癌的表達及意義

胡曉暉 陳洪波 朱圣亮 廖兆林 趙純雄

恩施州中心醫院泌尿外科，湖北恩施 445000

腎癌即腎細胞癌，是常見的泌尿系統惡性腫瘤之一，其發病率占全身惡性腫瘤的3%，僅次于膀胱癌居泌尿系腫瘤的第二位[1-2]。腎癌常起源于腎小管上皮細胞，常于50～70歲高發。PTEN基因是一種腫瘤抑制基因，在1997年被發現，具有脂質磷酸酶和蛋白磷酸酶雙重活性，人類多種腫瘤細胞中伴有PTEN基因的突變或者缺失[3]，已知機制金屬蛋白酶-2（MMP-2）主要降解細胞外基質（ECM），能夠為腫瘤掃除物理屏障，本實驗就是探討抑癌基因PTEN蛋白和MMP-2蛋白在腎癌中的表達情況以及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

所有手術標本組織均取自2008年6月～2011年6月我院的住院患者，臨床病理資料完整，所有患者術前均未接受化療或放療，所有病例病理診斷明確。65例腎癌標本均為透明細胞癌，其中，男 39例，女 26例，年齡 29～76歲，平均（56.9±5.31）歲；65 例正常腎臟組織來自非瘤（創傷、結石、炎癥以及活檢等）手術標本，其中，男29例，女36例，年齡9～65歲，平均（39.0±8.21）歲。標本所有標本均經10%福爾馬林溶液固定，石蠟包埋，4 μm厚連續切片。

1.2 試劑

兔抗人PTEN單克隆抗體、兔抗人MMP-2多克隆抗體均來自美國 SANTA CRUZ公司，SP9001試劑盒和DAB試劑盒均來自北京中杉生物工程公司。

1.3 結果判定

免疫組織化學染色采用鏈酶卵白素-生物素過氧化物酶法（SP法），染色步驟嚴格按說明書進行，用PBS代替一抗作陰性對照，細胞質或細胞核中呈現棕黃色染色顆粒為陽性細胞。光顯色程度的判斷方法，顯色程度計分：無顯色定為0分；淺黃色定為1分；棕黃色定為2分；棕褐色定為3分。本實驗數據統一采用總積分＞1，即為陽性表達作為統計分析的標準。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0統計軟件進行統計分析。計數資料采用χ2比較，并對頻數資料做關聯分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 正常腎臟組織和腎癌中抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表達

抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表達情況如表1所示，PTEN主要定位于癌細胞的胞質，呈棕黃色或棕褐色；MMP-2陽性表達也主要定位于胞質。兩組進行χ2檢驗，差異有統計學意義（P<0.05）。

表1 正常腎臟組織和腎癌中PTEN和MMP-2蛋白的表達（例）

2.2 抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表達與腎癌臨床因素的關系

抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表達與腎癌臨床病因素的關系：抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的異常表達與有無包膜、有無淋巴結轉移、分化程度和TNM分期有關（P<0.05）；與年齡、性別以及腫瘤的大小無關（P>0.05）。見表2。

表2 抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表達與腎癌臨床因素的關系（例）

2.3 腎癌中抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白表達的相關性

抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白表達共陽性表達8例，共陰性表達10例。經頻數相關分析：r=-0.332，P=0.007，二者呈負相關。見表3。

表3 腎癌中PTEN和MMP-2表達的相關性（例）

3 討論

國內外研究表明，抑癌基因PTEN參與多種細胞間信號調節，能使某些磷脂或蛋白激酶相應位點去磷酸化，調控細胞的黏附、遷移和分化等，并抑制細胞周期的運行，介導細胞凋亡。 已知在前列腺癌[4]、腦腫瘤[5]、膀胱癌[6]、黑色素瘤[7]以及神經內分泌瘤[8]等多種腫瘤中均為低表達。MMP-2蛋白可由腫瘤細胞和腫瘤周邊間質細胞產生，幾乎能降解細胞外基質的所有成分，在多種腫瘤組織中為高表達，如胃癌、喉癌等[9-10]。本研究與文獻報道一致。本研究結果顯示，MMP-2蛋白和抑癌基因PTEN蛋白的異常表達與有無包膜、有無淋巴結轉移、分化程度和TNM分期有關，提示二者的異常表達可能與腎癌癌發生發展關系密切。 進一步研究顯示，兩蛋白表達有相關，提示二者異常表達可能有相互協調作用，聯合檢測抑癌基因PTEN和MMP-2蛋白的表達可作為預測腎癌的轉移趨勢指標。

綜上所述，筆者認為抑癌基因PTEN蛋白的低表達和MMP-2蛋白在腎癌中高表達可能與腎癌的發生、發展、侵襲和轉移有密切的關系，聯合檢測二者的表達有助于深入的了解腎癌的發生發展，并為腎癌的診治提供依據；更深入研究抑癌基因PTEN蛋白的表達水平還有助于腫瘤的早期診斷，推動腎癌的基因治療，為腎癌的臨床治療提供新思路。

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