miR-127和miR-136在轉基因克隆綿羊胎盤中的表達分析及其靶基因的鑒定

胡圣偉，倪 偉，陳創夫，賽務加甫，務熱力·哈孜，郭吉星

(1.石河子大學 動物科技學院，新疆 石河子 832000;2.石河子大學 生命科學學院，新疆 石河子 832000)

目前，通過體細胞核移植技術己經成功培 育 出 綿 羊[1]、牛[2]、山 羊[3]、豬[4]、大鼠[5]、騾子[6]和狗[7]等多種哺乳動物，尤其是在利用該技術成功獲得具有一定性狀的轉基因克隆綿羊、牛和豬后，顯示出這一技術誘人的應用前景。但是，體細胞克隆動物在孕期流產率較高，只有少數能發育到妊娠末期或成年，即使存活的克隆動物也存在一些健康和器官發育異常的問題。研究發現很多克隆動物的發育異常都與其胎盤發育缺陷相關[8]。克隆綿羊胎盤發育缺陷導致大量胚胎在妊娠階段發育停滯或流失，胎盤表現出子葉數量減少和血管系統發育缺陷等問題[9]。因此，胎盤發育缺陷是導致克隆動物效率低下的重要原因之一。然而，目前克隆動物胎盤發育異常的分子機制尚不清楚。

MicroRNA(miRNA)是近幾年在真核生物中發現的一類內源性的具有調控功能的非編碼RNA分子，其在轉錄和轉錄后水平上調控基因的表達[10]。miRNA參與細胞的增殖、分化和凋亡等過程，在胚胎和胎盤發育過程中發揮重要的調控作用[11]。miR-127和miR-136是兩個位于印記基因retrotransposon-like(Rtl1)的GC島附近的miRNA，而Rtl1是一個在胎盤發育過程中起到重要調控作用的關鍵基因[12]。Cui等[13]發現，在克隆小鼠囊胚中 miR-127的表達量及其啟動子甲基化水平顯著異常，證實miR-127在體細胞克隆小鼠胚胎中未被正確重編程。推測miR-127的不完全重編程可能導致克隆動物胎盤發育缺陷。……